本发明公开了富含κ‑酪蛋白乳清粉及其制备方法和应用，属于乳品生产领域。本方法以脱脂乳为原料，陶瓷膜微滤进行除菌、分离、超滤提纯浓缩、喷雾干燥步骤制备富含κ‑酪蛋白乳清粉。该方法制备的富含κ‑酪蛋白乳清粉质量纯度≥90％，其中，κ‑酪蛋白质量百分含量约为20‑35％。本方法具有操作简单、生产流程少、可操作性强、无污染等特点。κ‑酪蛋白多为生物活性的蛋白来源，在新生儿的肠道中有促进双歧杆菌生长的作用，有利于婴幼儿的防止腹泻。基于婴幼儿配方乳粉的发展以参照母乳蛋白成分及配比为黄金标准，所得的原料可用于调整婴幼儿配方乳基料的蛋白结构，使得婴幼儿配方乳中的乳蛋白结构更接近于母乳。