本发明属于生物工程领域，具体涉及一种重组嗜盐古菌蛋白酶的制备方法；步骤为：以Halostella sp.DL‑M4的基因组为模板，pET28a质粒为表达载体构建重组质粒；重组质粒转化大肠杆菌细胞，诱导表达，离心收集菌体进行细胞重悬及破碎，再次离心取上清液，加入β‑巯基乙醇得到混合液过镍柱，酶原与镍介质结合复性，最后经二次除杂蛋白及目标蛋白洗脱、超滤离心浓缩、凝胶过滤层析，得到重组嗜盐古菌蛋白酶；本发明具有良好的通用性，纯化步骤更简单，生产周期更短，获得的蛋白酶纯度高，最终获得比酶活为1159.15U/mg的嗜盐古菌蛋白酶。