一种利用真菌微生物发酵生产蛋白酶K的生产工艺

    公开(公告)号:CN106701720A

    公开(公告)日:2017-05-24

    申请号:CN201611260642.0

    申请日:2016-12-30

    发明人: 杨立国 刘桓君

    IPC分类号: C12N9/60 C12R1/84

    CPC分类号: C12N9/6408 C12Y304/21064

    摘要: 本发明涉及一种饲料,尤其是涉及一种利用真菌微生物发酵生产蛋白酶K的生产工艺以及使用方法。本发明解决其技术同题所釆用的技术方案是:S1摇瓶种子培养阶段;S11试管活化;S12摇瓶活化;S13菌种平板培养;S15种子液的体积为摇瓶额定体积的5‑10%,液体培养基为含有1‑5g/kg癸基葡萄糖苷的MGY或BMGY,30℃,250‑300 rpm,培养16‑24h。S2发酵罐培养阶段;S21总体概述;S22甘油补料培养阶段;S23甲醇补料培养阶段。

    一种蚯蚓中蚓激酶的纯化方法

    公开(公告)号:CN105132398A

    公开(公告)日:2015-12-09

    申请号:CN201510512629.9

    申请日:2015-08-19

    IPC分类号: C12N9/68

    CPC分类号: C12N9/6408 C12Y304/21007

    摘要: 本发明公开了一种蚯蚓中蚓激酶的纯化方法,该方法采用阳离子交换层析法和凝胶过滤层析法从蚯蚓的匀浆液中分离纯化一种具有纤溶活性的纤溶酶,离子交换层析过程中采用CM Sephadex C-5作为填料,PBS作为配基,NaCl作为洗脱液。该组分经过SDS-PAGE检测为混合成分。实验结果表明它具有较高的纤溶蛋白酶活性。此方法简洁方便,成本低,适用于规模化生产。

    一种从蚯蚓中提取高活性蚓激酶的方法

    公开(公告)号:CN104342422A

    公开(公告)日:2015-02-11

    申请号:CN201310338922.9

    申请日:2013-08-06

    IPC分类号: C12N9/68

    CPC分类号: C12N9/6408 C12Y304/21007

    摘要: 一种从蚯蚓中提取高活性蚓激酶的方法,包括以下步骤:(1)选择蚯蚓;(2)清洗;(3)磨浆;(4)离心,用高速离心机经高速离心将盐析后的浆液的杂质去除,收集上清液,沉淀用盐溶液洗涤两次,再离心,再收集上清液,并把收集的上清液合并到一起;(5)超滤,将合并后的上清液进行第一次超滤,滤除不溶于水的大分子;将超滤后的上清液再次进行超滤,浓缩有效成分,当浓缩液达5%-10%浓度后,进入真空冷冻干燥机;(6)真空冷冻干燥;(7)包装。本发明可以从蚯蚓均浆液中一步获得全部蚓激酶组分,且具有简单易行,提取物有效成分高等特点,适合大规模生产。

    用于创伤调理和皮肤护理的新型蛋白酶

    公开(公告)号:CN102388135A

    公开(公告)日:2012-03-21

    申请号:CN201080015247.0

    申请日:2010-03-03

    CPC分类号: C12N9/6408

    摘要: 发明人已通过分子克隆鉴定出源自丝光绿蝇幼虫的蛋白酶,并且由于该蛋白酶具有可用于对创伤进行清创的活性而将其命名为清创酶。本发明描述了一种编码具有纤维蛋白和酪蛋白切割能力的丝氨酸蛋白酶的核酸分子,所述核酸分子是:(a)编码包含氨基酸序列SEQ ID NO:4或由氨基酸序列SEQ ID NO:4组成的丝氨酸蛋白酶的核酸分子;(b)包含核苷酸序列SEQ ID NO:3或由核苷酸序列SEQ ID NO:3组成的核酸分子;(c)编码氨基酸序列与(a)中所述的氨基酸序列具有至少80%同一性、优选至少85%同一性、更优选至少90%同一性且最优选至少95%同一性的丝氨酸蛋白酶的核酸分子;(d)由与(b)中所述的核苷酸序列具有至少80%同一性、优选至少85%同一性、更优选至少90%同一性且最优选至少95%同一性的核苷酸序列组成或包含该核苷酸序列的核酸分子;(e)与(d)所述的核酸分子简并的核酸分子;或(f)与(a)~(d)中任一项的核酸分子对应的其中T被U置换的核酸分子。