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公开(公告)号:CN111087461B
公开(公告)日:2022-06-14
申请号:CN202010033471.8
申请日:2020-01-13
申请人: 武汉科前生物股份有限公司
IPC分类号: C07K14/555 , C07K14/56 , C12N15/20 , C12N15/21 , C12N15/11 , C12N15/70 , A61K38/21 , A61P31/12
摘要: 本发明涉及一种重组蛋白、编码该重组蛋白的核酸及其应用,具体为通过优化牛III型干扰素λ3和I型干扰素α基因的核苷酸序列,再将两者构建表达载体后转化至原核宿主细胞中进行表达。在对核苷酸序列优化后,牛III型干扰素λ3和I型干扰素α基因的表达水平显著上升,牛III型干扰素λ3表达水平提高了50.2%,I型干扰素α表达水平提高了61%,并且两者的抗病毒活性也得到一定的提升。本发明使牛III型干扰素λ3和I型干扰素α原核表达后以可溶性蛋白的形式存在,节约了制备成本,使其可以大量应用于预防和治疗牛病毒性疾病。
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公开(公告)号:CN109206502B
公开(公告)日:2022-03-04
申请号:CN201811126498.0
申请日:2018-09-26
申请人: 东北农业大学
摘要: 本发明公开了一种猫干扰素ω及其制备方法和在抗病毒中的应用。所述的猫干扰素ω的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。优选的,编码所述的猫干扰素ω的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。此外,本发明还公开了一种制备所述的猫干扰素ω的方法及其在制备抗病毒药物中的应用。本发明采用病毒刺激(猫肠道冠状病毒)结合干扰素诱生剂刺激(聚肌胞poly I:C)方法对宠物猫体进行刺激,进而诱导猫干扰素基因表达。然后通过PCR扩增得到了一条猫干扰素ω基因,细胞试验显示本发明获得的一种猫干扰素ω具有明显的抗病毒活性,并优于现有已知猫干扰素。本发明的提出为猫干扰素制品的进一步研发和应用奠定了基础。
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公开(公告)号:CN109206501B
公开(公告)日:2022-03-04
申请号:CN201811125211.2
申请日:2018-09-26
申请人: 东北农业大学
摘要: 本发明公开了一种猫干扰素ω、其编码基因及其在抗病毒方面的应用。所述的猫干扰素ω的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。优选的编码所述的猫干扰素ω的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。此外,本发明还公开了一种制备所述的猫干扰素ω的方法及其在制备抗病毒药物中的应用。本发明采用病毒刺激(猫肠道冠状病毒)结合干扰素诱生剂刺激(聚肌胞poly I:C)方法对宠物猫体进行刺激,进而诱导猫干扰素基因表达。然后通过PCR扩增得到了一条猫干扰素ω基因,细胞试验显示本发明获得的一种猫干扰素ω具有明显的抗病毒活性,并优于现有已知猫干扰素。本发明的提出为猫干扰素制品的进一步研发和应用奠定了基础。
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公开(公告)号:CN113683675A
公开(公告)日:2021-11-23
申请号:CN202110429461.0
申请日:2021-04-21
申请人: 北京志道生物科技有限公司
摘要: 本发明公开了一种干扰素‑κ突变体,其通过在野生型干扰素‑κ的基础上,将自由的半胱氨酸残基突变为半胱氨酸之外的氨基酸,和/或将能够形成氧化修饰的甲硫氨酸残基部分或全部突变为甲硫氨酸之外的氨基酸。本发明的干扰素‑κ突变体体外复性和纯化方便,并且产物均一。
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公开(公告)号:CN113430220A
公开(公告)日:2021-09-24
申请号:CN202110943946.1
申请日:2021-08-17
申请人: 江苏恒丰强生物技术有限公司
IPC分类号: C12N15/70 , C12N15/20 , C12P21/02 , C07K14/555 , C07K1/14 , C07K1/34 , C07K1/22 , C07K1/36 , C12R1/19
摘要: 本发明公开一种表达可溶性猫ω干扰素的基因工程菌合成方法、构建方法及应用,查找编码猫ω干扰素成熟蛋白的基因序列利用软件预测此基因可能含有一段信号肽序列,为其氨基酸序列的前23个氨基酸,利用软件检测此序列功能,发现其为帮助蛋白分泌的信号肽而非蛋白结构所必需,因此去掉信号肽序列,剩下编码成熟猫ω干扰素的基因序列,其核苷酸长度为543bp;将编码猫ω干扰素的密码子与大肠杆菌偏好性密码子进行比对,根据密码子的兼并性,在不改变氨基酸组成和排列的基础上,对已知的编码猫ω干扰素的基因序列进行改造,替换为大肠杆菌偏好的密码子。本发明所制备的基因工程菌的阴性对照孔的细胞未产生任何病变,因此干扰素本身对细胞没有毒害作用。
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公开(公告)号:CN113337530A
公开(公告)日:2021-09-03
申请号:CN202110622916.0
申请日:2021-06-04
申请人: 西北农林科技大学
IPC分类号: C12N15/70 , C12N15/20 , C12N15/62 , C12N15/10 , C12N1/21 , C12P21/02 , C07K14/555 , C07K1/14 , C07K1/34 , C12R1/19
摘要: 本发明公开了一种可溶性bIFNT成熟肽基因克隆菌株的构建方法,包括以下步骤:(1)bIFNT成熟肽基因的扩增与获取;(2)bIFNT成熟肽基因克隆质粒的构建;(3)可溶性bIFNT成熟肽基因克隆菌株的构建;其中,所述可溶性bIFNT成熟肽基因克隆菌株的bIFNT成熟肽的基因序列如SEQ.ID.NO.1所示。同时,本发明还公开了可溶性bIFNT成熟肽表达菌株的构建方法及产物的诱导表达和纯化方法。本发明提供的方法成功构建了与天然bIFNT成熟肽基因序列完全一致的可溶性bIFNT成熟肽基因克隆菌株和可溶性bIFNT成熟肽表达菌株,应用大肠杆菌原核表达体系,可实现低成本大规模制备rbIFNT。
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公开(公告)号:CN108314724B
公开(公告)日:2021-06-11
申请号:CN201810176714.6
申请日:2015-04-23
申请人: 中国农业科学院生物技术研究所
IPC分类号: C07K14/555 , C12N15/20 , C12N15/866 , A61P31/18 , A61P31/20 , A61P31/14 , A61K38/21
摘要: 本发明公开了一种猫ω11干扰素突变体及其制备方法和应用,属于猫ω11干扰素的制备及应用领域。本发明经过比对猫ω干扰素13个亚型的基因序列及氨基酸序列,对猫ω11干扰素进行氨基酸定点突变,获得猫ω11干扰素突变体。本发明进一步公开了制备所述猫ω11干扰素突变体的方法,包括:将编码ω11干扰素突变体的基因克隆到杆状病毒转移载体中,与杆状病毒重组感染昆虫宿主,表达外源基因,获得猫ω11干扰素蛋白表达产物。本发明方法工艺简单,可高效、稳定地获得能安全使用的猫ω11干扰素,其抗病毒活性呈显著提升;其中,基因突变可使表达的干扰素的抗病毒活性提高61%,对突变基因进行优化可使突变基因表达的产物抗病毒活性提高21%,突变和优化可使表达干扰素的活性提高96%以上。
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公开(公告)号:CN112661835A
公开(公告)日:2021-04-16
申请号:CN202110053096.8
申请日:2021-01-15
申请人: 中国农业科学院特产研究所 , 吉林大学
摘要: 本发明公开了一种水貂IFN‑ε成熟肽的制备方法。本发明还公开了一种优化后的水貂IFN‑ε成熟肽的编码核苷酸序列,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过构建含有优化后的编码水貂IFN‑ε成熟肽基因的重组表达载体,并在大肠杆菌中成功表达。对其抗病毒活性进行分析,结果显示,得到的重组水貂IFN‑ε成熟肽具有明显的抗病毒活性。本发明的提出研制开发具有抗病毒活性的基因工程干扰素制剂,提供了一种有效的技术手段。
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公开(公告)号:CN112661833A
公开(公告)日:2021-04-16
申请号:CN202011560295.X
申请日:2020-12-25
申请人: 山东晶辉生物技术有限公司
摘要: 本发明公开了一种重组人干扰素hIFN‑κ基因工程菌株及其构建方法和用途。本发明将人干扰素‑κ(hIFN‑κ)的编码基因通过密码子优化导入大肠杆菌细胞,构建pET30a‑hIFN‑k‑BL21基因工程菌株。所构建的基因工程菌株经培养和诱导,实现了hIFN‑k基因在异源宿主细胞中的高效表达,极大提高了hIFN‑k蛋白的表达量,适用于工业化生产。
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公开(公告)号:CN110256552B
公开(公告)日:2021-02-19
申请号:CN201910503363.X
申请日:2019-06-11
申请人: 中国农业科学院生物技术研究所
IPC分类号: C07K14/555 , C12N15/20 , C12N15/866 , A61K38/21 , A61P31/12
摘要: 本发明公开了鸭λ干扰素突变体及其制备方法和应用。本发明首先确定以SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列为鸭λ干扰素原始氨基酸序列并对鸭λ干扰素所有氨基酸序列进行比对得到SEQ ID No.3所示的鸭λ干扰素保守序列,对其编码基因进行密码子优化得到SEQ ID No.5所示的优化基因。本发明还对该保守序列进行氨基酸单位点或多位点突变获得多个抗病毒活性提高的鸭λ干扰素突变体。本发明更进一步利用家蚕杆状病毒表达系统在家蚕生物反应器中表达所述的鸭λ干扰素或其突变体,所得到的突变体的抗病毒活性大幅提高,能够用于预防或治疗鸭病毒性疾病,对鸭养殖业中具有重大威胁的病毒性传染病具有显著的防御和抑制作用。
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