鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白重组载体及其构建方法和应用
摘要:
本发明提出了鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白重组载体及其构建方法和应用,属于基因工程技术领域。从IBDV病毒中提取RNA,反转录为cDNA后,用带酶切位点的特异性引物扩增vp2基因,并通过双酶切连接到带有StrepⅡ标签的pFastbac载体上,制得重组pFastbac‑vp2质粒,转化至感受态细胞DH10Bac中,涂板,通过蓝白斑筛选获得重组Bacmind,培养,收集菌体提取,转染到SF9细胞中收集细胞上清和细胞,反复冻融,离心,收集上清病毒液PⅠ,将病毒传代培养至PⅡ后,用PⅡ二代毒接种至SF9细胞中悬浮培养真核表达VP2蛋白。本发明建立的法具有良好的特异性,能提高检测结果准确率。
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