无毒基因
221. 霍乱弧菌01(CVD111)和非01(CVD112和CVD112RM)血清型疫苗菌株, 其制造方法
申请号: CN94194095.0
申请日: 1994-10-07
公开（公告）号: CN1104907C
公开（公告）日: 2003-04-09
发明人: J·B·卡珀; M·M·拉文
01(CVD111)和非01(CVD112和CVD112RM)血清型的无毒力霍乱弧菌菌株，其具有被缺失的霍乱毒素核心的DNA和霍乱毒素基因座的RSI序列，并进一步具有重新被插在染色体中的编码抗汞抗性的DNA，及编码霍乱毒素B亚基的DNA或其足以赋予免疫原性的部分。制造本发明的无毒力霍乱弧菌01和非01菌株的方法，及使用这些菌株的霍乱疫苗。
更多222. 霍乱弧菌01(CVD111)和非01(CVD112和CVD112RM)血清型疫苗菌株，其制造方法
申请号: CN94194095.0
申请日: 1994-10-07
公开（公告）号: CN1142774A
公开（公告）日: 1997-02-12
发明人: J·B·卡珀; M·M·拉文
01(CVD111)和非01(CVD112和CVD112RM)血清型的无毒力霍乱弧菌菌株，其具有被缺失的霍乱毒素核心的DNA和霍乱毒素基因座的RSI序列，并进一步具有重新被插在染色体中的编码抗汞抗性的DNA，及编码霍乱毒素B亚基的DNA或其足以赋予免疫原性的部分。制造本发明的无毒力霍乱弧菌01和非01菌株的方法，及使用这些菌株的霍乱疫苗。
更多223. 抑癌蛋白及其基因和用途
申请号: CN200610019144.7
申请日: 2006-05-26
公开（公告）号: CN100410273C
公开（公告）日: 2008-08-13
发明人: 吴建国; 邬开朗; 朱应; 章晓联; 刘芳; 张建林; 黄静; 思维; 马云峰; 徐伊琳
本发明公开了一种抑癌蛋白及其基因和用途，该蛋白以及基因可有效地抑制肝细胞癌和结肠癌的生长，以及在制备治疗或预防结肠癌药物中的应用。本发明抑瘤效率高，特异性强，对正常细胞无毒性，是极具潜在临床应用价值的生物制剂，为癌症的有效治疗提供了新的药物和方法。
更多224. 抑癌蛋白及其基因和用途
申请号: CN200610019144.7
申请日: 2006-05-26
公开（公告）号: CN1876681A
公开（公告）日: 2006-12-13
发明人: 吴建国; 邬开朗; 朱应; 章晓联; 刘芳; 张建林; 黄静; 思维; 马云峰; 徐伊琳
本发明公开了一种抑癌蛋白及其基因和用途，该蛋白以及基因可有效地抑制肝细胞癌和结肠癌的生长，以及在制备治疗或预防结肠癌药物中的应用。本发明抑瘤效率高，特异性强，对正常细胞无毒性，是极具潜在临床应用价值的生物制剂，为癌症的有效治疗提供了新的药物和方法。
更多225. 一种岩藻糖诱导基因表达的操纵子及其构建方法与应用
申请号: CN202311579074.0
申请日: 2023-11-23
公开（公告）号: CN117587037A
公开（公告）日: 2024-02-23
发明人: 仝艳军; 杨小军
本发明公开了一种岩藻糖诱导基因表达的操纵子及其构建方法与应用，包括转录因子FucR的编码基因fucR，以及，能够与转录因子FucR结合的启动子。本发明岩藻糖诱导基因表达的操纵子，结构简单，能够通过岩藻糖诱导基因的表达。岩藻糖相对于IPTG来说，对细胞无毒性，不易形成包涵体，且能够一定程度上促进细胞生长发育；并且加入岩藻糖诱导在高温下不会产生包涵体，因此，无需对体系进行降温处理，可以在37℃较高温度下诱导蛋白表达。
更多226. 用于检测人类CYP2D6基因多态性的核酸、试剂盒及方法
申请号: CN201611107790.9
申请日: 2016-12-06
公开（公告）号: CN106755360B
公开（公告）日: 2020-04-07
发明人: 胡金; 吴志伟; 段卫涛; 赵平锋
本发明公开了用于快速检测CYP2D6基因多态性的核酸、试剂盒及方法，具体用于对CYP2D6*10基因C100T和G4268C、CYP2D6*14基因G1758A的位点多态性进行检测。本发明提供用实时荧光定量PCR快速检测CYP2D6基因多态性的检测试剂盒能够用于临床多种类型样本的检测，具有特异性强，灵敏度高，实验周期短，操作简单，安全无毒，成本低等显著优，其检测方法，操作简便，自动化程度高，大大简化了操作过程，并减少了在操作过程的污染，检测效果准确、可靠。
更多227. 产漆酶的产朊假丝酵母菌表达载体、其构建方法、重组工程菌及其应用
申请号: CN202010964667.9
申请日: 2020-09-15
公开（公告）号: CN112048444A
公开（公告）日: 2020-12-08
发明人: 呼和; 高娃; 其布日; 萨初拉; 苏少锋; 吴青海; 王蕴华; 刘红葵
本发明提供一种产漆酶的产朊假丝酵母菌表达载体、其构建方法、重组工程菌及其应用。产漆酶的产朊假丝酵母菌表达载体，包含18S rDNA基因片段‑酵母三磷酸甘油醛脱氢酶基因启动子序列(GAP‑p)‑漆酶基因‑酵母三磷酸甘油醛脱氢酶基因终止子序列(GAP‑t)‑放线菌酮(CYH)抗性基因。本发明整个表达系统的全部遗传元件均来自益生菌产朊假丝酵母和无毒无害的真菌，不携带抗生素抗性基因，不存在抗性基因的漂移、扩散及整合，也不携带其他有毒蛋白基因，不会对环境或人和动物带来生物安全性的危害，达到了食品级，可直接添加到食品、药物和饲料中应用。
更多228. 一种鸡防御素9基因表达载体及其制备方法和应用
申请号: CN201110148424.9
申请日: 2011-06-03
公开（公告）号: CN102260701B
公开（公告）日: 2013-01-30
发明人: 谢青梅; 赵亚华; 林崇韫; 毕英佐; 高向阳; 马静云; 陈峰
本发明公开了一种鸡防御素9基因表达载体及其制备方法和在防治种鸡输卵管疾病中的应用，属于基因工程技术领域。所述表达载体是以真核载体pVAX1为出发载体，用鸡卵清蛋白编码序列取代pVAX1上的CMV启动子，在其下游插入鸡防御素9基因构建而成。该表达载体的制备方法是将鸡防御素9基因连接到载体pVAX1上，鸡卵清蛋白基因连接到载体pMD18-T上，连接后的载体同时进行双酶切后重组，构建含有鸡卵清蛋白基因和鸡防御素9基因的pVAX1重组载体，即为鸡防御素9基因表达载体。本发明的表达载体可用于制备治疗种鸡输卵管疾病药物，治疗效果显著，安全无毒，具有广泛的应用前景。
更多229. 一种鸡防御素9基因表达载体及其制备方法和应用
申请号: CN201110148424.9
申请日: 2011-06-03
公开（公告）号: CN102260701A
公开（公告）日: 2011-11-30
发明人: 谢青梅; 赵亚华; 林崇韫; 毕英佐; 高向阳; 马静云; 陈峰
本发明公开了一种鸡防御素9基因表达载体及其制备方法和在防治种鸡输卵管疾病中的应用，属于基因工程技术领域。所述表达载体是以真核载体pVAX1为出发载体，用鸡卵清蛋白编码序列取代pVAX1上的CMV启动子，在其下游插入鸡防御素9基因构建而成。该表达载体的制备方法是将鸡防御素9基因连接到载体pVAX1上，鸡卵清蛋白基因连接到载体pMD18-T上，连接后的载体同时进行双酶切后重组，构建含有鸡卵清蛋白基因和鸡防御素9基因的pVAX1重组载体，即为鸡防御素9基因表达载体。本发明的表达载体可用于制备治疗种鸡输卵管疾病药物，治疗效果显著，安全无毒，具有广泛的应用前景。
更多230. 用于将核酸有效细胞内递送至免疫细胞的树枝状肽缀合聚合物
申请号: CN202280034944.3
申请日: 2022-03-17
公开（公告）号: CN117355339A
公开（公告）日: 2024-01-05
发明人: E·A·斯科特; S·易
本发明提供了用于将多核苷酸序列递送至细胞、具体为包括树突细胞的免疫细胞的纳米载体以及使用方法。相比现有技术的方法，这些方法提供了改善的递送和降低的毒性。本公开内容的方法提供了一种将核酸递送至细胞的系统，该系统由合成的PEG‑b‑PPS‑接头‑DP聚合物组成，用于生产包含与树枝状特异性支链阳离子肽(DP)缀合的聚乙二醇‑嵌段‑聚丙烯硫醚共聚物(PEG‑b‑PPS)的纳米结构。该系统提供了一种无毒的将多核苷酸递送至包括树突细胞的免疫细胞的体外方法，包括将细胞培养基中的细胞与纳米载体接触，其中该方法对细胞无毒。本发明中描述的方法可用于治疗需要基因治疗的受试者，包括向受试者施用有效量的包含多核苷酸的系统，其中多核苷酸含有用于基因治疗的感兴趣的基因。
更多231. 由含氨基单体和杂环连接剂形成的阳离子聚合物
申请号: CN201280004540.6
申请日: 2012-01-05
公开（公告）号: CN103328542B
公开（公告）日: 2016-02-17
发明人: 金拓; 段诗月
此发明涉及一种聚阳离子基因(DNA或RNA)输送材料的设计与合成方法，通过此设计，聚阳离子高分子(也称阳离子高分子)可通过以提供足够氨基的内源性单体聚合反应经由可降解化学键得分子连接。含有氨基的单体为内源性或对人体无毒的分子。连接剂在可降解为无毒化片段的同时，还可以还原成初始物质并降解产生氨基结构。一些内源性含有氨基的单体可以是精胺或亚精胺(或其衍生物)。可降解的化学键如连接氨基之间的亚胺键。为了提高可降解性与质子海绵效应，低pKa(＜8)氨基基团，由高分子降解产生的自由氨基(例如通过亚胺键连接降解产生的氨基)，或其他供电子基团如咪唑、吡唑、吡啶、嘧啶或者甚至通过在苯环上引入两个(或三个)连接部位与含有氨基的单体进行偶联，这些聚阳离子基因载体可用于基因物质的纳米包封与转染。
更多232. 由含氨基单体和杂环连接剂形成的阳离子聚合物
申请号: CN201280004540.6
申请日: 2012-01-05
公开（公告）号: CN103328542A
公开（公告）日: 2013-09-25
发明人: 金拓; 段诗月
此发明涉及一种聚阳离子基因(DNA或RNA)输送材料的设计与合成方法，通过此设计，聚阳离子高分子(也称阳离子高分子)可通过以提供足够氨基的内源性单体聚合反应经由可降解化学键得分子连接。含有氨基的单体为内源性或对人体无毒的分子。连接剂在可降解为无毒化片段的同时，还可以还原成初始物质并降解产生氨基结构。一些内源性含有氨基的单体可以是精胺或亚精胺(或其衍生物)。可降解的化学键如连接氨基之间的亚胺键。为了提高可降解性与质子海绵效应，低pKa(＜8)氨基基团，由高分子降解产生的自由氨基(例如通过亚胺键连接降解产生的氨基)，或其他供电子基团如咪唑、吡唑、吡啶、嘧啶或者甚至通过在苯环上引入两个(或三个)连接部位与含有氨基的单体进行偶联，这些聚阳离子基因载体可用于基因物质的纳米包封与转染。
更多233. 一种仿生纳米红细胞基因载体及其制备方法与应用
申请号: CN201810262248.3
申请日: 2018-03-28
公开（公告）号: CN108553650A
公开（公告）日: 2018-09-21
发明人: 戴箭; 纪鑫; 王艳明; 薛巍
本发明提供了一种仿生纳米红细胞基因载体及其制备方法与应用。所述的仿生纳米红细胞基因载体，包括红细胞膜和包覆于红细胞膜中的可电荷反转的内核。本发明还提供了该仿生纳米红细胞基因载体的制备方法，通过酰胺反应合成可电荷反转的基因载体；再通过挤压法将可电荷反转的基因载体内核包覆于红细胞膜中。本发明首次运用生物膜包裹治疗基因用于疾病治疗，不仅可以保证内核的负电性，成功被红细胞膜包裹，实现了基因药物在体内的长循环，并在病灶微环境下可实现电荷反转从而释放核酸药物。同时该基因载体无细胞毒性，并可在体内完成无毒化的代谢，为基因治疗提供了一类全新的安全、高效的基因载体，具有广阔的应用前景。
更多234. 含有IGF2b基因的慢病毒载体的构建方法
申请号: CN201110155364.3
申请日: 2011-06-10
公开（公告）号: CN102250912A
公开（公告）日: 2011-11-23
发明人: 袁新华; 董在杰; 徐跑
本发明涉及一种含有IGF2b基因的慢病毒载体的构建方法，包括以下步骤：获取鲤的肝脏组织，提取RNA，后反转录为cDNA，根据基因库中公布的鲤IGF2b基因序列开放阅读框设计引物；在目的片段的5’端和3’端设计内切酶，测序检测是IGF2b基因后，用BamHI和NheI双酶切含有IGF2b基因的PCR回收产物及载体pLenti6.3-IRES-EGFP，然后回收酶切后的载体pLenti6.3-IRES-EGFP及IGF2b基因片段；将酶切回收的IGF2b基因片段与pLenti6.3-IRES-EGFP连接，获得含有IGF2b基因的慢病毒载体。本发明的有益效果为：无毒性且不易诱发宿主免疫反应，安全性较好，不仅能感染分裂细胞，且能转染终末分化细胞和非分裂细胞；是获取转基因鲤的一项关键技术，可在短期内确定具有目的基因的品系，缩短鱼类育种时间。
更多235. 缺失OMPDC和LDH1基因的弓形虫减毒活疫苗
申请号: CN201810127167.2
申请日: 2018-02-08
公开（公告）号: CN108434447B
公开（公告）日: 2020-01-14
发明人: 申邦; 周太芳; 夏宁波; 赵俊龙; 周艳琴; 方瑞; 贺兰; 潘明; 张丽红; 梁笑寒
本发明公开了一种预防弓形虫感染的减毒活疫苗，该疫苗含有同时缺失了乳清酸核苷‑5‑磷酸脱羧酶基因和乳酸脱氢酶1基因的弓形虫疫苗虫株，其中，乳清酸核苷‑5‑磷酸脱羧酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，乳酸脱氢酶1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明提供的减毒活疫苗具有几乎无毒力的优点，能提高动物对弓形虫的免疫能力，可用于预防弓形虫的急慢性及先天性感染，且由于该疫苗虫株切除了药物抗性筛选标签，有制备抗弓形虫基因工程疫苗的潜力。
更多236. APRT家族基因在植物细胞分裂素毒性方面的应用
申请号: CN201110110511.5
申请日: 2011-04-29
公开（公告）号: CN102220349A
公开（公告）日: 2011-10-19
发明人: 郭红卫; 张新岩
本发明提供APRT家族基因在植物细胞分裂素毒性、细胞分裂素代谢调控或作为抗性筛选标记方面的应用，所述APRT家族基因包括拟南芥基因APT1、其同源基因APT2、APT3、APT4和/或APT5。敲除APT1基因可以避免细胞分裂素的毒副作用，APRT类基因功能丧失的植物可以作为细胞分裂素毒性耐受品系用于农业育种。APRT家族基因可以被用来调控细胞分裂素的代谢，从而调节植物的生长发育过程，例如细胞分裂和分化，组织脱分化和再分化，根冠比例，叶片衰老等。此外，APRT家族基因可以作为抗性筛选标记基因。高浓度细胞分裂素处理条件下过量表达APT1蛋白即造成代谢毒性，但APT1蛋白本身对植物无毒性，符合作为筛选标记基因的特点，并且可以进行负筛选。
更多237. 一种益生型抗菌肽EnterocinB的制备方法及其应用
申请号: CN201610490117.1
申请日: 2016-06-28
公开（公告）号: CN106086041A
公开（公告）日: 2016-11-09
发明人: 杨旭; 方华; 季春源; 沈城; 郭子好
本发明公开了一种益生型抗菌肽Enterocin B基因工程菌的制备方法及其应用。本发明的一种益生型抗菌肽Enterocin B基因，具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。益生型抗菌肽Enterocin B基因编码的成熟抗菌肽Enterocin B具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。本发明益生型抗菌肽Enterocin B的制备方法，包括如下步骤：(1)人工合成核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示的基因；(2)构建能高效表达的重组质粒；(3)构建基因工程菌；(4)利用基因工程菌表达抗菌肽Enterocin B。本发明对病原菌具有较强的抑菌活性，安全无毒，无副作用，无抗生素耐药性。
更多238. 缺失OMPDC和LDH1基因的弓形虫减毒活疫苗
申请号: CN201810127167.2
申请日: 2018-02-08
公开（公告）号: CN108434447A
公开（公告）日: 2018-08-24
发明人: 申邦; 周太芳; 夏宁波; 赵俊龙; 周艳琴; 方瑞; 贺兰; 潘明; 张丽红; 梁笑寒
本发明公开了一种预防弓形虫感染的减毒活疫苗，该疫苗含有同时缺失了乳清酸核苷-5-磷酸脱羧酶基因和乳酸脱氢酶1基因的弓形虫疫苗虫株，其中，乳清酸核苷-5-磷酸脱羧酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，乳酸脱氢酶1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明提供的减毒活疫苗具有几乎无毒力的优点，能提高动物对弓形虫的免疫能力，可用于预防弓形虫的急慢性及先天性感染，且由于该疫苗虫株切除了药物抗性筛选标签，有制备抗弓形虫基因工程疫苗的潜力。
更多