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公开(公告)号：CN118931874A
公开(公告)日：2024-11-12
申请号：CN202411100911.1
申请日：2024-08-12
申请人： 江南大学
摘要： 本发明涉及一种高效表达磷脂酶D的方法及应用，属于基因工程技术领域。本发明通过表达元件共优化策略，实现了磷脂酶D的高效分泌表达，胞外酶活达到4055.9U/mL，相较于未改造菌株，酶活提高了43.6倍。本发明还根据此表达体系，通过整合位点筛选和多拷贝整合策略，首次实现了磷脂酶D的整合表达，整合菌株胞外酶活达到392.9U/mL。本发明的磷脂酶D具有良好的催化活性，能在水相条件下以大豆卵磷脂为底物高效合成磷脂酸。重组菌株酶活稳定性好、发酵周期短、催化效率高，为大规模工业化生产奠定了基础，表明该菌株在磷脂类衍生物的生物合成领域具有潜在应用价值。同时，整合菌株避免了发酵过程中抗生素的添加，拓宽了菌株的应用范围。
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公开(公告)号：CN117305360B
公开(公告)日：2024-09-24
申请号：CN202311193188.1
申请日：2023-09-15
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种哺乳动物细胞核转染液及其制备方法，以及利用该细胞核转染液进行外源DNA和RNA的哺乳动物细胞核内递送的应用方法，该核转染液包括MgCl2、NaH2PO4、HEPEs、KCl以及DEPC处理水，利用该核转染液能够将DNA、RNA递送到多种哺乳动物细胞中，包括多种人以及小鼠的贴壁细胞和悬浮细胞等，而且能够获得非常高效的转染效率，同时核转后的细胞存活率高，更重要的是在常规方法难转染的悬浮细胞也获得了非常高的转染效率和细胞存活率。本发明采用常规、廉价的化学试剂配制得到该核转染液，成本低于其它常规转染试剂数百倍，操作简便，易于推广到包括基因编辑在内的遗传操作领域中的外源遗传物质细胞内的高效递送相关的基础研究以及临床应用中。
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公开(公告)号：CN118599804A
公开(公告)日：2024-09-06
申请号：CN202410410268.6
申请日：2024-04-07
申请人： 赛诺根生物科学有限公司 , 江南大学
摘要： 本发明公开了一种烟酰胺核糖激酶突变体在大肠杆菌中的高效异源表达及其应用。本发明提供了一种能够在大肠杆菌中异源表达的烟酰胺核糖激酶及其突变体，所述突变体的烟酰胺核糖激酶活性较亲本有了明显提升。在所述烟酰胺核糖激酶及其突变体的基础上，本发明还提供了一种高效异源表达所述烟酰胺核糖激酶的方法，即在构建重组质粒时，通过在质粒中引入核糖体结合位点、插入特定的启动子序列等，使表达所得烟酰胺核糖激酶的酶活力较对照更高。此外，本发明还提供了培养表达所述烟酰胺核糖激酶的重组菌的方法，使表达所得烟酰胺核糖激酶的酶活最高为208.3U/mL。本发明有利于β‑烟酰胺单核苷酸的高效生物合成，适合工业化生产和应用。
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公开(公告)号：CN114214114B
公开(公告)日：2024-02-09
申请号：CN202111452427.1
申请日：2021-11-30
申请人： 贵州山茶产业综合开发有限公司 , 江南大学 , 清华大学无锡应用技术研究院
IPC分类号： C11B3/00
摘要： 本发明公开了一种含甾醇酯的山茶油制备方法及该方法制备的山茶油。本发明所述方法包括如下步骤：对山茶油乳化、发酵、离心，加入植物甾醇，分散均匀后加入促进甾醇转化为甾醇酯的脂肪酶，分次进行酶合成反应，得到含甾醇酯的山茶油。本方法解决了现有技术在制备含甾醇酯山茶油的方法中，外源添加甾醇酯可引入无用甚至有害的有机溶剂及副产物，且功效较低的问题；本方法制备的山茶油甾醇酯含量高、酸价符合食品酸价的规定，油脂品质高。本发明所述方法制备得到的山茶油与外源添加甾醇酯的山茶油相比，更有效地降低甘油三酯、总胆固醇和低密度脂蛋白含量，提高高密度脂蛋白胆固醇含量，调节血脂处于较为健康水平，同时提高皮肤损伤修复效果和速率。
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公开(公告)号：CN117025432A
公开(公告)日：2023-11-10
申请号：CN202311030579.1
申请日：2023-08-16
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种组成型表达人透明质酸酶的毕赤酵母及其应用。本发明在保持人透明质酸酶PH‑20核心功能序列的基础上，首先对其信号肽序列进行替换，使rhPH‑20分泌表达水平提升20％；进一步对共翻译内质网转运途径进行针对性强化，使分泌表达提升48％；之后，通过强化内质网未折叠蛋白响应使分泌表达进一步提升31％。最终，经5‑L发酵罐培养，三步改造后的重组菌OE54‑ScHAC1分泌表达rhPH‑20产量达到19.82U·mL‑1，相较出发总共提升约9.38倍，为目前酵母体系组成型表达最高水平。
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公开(公告)号：CN114794468B
公开(公告)日：2023-09-26
申请号：CN202210428329.2
申请日：2022-04-22
申请人： 贵州山茶产业综合开发有限公司 , 清华大学无锡应用技术研究院 , 江南大学
摘要： 本发明公开了一种原位山茶油乳剂的制备方法及其应用。本发明所述制备方法包括以下步骤：将新鲜山茶籽去皮，加入抗氧化剂含量为0.001～0.01g/mL的水溶液打浆得到山茶籽浆；再加入纤维素酶、果胶酶、中性蛋白酶三种酶依次酶解，再进行灭活，固液分离；分离后的液体，加入乳化剂，高速剪切乳化、均质，得到原位山茶油乳剂。本发明工艺保留了水溶性和油溶性的营养成分，克服了现有技术中活性成分低的问题。本发明工艺制得的原位山茶油乳剂稳定性良好，经过静置不发生分层，无絮凝现象，稳定性良好；且多肽含量不低于1.8％，多糖含量不低于3.0％，具有良好的调节血脂效果。
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公开(公告)号：CN116530577A
公开(公告)日：2023-08-04
申请号：CN202310647838.9
申请日：2023-06-02
申请人： 江南大学
IPC分类号： A23C9/156
摘要： 本发明涉及一种松露香型牛乳及其制备方法，属于食品加工技术领域。本发明的制备方法包括以下步骤，S1、依次将干松露粉末、风味蛋白酶加入牛乳中，搅拌反应得到蛋白酶酶解产物；S2、向S1所述的蛋白酶酶解产物中加入脂肪酶，搅拌反应得到脂肪酶酶解产物；S3、对S2所述的脂肪酶酶解产物进行灭酶、过滤，得到所述的松露香型牛乳。本发明的松露香型牛乳完全使用食品原料、全天然、未添加化学试剂，且香味醇厚、浓郁、两种香型(松露菌香和牛奶乳香)融合度高、持续时间长、风味独特。
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公开(公告)号：CN112266923B
公开(公告)日：2023-04-28
申请号：CN202011185254.7
申请日：2020-10-30
申请人： 江南大学
IPC分类号： C12N15/54 , C12N15/75 , C12N1/21 , C12N9/10 , A61K38/45 , A61P1/16 , A61P19/08 , A61P19/02 , A61P25/00 , C12R1/125
摘要： 本发明公开了一种表达腺苷蛋氨酸合酶的枯草芽孢杆菌及应用，属于基因工程技术领域。本发明在枯草芽孢杆菌异源表达酿酒酵母来源的腺苷蛋氨酸合酶，并通过启动子适配性改造，构建了一株高水平表达腺苷蛋氨酸合酶的枯草芽孢杆菌。进一步通过对其进行发酵条件优化，提高其腺苷蛋氨酸合酶表达水平，使重组菌的酶活高达0.925U·mL‑1，较出发菌株提高了180％，也是首次SAM合酶以枯草芽孢杆菌作为宿主的表达。
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公开(公告)号：CN109852601B
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN201910159781.1
申请日：2019-03-04
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种可高效应用的N‑糖基化褐藻胶裂解酶突变体及基因工程菌构建方法，属于生物技术领域。本发明是在褐藻胶裂解酶Aly‑Cob的基础上，在其N端引入DQNAT重复序列片段作为N‑糖基化位点，同时融合表达载体蛋白YebF进行胞外分泌，进而由空肠弯曲杆菌来源的糖基化体系pgl以糖链GalNAc2(Glc)GalNAc3Bac进行糖基化修饰。所得突变体酶NACob在酶活及稳定性上均较糖基化前得以提高。本发明提供的N‑糖基化修饰褐藻胶裂解酶突变体可广泛应用于海藻加工利用相关的食品、医药、农业等领域。
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公开(公告)号：CN114774316B
公开(公告)日：2022-11-08
申请号：CN202210391317.7
申请日：2022-04-14
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一株马链球菌兽疫亚种突变株及其应用，本发明的马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi subsp.zooepidemicus)SFPE‑A17，于2021年11月12日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号的，保藏编号为CGMCC No.23795。利用本发明的马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi subsp.zooepidemicus)SFPE‑A17在发酵透明质酸的过程中，菌株生长速度显著加快，菌株更早开始积累透明质酸，透明质酸的产量较原始菌株提高42.9％，能够显著地降低生产成本，所得透明质酸分子量降低一倍，分子量平均分布为0.54×106Da，在中低分子量透明质酸市场能够提高产业效率，具有重要的工业应用前景。
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