本发明涉及一种两亲性小分子自组装的聚集诱导发光纳米颗粒及其制备方法和应用。利用自组装元件二苯丙氨酸肽(L‑苯丙氨酰‑苯丙氨酸)将具有肿瘤杀伤效果的药物以及肿瘤靶向性的亲水基团氨基葡萄糖，在水溶液中自组装成纳米颗粒，然后以此结构为纳米骨架，形成可以负载聚集诱导发光材料(Aggregation‑Induced Emission，AIE)的纳米颗粒，具有靶向癌细胞成像并且杀伤癌细胞的双重作用，可用于制备抗肿瘤药物、细胞器染色、病原体识别、细胞长周期示踪、肿瘤细胞成像。