本发明属于生物医药领域，涉及一种纳米治疗体系，特别是指一种刺激‑响应型双靶点核酸纳米治疗体系及其构建方法和应用。将三条单链直链DNA溶于体外缓冲盐溶液中，退火自组装形成具有三磷酸腺苷（ATP）响应的核酸纳米结构；95℃慢退火至4℃，完成双靶点核酸纳米治疗体系的构建。该核酸纳米治疗体系在生物体内ATP作用下解链后，分别作用不同的靶点，发挥治疗作用。本发明所构建的刺激‑响应型双靶点核酸纳米结构，制备方法简单，不仅可提高单独适配体的稳定性，还可以增强双靶点核酸纳米治疗体系的靶向性，主要通过调控细胞信号通路发挥生物治疗作用。