公开(公告)号：WO2013030329A1

公开(公告)日：2013-03-07

申请号：PCT/EP2012/066949

申请日：2012-08-31

Applicant: VTU HOLDING GMBH ,  WEIS, Roland ,  PURKARTHOFER, Thomas

Inventor： WEIS, Roland ,  PURKARTHOFER, Thomas

IPC: C12N1/19 ,  C12N9/04 ,  C12N9/90 ,  C12N9/00 ,  C12N15/81 ,  C12P21/02 ,  C07K14/55 ,  C07K14/765 ,  C07K14/79

CPC classification number: C12P21/00 ,  C07K14/55 ,  C07K14/765 ,  C07K14/79 ,  C12N9/0006 ,  C12N9/90 ,  C12N15/815 ,  C12P21/02 ,  C12Y101/03013 ,  C12Y503/04001

Abstract: The present invention relates to a genetically modified yeast cell comprising: - at least one recombinant promoter operably linked to at least one gene encoding a polypeptide or protein supporting the biosynthesis of polypeptides or proteins within said cell, said at least one gene being located at the native genomic locus of the genetically unmodified wild-type yeast cell, wherein the naturally occurring promoter of the at least one gene encoding the biosynthesis supporting polypeptide or protein is inactivated by at least one mutation within said naturally occurring promoter and, - a secretion cassette comprising a recombinant nucleic acid molecule encoding a protein or polypeptide of interest and a method for producing a recombinant protein or polypeptide of interest using such a cell.

Abstract translation: 本发明涉及遗传修饰的酵母细胞，其包含： - 至少一个重组启动子，其与编码支持所述细胞内的多肽或蛋白质的生物合成的多肽或蛋白质的至少一个基因可操作地连接，所述至少一个基因位于 遗传上未修饰的野生型酵母细胞的天然基因组座位，其中编码所述生物合成支持多肽或蛋白质的所述至少一个基因的天然存在的启动子通过所述天然存在的启动子内的至少一个突变而失活，和 - 分泌盒包含 编码感兴趣的蛋白质或多肽的重组核酸分子和使用这种细胞产生感兴趣的重组蛋白质或多肽的方法。

公开(公告)号：WO2004083424A1

公开(公告)日：2004-09-30

申请号：PCT/EP2004/001778

申请日：2004-02-24

Applicant: DSM FINE CHEMICALS AUSTRIA NFG GMBH & CO KG ,  SKRANC, Wolfgang ,  GLIEDER, Anton ,  GRUBER, Karl ,  WEIS, Roland ,  LUITEN, Ruud

Inventor： SKRANC, Wolfgang ,  GLIEDER, Anton ,  GRUBER, Karl ,  WEIS, Roland ,  LUITEN, Ruud

IPC: C12N9/88

CPC classification number: C12P13/004 ,  C12N9/88

Abstract: R-Hydroxynitrillyasen aus der Familie Rosaceae mit einer verbesserten Substratak zeptanz und erhöhter Stabilität, bei weichen im aktiven Zentrum der R Hydroxynitrillyasen entweder a) ein Alaninrest durch Glycin, Valin, Leucin, Isoleucin oder Phenylalanin oder b) ein Phenylalaninrest durch Alanin, Glycin Valin, Leucin oder Isoleucin oder c) ein Leucinrest durch Alanin, Glycin, Valin, Isoleucin oder Phenylalanin oder d) ein Isoleucinrest durch Alanin, Glycin, Valin, Leucin oder Phenylalanin substituiert ist und deren Verwendung zur Herstellung von enantiomerenreinen R- oder S-Cyanhydrinen.

Abstract translation: 从蔷薇科孟清湘具有改进Substratak和增加的稳定性R-羟基腈裂合酶在软在R羟基腈的活性位点或者a）丙氨酸甘氨酸，缬氨酸，亮氨酸，异亮氨酸或苯丙氨酸，或者b）一个苯丙氨酸残基被丙氨酸，甘氨酸，缬氨酸， 亮氨酸或异亮氨酸，或c）被丙氨酸，甘氨酸，缬氨酸，异亮氨酸或苯丙氨酸，或d-亮氨酸残基）由一个异亮氨酸残基丙氨酸，甘氨酸，缬氨酸，亮氨酸或苯丙氨酸，以及它们用于对映体纯R-或S-氰醇的制备中使用取代。

公开(公告)号：WO2006076965A1

公开(公告)日：2006-07-27

申请号：PCT/EP2005/014080

申请日：2005-12-28

Applicant: DSM FINE CHEMICALS AUSTRIA NFG GMBH & CO KG ,  SKRANC, Wolfgang ,  GLIEDER, Anton ,  GRUBER, Karl ,  WEIS, Roland ,  MAURER, Oliver ,  GAISBERGER, Richard

Inventor： SKRANC, Wolfgang ,  GLIEDER, Anton ,  GRUBER, Karl ,  WEIS, Roland ,  MAURER, Oliver ,  GAISBERGER, Richard

IPC: C12N15/52 ,  C12N9/88 ,  C07K14/415 ,  C12P13/00

CPC classification number: C12P13/004 ,  C12N9/88

Abstract: R-hydroxynitrile lyases having an improved substrate acceptance, increased activity and increased selectivity, in which there is replacement in the amino acid sequence of R-hydroxynitrile lyases from the Rosaceae family either a) of the amino acid residue which corresponds to position 360 of the mature PaHNL5 protein by another apolar amino acid or a neutral amino acid and/or b) of the amino acid residue which corresponds to position 225 of the mature PaHNL5 protein by another polar amino acid, it also being possible where appropriate for 1 to 20 further residues in the active center or in the hydrophobic channel leading to the active center to be replaced.

Abstract translation: 具有改善的底物接受性，增加的活性和增加的选择性的R-羟基腈裂解酶，其中在来自蔷薇科家族的R-羟基腈裂解酶的氨基酸序列中置换a）的氨基酸残基，其对应于 通过另一个非极性氨基酸或中性氨基酸的成熟PaHNL5蛋白和/或b）与另一种极性氨基酸对应的成熟PaHNL5蛋白的位置225的氨基酸残基，在适当的情况下还可以进一步进行1至20次 活性中心或疏水通道中的残留物，导致活性中心被更换。