一种高效生产琥珀酸的重组大肠杆菌及其构建方法

    公开(公告)号:WO2022088263A1

    公开(公告)日:2022-05-05

    申请号:PCT/CN2020/128254

    申请日:2020-11-12

    申请人: 江南大学

    摘要: 公开了一种高效生产琥珀酸的重组大肠杆菌及其构建方法,敲除E.coli 产琥珀酸菌株FMME-N-5的副产物编码基因得到菌株E.coli FMME-N-5(ΔfocA-pflB-ΔldhA-Δpta-ackA);将质粒pTrcHisA-pck-ptxD导入该菌株中过表达产琥珀酸放线杆菌磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶pck和施式芽孢杆菌亚磷酸酯脱氢酶ptxD,筛选获得高效生产琥珀酸的工程菌E.coli FMME-N-5(ΔfocA-pflB-ΔldhA-Δpta-ackA)-pck-ptxD;该工程菌株在7.5L发酵罐上采用两阶段发酵策略,发酵96h,琥珀酸产量达到了137g/L,琥珀酸得率达到1g/g葡萄糖、生产强度为1.43g/L/h,副产物乳酸、甲酸不积累,乙酸1-2g/L。

    메탄올을 소비하는 ASPERGILLUS 균주를 이용한 유기산 생산 공정

    公开(公告)号:WO2021132860A1

    公开(公告)日:2021-07-01

    申请号:PCT/KR2020/014290

    申请日:2020-10-20

    发明人: 최신식 이지은

    IPC分类号: C12N1/14 C12P7/40 C12P7/46

    摘要: 본 발명은 메탄올을 유기산화 하는 미생물 생산배지와 배양공정에 관한 것으로서, 상기 유기산화 되는 유기산은 옥살산(oxalic acid)이고, 상기 미생물 생산배지는 전체 배지 1L에 대하여 메탄올 1 내지 5%, 자일로스 1 내지 5% 및 염화칼슘 0.01 내지 0.05%를 포함하고, 상기 미생물 생산배지는 인산이수소칼륨(KH2PO4), 황산암모늄((NH4)2SO4), 황산마그네슘(MgSO4), 황산철(FeSO4), 황산망간(MnSO4), 황산아연(ZnSO4) 또는 붕산(H3BO3)을 더 포함한다. 본 발명에 따르면, 아스퍼질러스(Aspergillus. sp)속 미생물을 이용한 유기산 생산 공정을 제공함으로써, 메탄과 같은 C1가스의 리파이너리 결과로 얻은 메탄올을 이용하여 고부가가치의옥살산과 같은 유기산을 대량으로 생산할 수 있는 효과가 있다.

    무항생제 플라스미드 유지 시스템에서 플라스미드 카피 수의 정량적 조절 방법

    公开(公告)号:WO2018186704A1

    公开(公告)日:2018-10-11

    申请号:PCT/KR2018/004038

    申请日:2018-04-05

    摘要: 본 발명은 합성 5' UTR(untranslated region), 프로모터 및 조절 유전자를 포함하는 유전자 발현 카세트, 복제원점 및 상기 유전자 발현 카세트를 포함하는 재조합 벡터, 상기 재조합 벡터가 도입된 분리 불안(segregational instability)이 개선된 재조합 미생물, 상기 재조합 벡터를 도입하여 분리 불안이 개선된 재조합 미생물의 제조 방법 및 재조합 미생물 내 플라스미드 카피 수의 정량 조절 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 세포에 필수적인 번역 개시 인자를 코딩하는 유전자인 infA 및 단백질 신장 인자(EF-P)를 코딩하는 efp 를 미생물의 염색체에서 제거시키고 상기 조절 유전자를 포함하는 유전자 발현 카세트를 Escherichia coli 를 숙주로 하여 도입하면, 세포 간 고유변이 없이 무항생제 배지에서 플라스미드를 안정적으로 유지할 수 있다. 또한, 상기 재조합 미생물에서 infA 및 efp 발현량을 프로모터를 통하여 정밀하게 조절할 경우, PCN 역시 높은 효율로 정량적으로 제어할 수 있어, 재조합 단백질을 생산하고자 하는 다양한 산업에서 광범위하게 적용할 수 있다.

    変異糸状菌、及びそれを用いたC4ジカルボン酸の製造方法
    8.
    发明申请
    変異糸状菌、及びそれを用いたC4ジカルボン酸の製造方法 审中-公开
    突变丝状真菌以及使用其制备C4二羧酸的方法

    公开(公告)号:WO2018051837A1

    公开(公告)日:2018-03-22

    申请号:PCT/JP2017/031857

    申请日:2017-09-05

    摘要: C4ジカルボン酸生産能の向上した変異糸状菌、及び該変異糸状菌を用いたC4ジカルボン酸の製造方法の提供。以下:配列番号2で示されるアミノ酸配列からなるポリペプチド;配列番号2で示されるアミノ酸配列と少なくとも90%の同一性を有するアミノ酸配列からなり、かつリンゴ酸酵素活性を有するポリペプチド;ならびに、配列番号2で示されるアミノ酸配列に対して1個又は複数個のアミノ酸が欠失、置換、付加、又は挿入されたアミノ酸配列からなり、かつリンゴ酸酵素活性を有するポリペプチド、からなる群より選択される少なくとも1種のポリペプチドの発現が強化された、変異糸状菌。

    摘要翻译: 具有提高的C4二羧酸生产能力的突变丝状真菌以及使用该突变丝状真菌生产C4二羧酸的方法。 由SEQ ID NO:2所示氨基酸序列组成的多肽;由与SEQ ID NO:2所示氨基酸序列具有至少90%同一性并具有苹果酸酶活性的氨基酸序列组成的多肽; 由编号2所示的氨基酸序列缺失,取代,添加或插入一个或多个氨基酸并具有苹果酸酶活性的氨基酸序列组成的多肽 具有增强的至少一种多肽表达的突变丝状真菌。

    GENTECHNISCH VERÄNDERTE HEFE ZUR FERMENTATION VON GLYCEROL
    9.
    发明申请
    GENTECHNISCH VERÄNDERTE HEFE ZUR FERMENTATION VON GLYCEROL 审中-公开
    用于发酵甘油的基因改造酵母

    公开(公告)号:WO2018033176A1

    公开(公告)日:2018-02-22

    申请号:PCT/DE2017/100655

    申请日:2017-08-02

    发明人: NEVOIGT, Elke

    摘要: Die Erfindung betrifft eine gentechnisch veränderte Hefe zur Fermentation von Glycerol. Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist es, die Fähigkeit von Hefe zur Fermentation von Glycerol zu C 4 -Dicarbonsäuren zu verbessern. Gelöst wird die Aufgabe durch eine gentechnisch veränderte Hefezelle der Gattung Saccharomyces , wobei die Hefezelle dahingehend gentechnisch verändert ist, dass i) der Abbau von Glycerol zu Dihydroxyacetonphosphat über den Glycerol-3-Phosphat-Weg blockiert ist, ii) ein heterologes Glycerolaufnahme-Facilitator-Protein exprimiert wird, iii) eine die Oxidation von Glycerol zu Dihydroxyaceton katalysierende heterologe Glyceroldehydrogenase exprimiert oder eine die Oxidation von Glycerol zu Dihydroxyaceton katalysierende native Glyceroldehydrogenase überexprimiert wird, iv) eine heterologe Dihydroxyacetonkinase exprimiert oder eine native Dihydroxyacetonkinase überexprimiert wird, v) ein heterologer C4-Dicarbonsäure-Transporter exprimiert wird, vi) eine heterologe Glyceroldehydratase exprimiert wird, vii) eine heterologe 1,3-PDO-Oxidoreduktase exprimiert wird.

    摘要翻译:

    本发明涉及一种用于甘油发酵的基因版本&AUML修饰的酵母。 本发明的目的是将R&AUML;改善酸;酵母的能力甘油发酵至C <子> 4 - 二&AUML。 凝胶ouml;对象AUML属的遗传版本&修饰酵母细胞获得的酿酒的,其中所述酵母细胞的遗传和效果AUML;被改变,即ⅰ)甘油还原成二羟基丙酮OVER的甘油-3- 磷酸途径被阻断)的表达异源Glycerolaufnahme推动者蛋白II,III)表示的甘油氧化成二羟基丙酮催化异源甘油脱氢酶或甘油的催化天然甘油脱氢酶导航使用氧化成二羟基丙酮是berexprimiert,ⅳ) 是berexprimiert,v)的异源C4-二BEAR;表达异源二羟基丙酮或天然二羟丙酮导航使用酸转运被表达,ⅵ)的异源甘油脱水酶被表达时,ⅶ)表达异源1,3-PDO氧化还原酶<。 / p>