甜瓜叶片蔗糖磷酸合成酶的提取及活性测定方法

    公开(公告)号:CN105087514A

    公开(公告)日:2015-11-25

    申请号:CN201510570664.6

    申请日:2015-09-09

    IPC分类号: C12N9/10 C12Q1/48

    摘要: 本发明公开了一种甜瓜叶片蔗糖磷酸合成酶的提取及活性测定方法,包括以下步骤:(1)酶液提取:取新鲜的甜瓜叶片迅速置于研钵中,用冰浴过的提取缓冲液研磨,充分匀浆后高速冷冻离心,取上清液用离心式去盐柱脱盐,提取的酶液可直接用于酶活性测定;(2)酶活性测定:取上述酶液加入反应底物,给予不同的反应温度及反应时间,确定甜瓜叶片蔗糖磷酸合成酶最佳反应温度及反应时间,从而能更精确的反映酶的活性。本发明能够有效将初提取酶液中的盐分、糖分、离子等小分子物质除去,并优化了酶的反应条件,从而能够更精确地测定叶片中蔗糖磷酸合成酶的活性。