Abstract:
Die Erfindung betrifft ein Polypeptid, das aus Pflanzen der Familie Brassicaceae isoliert werden kann und das zumindest die Aktivität einer Hydroxynitril-Lyase (HNL) aufweist. Die erfindungsgemäße Hydroxynitril-Lyase ist die erste HNL aus der Familie der Brassicaceen. Die Pflanze (Arabidopsis), aus der dieses Enzym bzw. dessen Gen isoliert wird, ist zudem als nicht cyanogen beschrieben. Alle bislang beschriebenen HNL-enthaltenden Pflanzen sind cyanogene Pflanzen, so dass bislang angenommen wurde, dass nur cyanogene Pflanzen Hydroxynitril-Lyasen enthalten. Überraschend stellte sich heraus, dass ein erfindungsgemäßes Polypeptid (AtHNL) (R)-selektiv ist. Aus der Aminosäuresequenz ergibt sich ein theoretisches Molekulargewicht von 29,2 kDa für die Untereinheit der AtHNL. Die berechnete molekulare Masse des Proteins von ca. 30 kDa kann durch SDS-Gelelektrophorese bestätigt werden.
Abstract:
Die Erfindung betrifft das Gebiet der Genexpression und die Herstellung von Proteinen unter Verwendung von transformierten Wirtszellen und rekombinanten DNA-Vektoren. Die Erfindung beschreibt ein Verfahren zur Expression von Zielproteinen, dadurch gekennzeichnet, dass Faltungshelferproteine, welche auch als Chaperone bezeichnet werden, coexprimiert werden. Die coexprimierten Chaperone werden dabei aus einer Liste von einzelnen Faltungshelferproteinen ausgewählt und eine Vielzahl von Kombinationen aus zwei, drei oder mehreren Proteinen gebildet (Chaperon-Toolbox), die eine Expression gruppierter Chaperone-Gene mit heterologen Genen für Zielproteine ermöglicht. Darüber hinaus betrifft die Erfindung die Verwendung von Plasmiden, die Polynucleotide, die für Faltungshelferproteine (Chaperone) codieren, umfassen, wobei das Plasmid zur Expression der Faltungshelferproteine (Chaperone) befähigt ist; und sie betrifft ein Verfahren, die Faltungshelferproteine-codierenden Polynucleotide auszuwählen und zwei, drei oder mehrere davon randomisiert zu kombinieren.
Abstract:
Die Sekretion eines Proteins aus einer Wirtszelle soll verbessert werden, um die Produktausbeute an Protein in einer Fermentation zu steigern. Dies gelingt durch einen Expressionsvektor umfassend a) eine Promotorsequenz und b) eine Nukleinsäuresequenz, die für ein Protein codiert, wobei das Protein ein Signalpeptid und eine weitere Aminosäuresequenz umfasst und das Signalpeptid eine Aminosäuresequenz umfasst, die zu der in SEQ ID NO. 2 angegebenen Aminosäuresequenz zu mindestens 80% identisch ist oder zu der in SEQ ID NO. 4 angegebenen Aminosäuresequenz zu mindestens 80% identisch ist oder zu der in SEQ ID NO. 6 angegebenen Aminosäuresequenz zu mindestens 80% identisch ist, oder das Signalpeptid eine Aminosäuresequenz umfasst, die zu mindestens einer dieser Sequenzen strukturhomolog ist.
Abstract translation:从宿主细胞的蛋白质的分泌,以增加该蛋白质的产率在发酵得到改善。 这是通过包括:a)一个启动子序列的表达载体来实现,和b)编码蛋白质的核酸序列,其中所述蛋白包含信号肽和一个额外的氨基酸序列,并且所述信号肽包含的氨基酸序列与SEQ ID NO的。 2个氨基酸序列阐述至少80%相同,或在SEQ ID NO。 4氨基酸序列指定的至少80%的同一性,或与SEQ ID NO。 6氨基酸序列指定的至少80%相同,或所述信号肽包含氨基酸序列,其是至少一种结构同源性的序列。
Abstract:
Die vorliegende Erfindung betrifft Mittel enthaltend Esterasen, sowie deren Verwendung zur Ausrüstung von Fasern, insbesondere Kunstfasern, Wasch- und Reinigungsmittel mit Esterasen und entsprechende Wasch- und Reinigungsverfahren sowie weitere technische Einsatzmöglichkeiten. Insbesondere betrifft sie die Verwendung von Esterasen zum Schutz vor oder zur Verminderung bzw. Verhinderung des Pillings, bevorzugt bei Textilien, insbesondere Kunstfasern, besonders bevorzugt Fasern aus Polyester, sowie die Verwendung von Esterasen zur Spaltung von Kunststoffen, insbesondere von Polyesterverbindungen. Sie betrifft außerdem neue Esterasen sowie hinreichend verwandte Proteine und deren Derivate, Mittel, enthaltend diese, und deren Verwendung.
Abstract:
The present invention provides libraries of polypeptides, polynucleotides, or host cells, wherein said library includes at least one polypeptide variant of the Parvibaculum lavamentivorans short-chain alcohol dehydrogenase, or a polynucleotide comprising a nucleotide sequence encoding said variant, and/or a host cell including said polypeptide variant or the polynucleotide comprising the nucleotide sequence encoding said variant. Also disclosed are variants of the Parvibaculum lavamentivorans short- chain alcohol dehydrogenase, polynucleotides comprising a nucleotide sequence encoding said variants, and host cells including said variant or said polynucleotide. Also provided is a method for stereoselective reduction ketones.