摘要:
Zur Gewinnung von Subtilisin werden Bakterien des Genus Bacillus in einem Fermenter auf synthetischem Medium kultiviert, wobei in einer ersten Anwachsphase mit einer NH₄-Anfangskonzentration von 0,5 bis 150 mM, insbesondere 1 bis 50 mM und Nachdosierung der C-Quelle für die Aufrechterhaltung ihrer Konzentration im Bereich von 100 mM bis 1 M bis zum Absinken der Ammoniumkonzentration unter einen N-limitierenden Wert in der Kultur zwischen 0,05 und 2 mM, insbesondere 0,1 und 0,3 mM gearbeitet wird, wonach der N-limitierende Wert der Ammoniumkonzentration aufrechterhalten und der Gehalt der C-Quelle zwischen 10 mM und 2 M eingestellt wird bis zum Ende der Produktionsphase, wonach das gebildete Subtilisin abgesondert wird. Als C-Quelle werden insbesondere Glycerin, Acetat oder Hexosen verwendet. Vorzugsweise wird die Biomassekonzentration im Medium durch Nachfüttern von C-Quelle erhöht. Ein Sauerstoffpartialdruck über der Kultur von > 11,5 Pa ist zweckmäßig. Als Proteaseproduzent dient insbesondere Bacillus licheniformis DSM 1969.