本发明涉及一种重组人角质细胞生长因子‑2及其制备方法和应用，其制备方法包括以下步骤，人工全基因合成所述重组人角质细胞生长因子‑2的核苷酸序列，并将其插入到pET‑28a（+）载体的NcoI和XhoI限制性酶切位点之间，得到重组载体pET‑28a（+）‑rhKGF‑2；将重组载体导入大肠杆菌BL21中，筛选高表达活化的转化子；培养转化子，并诱导表达重组人角质细胞生长因子‑2，表达完成后经后处理，得到rhKGF‑2。本发明解决了现有方法中表达得到的目的蛋白N端多出一个Met甚至多个氨基酸残基、需要加工修饰的问题，并能获得理化特性和生物学活性高、活性和纯度较高的rhKGF‑2，可用于预防和治疗急性肺损伤、呼吸窘迫综合征、慢性阻塞性肺病。