標的タンパク質とのリガンドの結合及び細胞関与を測定するための方法

    公开(公告)号:JP2018527921A

    公开(公告)日:2018-09-27

    申请号:JP2018507586

    申请日:2016-01-06

    IPC分类号: C12Q1/02 C12Q1/34

    摘要: 標的高分子への化合物の結合特性を検出しかつ定量的に測定するための方法が開示され、前記標的高分子は変性に供され、かつ短い酵素フラグメントなどの標識ペプチドに連結される。方法は、(i)標識ペプチドに連結された標的高分子を含むキメラ分子であって、前記標的高分子は、無傷の生存細胞によって及びその内部で発現されるキメラタンパク質であり得るキメラ分子、ならびに(ii)前記標的高分子への結合について測定されている化合物であって、前記標的高分子は変性に供される化合物、を含む流体混合物を使用する。化合物(例えば、標的高分子の小分子阻害剤)の結合を可能にした後、酵素フラグメント相補性などによって、標識ペプチドからのシグナルを検出する。このシグナルは、変性した及び変性していない標的高分子の間の差異を示し、そしてそれによりそれぞれ、化合物に結合していない標的高分子と、化合物に結合している標的高分子との間の差異を示す。 【選択図】図14