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    VERFAHREN ZUR HERSTELLUNG VON ENDSTÄNDIGEN AMINOCARBONSÄUREN UND AMINOALDEHYDEN MITTELS EINES REKOMBINATEN MIKROORGANISMUS
    1.
    发明申请
    VERFAHREN ZUR HERSTELLUNG VON ENDSTÄNDIGEN AMINOCARBONSÄUREN UND AMINOALDEHYDEN MITTELS EINES REKOMBINATEN MIKROORGANISMUS 审中-公开
    用于生产终端氨基羧酸和氨基醛的重组微生物

    公开(公告)号：WO2015132213A1

    公开(公告)日：2015-09-11

    申请号：PCT/EP2015/054330

    申请日：2015-03-02

    Applicant: EVOCATAL GMBH

    Inventor： KIND, Stefanie ,  JORGE, Joao

    IPC: C12N9/06 ,  C12N9/10 ,  C12N9/00 ,  C12P13/00 ,  C12P13/02 ,  C12N1/21

    CPC classification number: C12P13/005 ,  C12N9/0008 ,  C12N9/0022 ,  C12N9/1096 ,  C12N9/80 ,  C12N9/93 ,  C12P13/001 ,  C12Y104/0301 ,  C12Y206/01029 ,  C12Y603/01011

    Abstract: Zusammenfassung Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von endständigen Aminocarbonsäuren und Aminoaldehyden aus Diaminen unter Verwendung eines rekombinanten Mikroorganismus. Insbesondere betrifft die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von Gamma-Aminobuttersäure (GABA) oder Gamma-Aminobutyraldehyd (ABAL) unter Verwendung eines rekombinanten Mikroorganismus. Die vorliegende Erfindung betrifft auch die Verwendung von rekombinanten Mikroorganismen, die DNA-Moleküle in einer deregulierten Form umfassen, welche die Herstellung von endständigen Aminocarbonsäuren und/oder Aminoaldehyden, wie z.B. Gamma-Aminobuttersäure oder Gamma-Aminobutyraldehyd verbessern, sowie rekombinante DNA-Moleküle und Polypeptide, die verwendet werden um den Mikroorganismus herzustellen.

    Abstract translation: 发明内容本发明涉及使用重组微生物由二胺制备末端氨基醛和氨基羧酸的方法。 特别地，本发明涉及使用重组微生物生产γ-氨基丁酸的（GABA）和γ-氨基丁（ABAL）的方法。 本发明还涉及使用重组微生物的包含在去调节形式的DNA分子，其中终端氨基羧酸和/或氨基醛，例如在制备 提高γ-氨基丁酸或γ-氨基丁并产生由该微生物使用的重组DNA分子和多肽。

    (R)-HYDROXYNITRIL-LYASE AUS BRASSICACEEN
    2.
    发明申请
    (R)-HYDROXYNITRIL-LYASE AUS BRASSICACEEN 审中-公开
    （R）从十字花科羟基腈裂合酶

    公开(公告)号：WO2008067807A2

    公开(公告)日：2008-06-12

    申请号：PCT/DE2007/002216

    申请日：2007-12-10

    Applicant: EVOCATAL GMBH ,  EGGERT, Thorsten ,  ANDEXER, Jennifer

    Inventor： EGGERT, Thorsten ,  ANDEXER, Jennifer

    IPC: C12N9/88 ,  C12N5/10 ,  C12P13/00 ,  C07K14/43

    CPC classification number: C12N9/88 ,  C12P13/004

    Abstract: Die Erfindung betrifft ein Polypeptid, das aus Pflanzen der Familie Brassicaceae isoliert werden kann und das zumindest die Aktivität einer Hydroxynitril-Lyase (HNL) aufweist. Die erfindungsgemäße Hydroxynitril-Lyase ist die erste HNL aus der Familie der Brassicaceen. Die Pflanze (Arabidopsis), aus der dieses Enzym bzw. dessen Gen isoliert wird, ist zudem als nicht cyanogen beschrieben. Alle bislang beschriebenen HNL-enthaltenden Pflanzen sind cyanogene Pflanzen, so dass bislang angenommen wurde, dass nur cyanogene Pflanzen Hydroxynitril-Lyasen enthalten. Überraschend stellte sich heraus, dass ein erfindungsgemäßes Polypeptid (AtHNL) (R)-selektiv ist. Aus der Aminosäuresequenz ergibt sich ein theoretisches Molekulargewicht von 29,2 kDa für die Untereinheit der AtHNL. Die berechnete molekulare Masse des Proteins von ca. 30 kDa kann durch SDS-Gelelektrophorese bestätigt werden.

    Abstract translation: 本发明涉及一种可从十字花科植物中分离，并具有至少一个羟基腈裂合酶（HNL）的活性的多肽。 的羟基腈裂合酶发明是十字花科的第一HNL。 植物（拟南芥）中，从其中这种酶或其基因是分离的，也被描述为一个非氰。 到目前为止描述的所有含HNL植物是植物氰，所以迄今假设只有氰植物含有醇腈裂解酶。 令人惊讶地发现，本发明（AtHNL）（R） - 选择性的多肽。 从氨基酸序列，29.2 kDa的用于AtHNL结果的亚基的理论分子量。 大约30 kDa的蛋白质的计算分子量可以通过SDS凝胶电泳来确认。

    "> CHAPERON-
    5.
    发明申请
    CHAPERON-"TOOLBOX" 审中-公开
    陪护的“工具箱”

    公开(公告)号：WO2010012424A1

    公开(公告)日：2010-02-04

    申请号：PCT/EP2009/005398

    申请日：2009-07-25

    Applicant: EVOCATAL GMBH ,  JÄGER, Karl-Erich ,  EGGERT, Thorsten ,  HUMMEL, Werner ,  SEIDEL, Andrea ,  ROSENAU, Frank

    Inventor： JÄGER, Karl-Erich ,  EGGERT, Thorsten ,  HUMMEL, Werner ,  SEIDEL, Andrea ,  ROSENAU, Frank

    IPC: C12P21/02 ,  C12N15/70

    CPC classification number: C12P21/02 ,  C12N15/67

    Abstract: Die Erfindung betrifft das Gebiet der Genexpression und die Herstellung von Proteinen unter Verwendung von transformierten Wirtszellen und rekombinanten DNA-Vektoren. Die Erfindung beschreibt ein Verfahren zur Expression von Zielproteinen, dadurch gekennzeichnet, dass Faltungshelferproteine, welche auch als Chaperone bezeichnet werden, coexprimiert werden. Die coexprimierten Chaperone werden dabei aus einer Liste von einzelnen Faltungshelferproteinen ausgewählt und eine Vielzahl von Kombinationen aus zwei, drei oder mehreren Proteinen gebildet (Chaperon-Toolbox), die eine Expression gruppierter Chaperone-Gene mit heterologen Genen für Zielproteine ermöglicht. Darüber hinaus betrifft die Erfindung die Verwendung von Plasmiden, die Polynucleotide, die für Faltungshelferproteine (Chaperone) codieren, umfassen, wobei das Plasmid zur Expression der Faltungshelferproteine (Chaperone) befähigt ist; und sie betrifft ein Verfahren, die Faltungshelferproteine-codierenden Polynucleotide auszuwählen und zwei, drei oder mehrere davon randomisiert zu kombinieren.

    Abstract translation: 本发明涉及基因表达的字段和生产中使用转化的宿主细胞和重组DNA载体蛋白。 本发明描述了一种用于靶蛋白，其特征在于，折叠辅助蛋白，其也被称为的表达的方法是分子伴侣共表达。 共表达的分子伴侣由此从各个折叠辅助蛋白的列表和各种形成（伴侣工具箱）两种，三种或更多种蛋白质的组合，其允许分组伴侣基因与靶蛋白的异源基因的表达来选择。 此外，本发明涉及使用包含多核苷酸的质粒编码用于折叠辅助蛋白（侣伴蛋白），以获得质粒为折叠辅助蛋白（侣伴蛋白）的表达能够; 并且，本发明涉及选择的折叠辅助蛋白和多核苷酸随机化了编码结合两个，三个或更多的人的方法。

    VARIANTS OF THE PARVIBACULUM LAVAMENTIVORANS SHORT-CHAIN ALCOHOL DEHYDROGENASE
    6.
    发明申请
    VARIANTS OF THE PARVIBACULUM LAVAMENTIVORANS SHORT-CHAIN ALCOHOL DEHYDROGENASE 审中-公开
    野生动植物病毒链短链醇脱氢酶的变体

    公开(公告)号：WO2014053558A1

    公开(公告)日：2014-04-10

    申请号：PCT/EP2013/070567

    申请日：2013-10-02

    Applicant: EVOCATAL GMBH

    Inventor： SPICKERMANN, Dominik ,  HAUSMANN, Sascha ,  EßER, Simon ,  WECKBECKER, Andrea ,  LEGGEWIE, Christian ,  EGGERT, Thorsten ,  CHRISTENSEN, Daniela

    IPC: C12N9/04 ,  C12N15/52

    CPC classification number: C12N9/0006

    Abstract: The present invention provides libraries of polypeptides, polynucleotides, or host cells, wherein said library includes at least one polypeptide variant of the Parvibaculum lavamentivorans short-chain alcohol dehydrogenase, or a polynucleotide comprising a nucleotide sequence encoding said variant, and/or a host cell including said polypeptide variant or the polynucleotide comprising the nucleotide sequence encoding said variant. Also disclosed are variants of the Parvibaculum lavamentivorans short- chain alcohol dehydrogenase, polynucleotides comprising a nucleotide sequence encoding said variants, and host cells including said variant or said polynucleotide. Also provided is a method for stereoselective reduction ketones.

    Abstract translation: 本发明提供了多肽，多核苷酸或宿主细胞的文库，其中所述文库包括至少一种多巴胺半乳糖短杆菌脱氢酶的多肽变体，或包含编码所述变体的核苷酸序列和/或宿主细胞的多核苷酸 包括所述多肽变体或包含编码所述变体的核苷酸序列的多核苷酸。 还公开了小檗碱短链醇脱氢酶的变体，包含编码所述变体的核苷酸序列的多核苷酸，以及包含所述变体或所述多核苷酸的宿主细胞。 还提供了立体选择性还原酮的方法。

    VERWENDUNG VON FMN-BINDENDEN FLUORESZENZPROTEINEN (FBFP) ALS NEUARTIGE SEKRETIONSMARKER
    7.
    发明申请
    VERWENDUNG VON FMN-BINDENDEN FLUORESZENZPROTEINEN (FBFP) ALS NEUARTIGE SEKRETIONSMARKER 审中-公开
    FMN结合蛋白荧光作为新颖分泌标记USE（FBFP）

    公开(公告)号：WO2013020831A1

    公开(公告)日：2013-02-14

    申请号：PCT/EP2012/064776

    申请日：2012-07-27

    Applicant: EVOCATAL GMBH ,  DREPPER, Thomas ,  JAEGER, Karl-Erich ,  POTZKEI, Janko

    Inventor： DREPPER, Thomas ,  JAEGER, Karl-Erich ,  POTZKEI, Janko

    IPC: C07K14/195

    CPC classification number: G01N33/52 ,  C07K14/195 ,  C07K14/245 ,  C12Q1/68

    Abstract: Zur Untersuchung von Protein-Protein Interaktionen, Proteinfaltungen und Proteinlokalisation sowie bei der Sekretion von Proteinen werden in der Biotechnologie und in der Grundlagenforschung in vivo Reporterproteine eingesetzt. Um Fluoreszenzreporter als Marker für Sekretionsprozesse nutzen zu können, wurden von uns erstmals FMN-bindende Fluoreszenproteine (FbFP) entwickelt. Die neuen Fluoreszenzmarker lassen sich wie GFP in verschiedenen Bakterien exprimieren. Durch die Bindung des Chromophors FMN entsteht so ein cyan-grün fluoreszierendes Protein, das sich in vivo mit allen gängigen spektroskopischen und mikroskopischen Verfahren nachweisen lässt. Im Gegensatz zu GFP kann dieses Protein überraschender Weise auch über den Sec-Weg sekretiert und im Periplasma in den fluoreszenzaktiven Zustand überführt werden.

    Abstract translation: 对于蛋白质 - 蛋白质相互作用，蛋白质折叠和蛋白定位的调查以及蛋白质的分泌体内报道蛋白的生物技术和基础研究使用。 使用荧光报告作为分泌过程的标志，我们首次FMN结合Fluoreszenproteine（FbFP）开发。 新的荧光标记物可以在不同的细菌，如GFP表达。 由发色团FMN结果的结合是青色的绿色荧光蛋白可在体内与所有标准光谱和显微技术来检测。 相反GFP这种蛋白质，出人意料的是，也可以通过Sec途径分泌，并在周质中被转化成荧光激活状态。

    (R)-HYDROXYNITRILE LYASE FROM BRASSICACEAE
    9.
    发明申请
    (R)-HYDROXYNITRILE LYASE FROM BRASSICACEAE 审中-公开
    （R）-HYDROXYNITRILE LYASE从BRASSICACEEN

    公开(公告)号：WO2008067807A3

    公开(公告)日：2008-09-12

    申请号：PCT/DE2007002216

    申请日：2007-12-10

    Applicant: EVOCATAL GMBH ,  EGGERT THORSTEN ,  ANDEXER JENNIFER

    Inventor： EGGERT THORSTEN ,  ANDEXER JENNIFER

    IPC: C12N9/88 ,  C12N5/10 ,  C12P13/00

    CPC classification number: C12N9/88 ,  C12P13/004

    Abstract: The invention relates to a polypeptide which can be isolated from plants of the Brassicaceae family and which has at least the activity of a hydroxynitrile lyase (HNL). Said hydroxynitrile lyase is the first HNL from the Brassicaceae family. Furthermore, the plants (Arabidopsis) from which said enzyme or the gene therefor are isolated are not described as cyanogens. All HNL containing plants described up to now are cyanogenic plants, so it has been assumed up to now that only cyanogenic plants contain hydroxynitrile lyases. Surprisingly it has been found that such a polypeptide (AtHNL) is (R) selective. From the amino acid sequence a theoretical molecular weight of 29,2 kDa is found for the AtHNL sub-unit. The calculated molecular mass of a protein of ca. 30 kDa can be confirmed using SDS gel electrophoresis.

    Abstract translation: 本发明涉及可以从十字花科植物中分离并且至少具有羟基腈裂解酶（HNL）活性的多肽。 根据本发明的羟腈裂解酶是来自十字花科的第一种HNL。 该酶或其基因被分离的植物（拟南芥）也被描述为非氰。 迄今为止描述的所有含有HNL的植物都是含氰的植物，因此之前假定只有含氰的植物含有羟基腈裂解酶。 令人惊讶的是，已经发现根据本发明的多肽（AtHNL）（R）是选择性的。 从氨基酸序列得到AtHNL亚基的理论分子量为29.2kDa。 约30kDa蛋白质的计算分子量可以通过SDS凝胶电泳确认。

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