本发明公开了一种环境响应型葡糖基纳米凝胶的加工方法与应用，属于生物材料加工技术领域。本发明以纳米葡糖基衍生物颗粒为原料，利用酶促扩链‑原位组装协同技术得到环境响应型纳米凝胶，具体的，将纳米葡糖基衍生物颗粒配成溶液，再添加供体分子和客体分子，继续添加特异性糖酶制剂，在30‑45℃反应1‑24h后即得目标产物环境响应型纳米凝胶。本发明技术具有反应高效温和、进程安全可控、操作简单环保等特点，实现了绿色制备环境友好型高分子材料，所得纳米凝胶不仅高效负载功能活性物质，还能在肠道实现靶向释放，可以广泛应用在食品、日化、医药等领域。