一种整合型慢病毒载体表达系统

    公开(公告)号:CN107043785B

    公开(公告)日:2021-04-27

    申请号:CN201610083059.0

    申请日:2016-02-05

    发明人: 姜军 吴庆 陈琛 沈浩

    IPC分类号: C12N15/867

    摘要: 本发明涉及生物技术领域,特别是涉及一种适合肿瘤细胞研究的整合型慢病毒载体表达系统。本发明提供一种整合型慢病毒载体表达系统,包括KL15490载体、pHelper 1.0载体和pCMV‑VSV‑G载体和宿主细胞,将系统中的KL15490载体、pHelper 1.0载体和pCMV‑VSV‑G载体共同转染宿主细胞后,即在宿主细胞中包装获得慢病毒载体。本发明所提供整合型慢病毒载体表达系统中所使用的慢病毒载体骨架小,独立表达EGFP和Puromycin,可以插入的外源基因长达4000bps,而且包装的病毒滴度高,能够提供高效的基因转移、长期的基因表达,特别适合肿瘤细胞。

    引物组合及其用途
    4.
    发明公开

    公开(公告)号:CN110904204A

    公开(公告)日:2020-03-24

    申请号:CN201811075995.2

    申请日:2018-09-14

    摘要: 本发明属于分子生物学的高通量测序领域,具体涉及一种引物组合及其用途。所述引物组合所适用的待扩增对象的结构包括自5’-3’依次排布的:第一固定序列-可变序列-第二固定序列,所述引物组合至少包括第一正向引物和第二正向引物,所述第一正向引物的结构中包括5’-随机序列-特异性扩增序列-3’,所述第二正向引物的结构中包括5’-特异性扩增序列-3’。使用本发明的引物组合制备文库,可平衡待扩增对象中的固定序列带来的固定碱基比例,使得每个位置的碱基比例适合于测序要求,克服了现有技术中所存在的操作繁杂,测序数据质量不高的问题。

    一种重组腺相关病毒载体生产工艺的建立

    公开(公告)号:CN108330147A

    公开(公告)日:2018-07-27

    申请号:CN201710042618.8

    申请日:2017-01-20

    IPC分类号: C12N15/864 C12N7/00

    摘要: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种重组腺相关病毒载体生产工艺的建立。本发明首先提供一种重组腺相关病毒载体制备方法,包括如下步骤:(1)将含有重组腺相关病毒载体基因组序列的质粒转染入培养细胞;(2)在合适的条件下培养步骤(1)所得细胞,收集细胞培养上清液,所述细胞培养上清液是指含有重组腺相关病毒载体的细胞和培养上清液的混合物;(3)将步骤(2)所得的细胞培养上清液,进行纯化和浓缩,即得重组腺相关病毒载体。所述制备方法基本适用于大多数rAAV血清型和突变体,生产获得的重组腺相关病毒载体具有高滴度和高纯度,免疫原性低,安全高效的优点。

    人CIT基因和EGFR基因治疗肿瘤的用途及其相关药物

    公开(公告)号:CN104232744B

    公开(公告)日:2017-05-17

    申请号:CN201310232000.X

    申请日:2013-06-09

    摘要: 本发明涉及生物技术领域,具体公开了单独的人CIT基因;以及人CIT基因与人EGFR基因作为协同施药靶标,在制备或筛选肿瘤治疗药物中的用途。本发明还进一步构建了CIT基因小干扰RNA、CIT基因干扰慢病毒载体、CIT基因干扰慢病毒,并公开了他们在与EGFR基因协同治疗肿瘤中的用途。本发明提供的siRNA或者包含该siRNA序列的慢病毒载体、慢病毒能够特异性抑制人CIT基因和/或人EGFR基因的表达,尤其是慢病毒,本发明的CIT基因干扰慢病毒能单独、或者与EGFR基因干扰慢病毒协同抑制肿瘤细胞的生长,促进肿瘤细胞凋亡,在肿瘤治疗中具有重要意义。

    人CDKL3基因和EGFR基因治疗肿瘤的用途及其相关药物

    公开(公告)号:CN104232743B

    公开(公告)日:2016-12-28

    申请号:CN201310231941.1

    申请日:2013-06-09

    IPC分类号: C12Q1/68 A61K48/00 A61P35/00

    摘要: 本发明涉及生物技术领域,具体公开了单独的人CDKL3基因;以及人CDKL3基因与人EGFR基因作为协同施药靶标,在制备或筛选肿瘤治疗药物中的用途。本发明还进一步构建了CDKL3基因小干扰RNA、CDKL3基因干扰慢病毒载体、CDKL3基因干扰慢病毒,并公开了他们在与EGFR基因协同治疗肿瘤中的用途。本发明提供的siRNA或者包含该siRNA序列的慢病毒载体、慢病毒能够特异性抑制人CDKL3基因和/或人EGFR基因的表达,尤其是慢病毒,本发明的CDKL3基因干扰慢病毒能单独、或者与EGFR基因干扰慢病毒协同抑制肿瘤细胞的生长,促进肿瘤细胞凋亡,在肿瘤治疗中具有重要意义。