发明公开
- 专利标题: 鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白重组载体及其构建方法和应用
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申请号: CN202310546900.5申请日: 2023-05-16
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公开(公告)号: CN116790579A公开(公告)日: 2023-09-22
- 发明人: 郑世军 , 王永强 , 王红暖 , 高丽 , 李晓齐 , 曹红
- 申请人: 中国农业大学
- 申请人地址: 北京市海淀区圆明园西路2号
- 专利权人: 中国农业大学
- 当前专利权人: 中国农业大学
- 当前专利权人地址: 北京市海淀区圆明园西路2号
- 代理机构: 北京智宇正信知识产权代理事务所
- 代理商 谷劲飞
- 主分类号: C12N15/11
- IPC分类号: C12N15/11 ; C12N15/40 ; C12N15/866 ; C07K14/08 ; G01N33/68
摘要:
本发明提出了鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白重组载体及其构建方法和应用,属于基因工程技术领域。从IBDV病毒中提取RNA,反转录为cDNA后,用带酶切位点的特异性引物扩增vp2基因,并通过双酶切连接到带有StrepⅡ标签的pFastbac载体上,制得重组pFastbac‑vp2质粒,转化至感受态细胞DH10Bac中,涂板,通过蓝白斑筛选获得重组Bacmind,培养,收集菌体提取,转染到SF9细胞中收集细胞上清和细胞,反复冻融,离心,收集上清病毒液PⅠ,将病毒传代培养至PⅡ后,用PⅡ二代毒接种至SF9细胞中悬浮培养真核表达VP2蛋白。本发明建立的法具有良好的特异性,能提高检测结果准确率。
IPC分类: