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    基于单链RNA肽连接酶的JAK2基因特定突变检测试剂盒及方法
    1.
    发明授权
    基于单链RNA肽连接酶的JAK2基因特定突变检测试剂盒及方法 有权 转让

    公开(公告)号：CN111004842B

    公开(公告)日：2022-08-16

    申请号：CN202010109698.6

    申请日：2020-02-22

    申请人： 黄志清

    发明人： 黄志玲 ,  黄种山 ,  其他发明人请求不公开姓名

    IPC分类号： C12Q1/6858

    摘要： 本发明提供了一种基于单链RNA肽连接酶的JAK2基因g.[146452_146455delATGA]突变检测试剂盒及方法，是在指数扩增前就直接先对目标突变基因mRNA片段进行捕获富集，然后再对目标基因突变片段进行特异性扩增和检测的。JAK2基因g.[146452_146455delATGA]检测试剂盒主要包括：sRPlaseI连接酶，sRPlaseI连接酶缓冲液，RNase H酶，磁载多肽Ps，短DNA片段P1和P2，引物Pn和Pm，其中sRPlaseI连接酶其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示；检测方法主要包括杂交和RNase H酶消化、sRPlaseI酶连接和磁珠分离、特异性扩增这3部分。本发明提供的检测试剂盒和检测方法，具有特异性强和准确高效、简便经济的特点，可以有效检测出样本中含量低至1%的JAK2基因g.[146452_146455delATGA]突变，可以应用于男性结直肠癌患者肺转移的预测和诊治中。

    912位点发生突变的RanBP9突变基因及其应用
    2.
    发明授权
    912位点发生突变的RanBP9突变基因及其应用 失效

    公开(公告)号：CN107641626B

    公开(公告)日：2018-06-01

    申请号：CN201711177375.5

    申请日：2017-11-23

    申请人： 黄志清

    发明人： 黄志清 ,  其他发明人请求不公开姓名

    IPC分类号： C12N15/12 ,  C12Q1/6883 ,  C12Q1/6869

    摘要： 本发明提供了一种发生了c.912G>T突变的RanBP9突变基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示，它是人类男性生精障碍的致病基因。本发明还提供了基于多重PCR捕获联合二代DNA测序的RanBP9致病基因外显子突变筛选方法，最后利用Sanger测序对突变进行验证；其中PCR捕获引物组包含扩增引物序列SEQ ID NO:7‑12，用于Sanger测序的RanBP9基因c.912G>T突变片段的扩增引物序列如SEQ ID NO:11‑12所示。本发明提供的RanBP9致病基因形式尚未被报道，可以为该病致病机理的解析和检测方法的构建等提供依据和奠定基础。

    基于双链DNA肽连接酶的JAK2基因特定突变检测试剂盒及方法
    4.
    发明授权
    基于双链DNA肽连接酶的JAK2基因特定突变检测试剂盒及方法 有权 转让

    公开(公告)号：CN111004841B

    公开(公告)日：2022-08-16

    申请号：CN202010109696.7

    申请日：2020-02-22

    申请人： 黄志清

    发明人： 黄志玲 ,  黄种山 ,  其他发明人请求不公开姓名

    IPC分类号： C12Q1/6858

    摘要： 本发明提供了一种基于双链DNA肽连接酶的JAK2基因g.[146452_146455delATGA]突变检测试剂盒及方法，是在指数扩增前就直接先对目标基因突变片段进行捕获富集，然后再对目标基因突变片段进行特异性扩增和检测的。JAK2基因g.[146452_146455delATGA]检测试剂盒主要包括：dDPlaseII连接酶，dDPlaseII连接酶缓冲液，RNase H酶，磁载多肽Ps，RNA引物Pr，DNA引物Pn，DNA片段Pd和DNA引物Pm，其中dDPlaseII连接酶其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示；检测方法主要包括前扩增、RNase H酶消化、dDPlaseII酶连接和磁珠分离、特异性扩增这4部分。本发明提供的检测试剂盒和检测方法，具有特异性强和准确高效、简便经济的特点，可以有效检测出样本中含量低至1%的JAK2基因g.[146452_146455delATGA]突变，可以应用于男性结直肠癌患者肺转移的预测和诊治中。

    702位点发生突变的RanBP9突变基因及其应用
    5.
    发明授权
    702位点发生突变的RanBP9突变基因及其应用 失效

    公开(公告)号：CN107805638B

    公开(公告)日：2018-07-06

    申请号：CN201711177391.4

    申请日：2017-11-23

    申请人： 黄志清

    发明人： 黄志清 ,  其他发明人请求不公开姓名

    IPC分类号： C12N15/12 ,  C12Q1/6883 ,  C12Q1/6869

    摘要： 本发明提供了一种发生了c.702T>G突变的RanBP9突变基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示，它是人类男性生精障碍的致病基因。本发明还提供了基于多重PCR捕获联合二代DNA测序的RanBP9致病基因外显子突变筛选方法，最后利用Sanger测序对突变进行验证；其中PCR捕获引物组包含扩增引物序列SEQ ID NO:7‑12，用于Sanger测序的RanBP9基因c.702T>G突变片段的扩增引物序列如SEQ ID NO:9‑10所示。本发明提供的RanBP9致病基因形式尚未被报道，可以为该病致病机理的解析和检测方法的构建等提供依据和奠定基础。

    基于单链DNA肽连接酶的JAK1基因特定突变检测试剂盒及方法
    9.
    发明授权
    基于单链DNA肽连接酶的JAK1基因特定突变检测试剂盒及方法 有权 转让

    公开(公告)号：CN111004843B

    公开(公告)日：2022-08-16

    申请号：CN202010109703.3

    申请日：2020-02-22

    申请人： 黄志清

    发明人： 黄志玲 ,  黄种山 ,  其他发明人请求不公开姓名

    IPC分类号： C12Q1/6858

    摘要： 本发明提供了一种基于单链DNA肽连接酶的JAK1基因g.[227149insA]突变检测试剂盒及方法，是在指数扩增前就直接先对目标突变基因cDNA片段进行捕获富集，然后再对目标基因突变片段进行特异性扩增和检测的。JAK1基因g.[227149insA]检测试剂盒主要包括：sDPlaseI连接酶，sDPlaseI连接酶缓冲液，耐热RNase H酶，磁载多肽Ps，RNA引物Pr，DNA引物Pn，DNA片段Pd和DNA引物Pm，其中sDPlaseI连接酶其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示；检测方法主要包括反转录、耐热RNase酶消化、sDPlaseI酶连接和磁珠分离、特异性扩增这4部分。本发明提供的检测试剂盒和检测方法，具有特异性强和准确高效、简便经济的特点，可以有效检测出样本中含量低至1%的JAK1基因g.[227149insA]突变，可以应用于中年女性结直肠癌患者肝转移的预测和诊治中。

    一种JAK1基因特定突变检测试剂盒及其检测方法
    10.
    发明授权
    一种JAK1基因特定突变检测试剂盒及其检测方法 有权 转让

    公开(公告)号：CN110964834B

    公开(公告)日：2022-08-16

    申请号：CN202010109702.9

    申请日：2020-02-22

    申请人： 黄志清

    发明人： 黄志玲 ,  黄种山 ,  其他发明人请求不公开姓名

    IPC分类号： C12Q1/6886 ,  C12Q1/6869

    摘要： 本发明提供了一种基于双链DNA肽连接酶的JAK1基因g.[227149insA]突变检测试剂盒及方法，是在指数扩增前就直接先对目标基因突变片段进行捕获富集，然后再对目标基因突变片段进行特异性扩增和检测的。JAK1基因g.[227149insA]检测试剂盒主要包括：dDPlaseI连接酶，dDPlaseI连接酶缓冲液，RNase H酶，磁载多肽Ps，RNA引物Pr，DNA引物Pn，DNA片段Pd和DNA引物Pm，其中dDPlaseI连接酶其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示；检测方法主要包括前扩增、RNase H酶消化、dDPlaseI酶连接和磁珠分离、特异性扩增这4部分。本发明提供的检测试剂盒和检测方法，具有特异性强和准确高效、简便经济的特点，可以有效检测出样本中含量低至1%的JAK1基因g.[227149insA]突变，可以应用于中年女性结直肠癌患者肝转移的预测和诊治中。