公开(公告)号：CN111004841B

公开(公告)日：2022-08-16

申请号：CN202010109696.7

申请日：2020-02-22

申请人： 黄志清

发明人： 黄志玲 ,  黄种山 ,  其他发明人请求不公开姓名

IPC分类号： C12Q1/6858

摘要： 本发明提供了一种基于双链DNA肽连接酶的JAK2基因g.[146452_146455delATGA]突变检测试剂盒及方法，是在指数扩增前就直接先对目标基因突变片段进行捕获富集，然后再对目标基因突变片段进行特异性扩增和检测的。JAK2基因g.[146452_146455delATGA]检测试剂盒主要包括：dDPlaseII连接酶，dDPlaseII连接酶缓冲液，RNase H酶，磁载多肽Ps，RNA引物Pr，DNA引物Pn，DNA片段Pd和DNA引物Pm，其中dDPlaseII连接酶其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示；检测方法主要包括前扩增、RNase H酶消化、dDPlaseII酶连接和磁珠分离、特异性扩增这4部分。本发明提供的检测试剂盒和检测方法，具有特异性强和准确高效、简便经济的特点，可以有效检测出样本中含量低至1%的JAK2基因g.[146452_146455delATGA]突变，可以应用于男性结直肠癌患者肺转移的预测和诊治中。

公开(公告)号：CN111088363B

公开(公告)日：2022-08-16

申请号：CN202010109655.8

申请日：2020-02-22

申请人： 黄志清

发明人： 黄志玲 ,  黄种山 ,  其他发明人请求不公开姓名

IPC分类号： C12Q1/6886 ,  C12Q1/6869 ,  C12Q1/6806

摘要： 本发明提供了一种基于双链DNA肽连接酶的JAK1基因g.[227149insA]突变检测试剂盒及方法，是在指数扩增前就直接先对目标基因突变片段进行捕获富集，然后再对目标基因突变片段进行特异性扩增和检测的。JAK1基因g.[227149insA]检测试剂盒主要包括：dDPlaseII连接酶，dDPlaseII连接酶缓冲液，RNase H酶，磁载多肽Ps，RNA引物Pr，DNA引物Pn，DNA片段Pd和DNA引物Pm，其中dDPlaseII连接酶其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示；检测方法主要包括前扩增、RNase H酶消化、dDPlaseII酶连接和磁珠分离、特异性扩增这4部分。本发明提供的检测试剂盒和检测方法，具有特异性强和准确高效、简便经济的特点，可以有效检测出样本中含量低至1%的JAK1基因g.[227149insA]突变，可以应用于中年女性结直肠癌患者肝转移的预测和诊治中。

公开(公告)号：CN111004842B

公开(公告)日：2022-08-16

申请号：CN202010109698.6

申请日：2020-02-22

申请人： 黄志清

发明人： 黄志玲 ,  黄种山 ,  其他发明人请求不公开姓名

IPC分类号： C12Q1/6858

摘要： 本发明提供了一种基于单链RNA肽连接酶的JAK2基因g.[146452_146455delATGA]突变检测试剂盒及方法，是在指数扩增前就直接先对目标突变基因mRNA片段进行捕获富集，然后再对目标基因突变片段进行特异性扩增和检测的。JAK2基因g.[146452_146455delATGA]检测试剂盒主要包括：sRPlaseI连接酶，sRPlaseI连接酶缓冲液，RNase H酶，磁载多肽Ps，短DNA片段P1和P2，引物Pn和Pm，其中sRPlaseI连接酶其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示；检测方法主要包括杂交和RNase H酶消化、sRPlaseI酶连接和磁珠分离、特异性扩增这3部分。本发明提供的检测试剂盒和检测方法，具有特异性强和准确高效、简便经济的特点，可以有效检测出样本中含量低至1%的JAK2基因g.[146452_146455delATGA]突变，可以应用于男性结直肠癌患者肺转移的预测和诊治中。

公开(公告)号：CN111004843B

公开(公告)日：2022-08-16

申请号：CN202010109703.3

申请日：2020-02-22

申请人： 黄志清

发明人： 黄志玲 ,  黄种山 ,  其他发明人请求不公开姓名

IPC分类号： C12Q1/6858

摘要： 本发明提供了一种基于单链DNA肽连接酶的JAK1基因g.[227149insA]突变检测试剂盒及方法，是在指数扩增前就直接先对目标突变基因cDNA片段进行捕获富集，然后再对目标基因突变片段进行特异性扩增和检测的。JAK1基因g.[227149insA]检测试剂盒主要包括：sDPlaseI连接酶，sDPlaseI连接酶缓冲液，耐热RNase H酶，磁载多肽Ps，RNA引物Pr，DNA引物Pn，DNA片段Pd和DNA引物Pm，其中sDPlaseI连接酶其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示；检测方法主要包括反转录、耐热RNase酶消化、sDPlaseI酶连接和磁珠分离、特异性扩增这4部分。本发明提供的检测试剂盒和检测方法，具有特异性强和准确高效、简便经济的特点，可以有效检测出样本中含量低至1%的JAK1基因g.[227149insA]突变，可以应用于中年女性结直肠癌患者肝转移的预测和诊治中。

公开(公告)号：CN110964834B

公开(公告)日：2022-08-16

申请号：CN202010109702.9

申请日：2020-02-22

申请人： 黄志清

发明人： 黄志玲 ,  黄种山 ,  其他发明人请求不公开姓名

IPC分类号： C12Q1/6886 ,  C12Q1/6869

摘要： 本发明提供了一种基于双链DNA肽连接酶的JAK1基因g.[227149insA]突变检测试剂盒及方法，是在指数扩增前就直接先对目标基因突变片段进行捕获富集，然后再对目标基因突变片段进行特异性扩增和检测的。JAK1基因g.[227149insA]检测试剂盒主要包括：dDPlaseI连接酶，dDPlaseI连接酶缓冲液，RNase H酶，磁载多肽Ps，RNA引物Pr，DNA引物Pn，DNA片段Pd和DNA引物Pm，其中dDPlaseI连接酶其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示；检测方法主要包括前扩增、RNase H酶消化、dDPlaseI酶连接和磁珠分离、特异性扩增这4部分。本发明提供的检测试剂盒和检测方法，具有特异性强和准确高效、简便经济的特点，可以有效检测出样本中含量低至1%的JAK1基因g.[227149insA]突变，可以应用于中年女性结直肠癌患者肝转移的预测和诊治中。