公开(公告)号：US6027891A

公开(公告)日：2000-02-22

申请号：US913547

申请日：1998-01-28

申请人： Magnus Von Knebel-Doberitz ,  Stefan Worner ,  Florian Emmerich

发明人： Magnus Von Knebel-Doberitz ,  Stefan Worner ,  Florian Emmerich

IPC分类号： C12N15/09 ,  C12Q1/68 ,  C12Q1/70

CPC分类号： C12Q1/686 ,  C12Q1/708

摘要： This invention relates to a method of detection of an mRNA having HPV and cellular sequences in a body sample, comprising the following steps:(a) obtaining a body sample;(b) isolating mRNA from the body sample of (a);(c) translating the mRNA of (b) into cDNA using a primer common for reverse transcription;(d) amplifying the cDNA of (c) by a PCR reaction with a 5' HPV primer and a 3' primer having sequences of the primer of (c);(e) cleaving the amplified cDNA of (d) with an endonuclease cleaving on the 5' side of the HPV polyadenylation sequence;(f) amplifying the non-cleaved cDNA of (e) with the primers of (d) or with "nested" primers; and(g) detecting the amplified cDNA of (f).Furthermore, this invention concerns the use of such a method of early detection of HPV-associated carcinomas and extreme dysplasias caused by HPV, respectively.

摘要翻译： PCT No.PCT / DE96 / 00306 Sec。 371日期1998年1月28日 102（e）日期1998年1月28日PCT提交1996年2月23日PCT公布。 WO96 / 26293 PCT出版物 日期：1996年8月29日本发明涉及检测身体样品中具有HPV和细胞序列的mRNA的方法，包括以下步骤：（a）获得身体样品; （b）从（a）的身体样品中分离mRNA; （c）使用通用于逆转录的引物将（b）的mRNA翻译成cDNA; （d）用5'HPV引物和具有（c）引物序列的3'引物通过PCR反应扩增（c）的cDNA; （e）用HPV聚腺苷酸化序列的5'侧切割内切酶切割（d）扩增的cDNA; （f）用（d）或“嵌套”引物的引物扩增（e）的未裂解的cDNA; 和（g）检测（f）的扩增cDNA。 此外，本发明涉及分别由HPV引起的早期检测HPV相关癌和极度发育不良的方法的使用。