本发明公开了一种可高效应用的N‑糖基化褐藻胶裂解酶突变体及基因工程菌构建方法，属于生物技术领域。本发明是在褐藻胶裂解酶Aly‑Cob的基础上，在其N端引入DQNAT重复序列片段作为N‑糖基化位点，同时融合表达载体蛋白YebF进行胞外分泌，进而由空肠弯曲杆菌来源的糖基化体系pgl以糖链GalNAc2(Glc)GalNAc3Bac进行糖基化修饰。所得突变体酶NACob在酶活及稳定性上均较糖基化前得以提高。本发明提供的N‑糖基化修饰褐藻胶裂解酶突变体可广泛应用于海藻加工利用相关的食品、医药、农业等领域。