公开(公告)号：WO2007099934A1

公开(公告)日：2007-09-07

申请号：PCT/JP2007/053593

申请日：2007-02-27

Applicant: 独立行政法人科学技術振興機構 ,  甲斐荘 正恒 ,  寺内 勉

Inventor： 甲斐荘 正恒 ,  寺内 勉

IPC: C07C229/24 ,  C07B59/00 ,  C07C229/26 ,  C07C231/02 ,  C07C279/14 ,  C07C323/58 ,  C07D207/16 ,  C07D209/20 ,  C07D233/64 ,  C07K1/13 ,  C12P21/02 ,  G01R33/465

CPC classification number: C07K1/13 ,  C07B59/00 ,  C07B59/001 ,  C07B2200/05 ,  C07C229/08 ,  C07C229/22 ,  C07C229/24 ,  C07C229/26 ,  C07C237/06 ,  C07C279/14 ,  C07C323/58 ,  C07D207/16 ,  C07D209/20 ,  C07D233/64 ,  G01N24/08 ,  G01N24/087 ,  G01R33/465

Abstract: 　高分子量タンパク質、特に60kDaを超える高分子量タンパク質の構造解析を可能にする安定同位体標識脂肪族アミノ酸の組み合わせを提供する。これは、アルギニン（Arg）、グルタミン（Gln）、グルタミン酸（Glu）、リジン（Lys）、メチオニン（Met）、プロリン（Pro）が、次の標識パターンを満たすことを特徴とする安定同位体標識アミノ酸の組み合わせである。 （b）一ヶ所以上のメチレン基のメチレン水素のうちの一つが重水素化され、一ヶ所以上のメチレン基の２つのメチレン水素の両方が重水素化されている、 （d）メチル基が存在する場合には、該メチル基の一つの水素を残して他は重水素化されているか、又は該メチル基が完全に重水素化されている。

Abstract translation: 用稳定同位素标记的脂肪族氨基酸的组合，用于实现高分子量蛋白质构象的分析，特别是高达超过60kDa的分子量。 提供用稳定同位素标记的氨基酸的组合，其特征在于精氨酸（Arg），谷氨酰胺（Gln），谷氨酸（Glu），赖氨酸（Lys），甲硫氨酸（Met）和脯氨酸（Pro）满足以下标记模式 ：（b）一个或多个位置的亚甲基亚甲基氢之一被氘化，一个或多个位置的亚甲基的两个亚甲基氢二者都被氘化; 和（d）当甲基存在时，甲基的一个氢保持完整，另一个氢被氘化，或者甲基完全氘化。

公开(公告)号：WO2005042469A1

公开(公告)日：2005-05-12

申请号：PCT/JP2004/016215

申请日：2004-11-01

Applicant: 独立行政法人科学技術振興機構 ,  甲斐荘 正恒 ,  寺内 勉

Inventor： 甲斐荘 正恒 ,  寺内 勉

IPC: C07C229/36

CPC classification number: C07C47/575 ,  C07B2200/05 ,  C07C47/54 ,  C07C229/08 ,  C07C229/36 ,  C07D209/20 ,  C07D233/64 ,  C07K1/00 ,  C12P21/02 ,  G01N24/08 ,  G01R33/465

Abstract: 　アミノ酸残基に結合するフェニル基の炭素原子が 13 Ｃであり、該フェニル基を構成する残り５つの炭素原子のうち２～４個の炭素原子が 12 Ｃであり、これに重水素が結合し、残りの炭素原子が 13 Ｃであって、これに水素原子が結合している安定同位体標識フェニルアラニンや、アミノ酸残基に結合するフェニル基の炭素原子が 13 Ｃであり、該フェニル基のヒドロキシル基（ＯＨ基）に結合する炭素原子が 12 Ｃ又は 13 Ｃであり、該フェニル基を構成する残り４つの炭素原子のうち２～４個の炭素原子が 12 Ｃであり、これに重水素が結合し、残りの炭素原子が 13 Ｃであって、これに水素原子が結合している安定同位体標識チロシンなどを提供する。これにより、従来の均一標識アミノ酸残基がNMR解析を困難にする最も大きな理由であった芳香環NMRシグナルの複雑さを取り除き、その感度を著しく向上させることができる安定同位体標識芳香族アミノ酸を提供できる。

Abstract translation: 用稳定同位素标记的苯丙氨酸，其中与苯基中的氨基酸残基相连的碳原子为13 C，构成所述苯基的残留的5个碳原子的2至4个碳原子为12个C原子， 氘原子键合到其上，另外残留的碳原子是氢原子键合的13 C原子; 用稳定同位素标记的酪氨酸，其中与苯基中的氨基酸残基键合的碳原子是13，与苯基中的羟基（OH基团）键合的碳原子是12 或13 C，构成所述苯基的残留的四个碳原子的2至4个碳原子是氘原子键合的12个C原子，并且其余残基碳原子是13个C原子，其中 氢原子键合; 或类似物。 用稳定同位素标记的上述氨基酸允许解决芳环NMR信号的复杂性，这是在常规使用均匀标记的氨基酸残基的情况下NMR分析困难的最大原因，因此可以显着地 提高分析的敏感性。

公开(公告)号：WO2003053910A1

公开(公告)日：2003-07-03

申请号：PCT/JP2002/013303

申请日：2002-12-19

Applicant: 科学技術振興事業団 ,  甲斐荘 正恒 ,  寺内 勉

Inventor： 甲斐荘 正恒 ,  寺内 勉

IPC: C07C229/08

CPC classification number: C07B59/001 ,  C07B2200/05 ,  C07C51/09 ,  C07C229/08 ,  C07C229/22 ,  C07C229/24 ,  C07C229/26 ,  C07C229/36 ,  C07C323/58 ,  C07K1/13 ,  G01N24/08 ,  C07C57/15

Abstract: It is intended to provide a stable isotope-labeled amino acid which is at least one of amino acids constituting protein, characterized by having at least one of the following labeling patterns: (a) in one or more methylene groups, methylene hydrogen atoms other than at least one have been deuterated; (b) in prochiral gem-methyl groups, hydrogen atoms in one of the methyl groups have been completely deuterated; (c) in prochiral gem-methyl groups, hydrogen atoms in the methyl groups have been partially deuterated; and (d) hydrogen atoms in a methyl group other than one have been deuterated while hydrogen atoms in an aromatic ring have been partially deuterated. Using this stable isotope-labeled amino acid, deuterium substitution of a protein can be achieved without worsening the NMR sensitivity of the residual hydrogen nucleus. Thus, an NMR spectrum of a high-molecular weight protein exceeding the upper limit applicable in the prior art can be quickly and surely analyzed and the stereostructure can be highly precisely determined at the same time.

Abstract translation: 旨在提供稳定的同位素标记的氨基酸，其是构成蛋白质的氨基酸中的至少一种，其特征在于具有以下标记模式中的至少一种：（a）在一个或多个亚甲基中，除了 至少有一个被氘化; （b）在前手偕甲基中，一个甲基中的氢原子已经完全氘化; （c）在前手gem甲基中，甲基中的氢原子已部分氘化; 和（d）除了一个以外的甲基中的氢原子已被氘化，而芳环中的氢原子已经部分氘化。 使用这种稳定的同位素标记的氨基酸，可以实现蛋白质的氘取代而不会使残余氢核的NMR敏感性恶化。 因此，可以快速，可靠地分析超过现有技术中可应用的上限的高分子量蛋白质的NMR光谱，并且可以同时高精度地确定立体结构。