公开(公告)号：EP2634249B1

公开(公告)日：2016-08-17

申请号：EP12006938.0

申请日：2012-10-07

申请人： FLACOD GmbH

发明人： Granzow, Christof, Prof. Dr.

IPC分类号： C12N5/00 ,  G01N33/50

CPC分类号： G01N33/5011 ,  C12N5/0093 ,  G01N2500/10

公开(公告)号：EP2634249A1

公开(公告)日：2013-09-04

申请号：EP12006938.0

申请日：2012-10-07

申请人： FLACOD GmbH

发明人： Granzow, Christof, Prof. Dr.

IPC分类号： C12N5/00 ,  G01N33/50

CPC分类号： G01N33/5011 ,  C12N5/0093 ,  G01N2500/10

摘要： In dem Verfahren wird eine Malignomgewebeprobe ex vivo gereinigt, zerkleinert, in Kulturmedium suspendiert, einer Behandlung mit Kollagenase unterworfen und das Kollagenaseaufschlußprodukt wird zentrifugiert. Das gewonnene Pellet wird in Kulturmedium mittels eines Aufsauginstruments resuspendiert, dabei mehrmals aufgesogen und wieder zurückgegeben, und in ein Kulturgefäß überführt. Die so gewonnene Resuspension wird mikroskopisch mit Phasenoptik hinsichtlich Zellverbänden analysiert, die aufgrund ihres phänotypischen Erscheinungsbildes als Verband maligner Zellen oder als Verband von Endothelzellen oder als Verband von Fibroblasten identifizierbar sind, und die indentifizierten Zellverbände werden separiert.

摘要翻译： 恶性细胞和基质细胞从一个提示恶性肿瘤组织样品簇的簇的离体的分离，包括（a）清洁和粉碎提示恶性肿瘤组织样本成1-4毫米3>件，（b）中悬浮切碎的组织在培养基中， （c）中在36-37℃下]ç将所得到的悬浮液用胶原酶处理（即胶原酶消化），（D）在50倍克在室温下离心5分钟来获得胶原酶消化产物，（e）分离沉淀 并从产品的上清液中（d）中获得。 分离的恶性细胞和基质细胞在体外包括：（a）清洁一提示恶性肿瘤组织样品簇集群和压碎提示恶性肿瘤组织样本成1-4毫米3>件，（b）中悬浮切碎的组织在培养基中， （c）使在所得的悬浮液（即，消化胶原酶）（b）至胶原酶在36-37 [度]下以在室温50X克离心获得胶原酶消化产物（c）中进行5分钟的处理，（d）中 温度，（e）分离沉淀物，并从（d）中获得的产物的上清，（F）移液，并通过在吸收仪器由一个移液管尖端几次重悬由（E）在培养基中的小球，优选 ，优选4-6次，并移液和传递环到培养容器中，（G）相对于通过使用（优选与相光学倒置显微镜）的显微镜分析所述再悬浮（f）中获得的至少一个小区相关联的 ，在恶性细胞中的关联，其可以被 由它的内皮细胞的表型外观，或或协会确定可通过在成纤维细胞可以通过其表型外观和（h）分离所述识别的细胞簇被识别的关联其表型外观来识别。 因此独立权利要求中包括：（1）检查在离体的提示恶性肿瘤组织样品的恶性细胞的化疗剂和/或放射治疗剂的反应，包括使所述提示恶性肿瘤组织样本进入工艺如所提到的上述和分析细胞的确 被标识为恶性细胞簇; 和（2）检查化学治疗剂和/或放射治疗剂对前的提示恶性肿瘤组织样本体内包括孵育化学治疗剂和/或放射治疗剂与所述提示恶性肿瘤组织样品的生长抑制效应，分析细胞的数量和 /或细胞集落，和确定性采矿化疗和/或放射治疗剂，其中，所述提示恶性肿瘤组织样品消化成基质细胞，并使用上述方法恶性细胞的IC 50值，与化学治疗剂和/或放射治疗孵化前 剂和仅恶性肿瘤细胞温育与化学治疗剂和/或放射治疗剂和药物的IC 50值进行了分析。 ACTIVITY：血管生成抑制剂; 抑制细胞生长。 无生物数据给出。 作用机理：没有给出。