本发明涉及柠檬酸发酵领域，具体涉及一种持续补氮的柠檬酸发酵方法。其主要技术方案是对玉米液化液进行复合蛋白酶处理，并根据菌种生长及产酸阶段的不同特性，以流加氮源方式来控制不同阶段不同的氮源浓度，使细胞迅速获得氮源，促进了细胞生长，缩短细胞生长周期，使细胞提前进入产酸高峰期，同时有效降低了料液的粘度，提高了料液的溶氧能力，达到了最优的培养效果。采用本发明工艺后，能明显缩短发酵周期，提高发酵稳定性，而且能提高设备利用率，提升了柠檬酸行业的竞争力，进而提高了企业的经济效益。