公开(公告)号：CN116790579A

公开(公告)日：2023-09-22

申请号：CN202310546900.5

申请日：2023-05-16

申请人： 中国农业大学

发明人： 郑世军 ,  王永强 ,  王红暖 ,  高丽 ,  李晓齐 ,  曹红

IPC分类号： C12N15/11 ,  C12N15/40 ,  C12N15/866 ,  C07K14/08 ,  G01N33/68

摘要： 本发明提出了鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白重组载体及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。从IBDV病毒中提取RNA，反转录为cDNA后，用带酶切位点的特异性引物扩增vp2基因，并通过双酶切连接到带有StrepⅡ标签的pFastbac载体上，制得重组pFastbac‑vp2质粒，转化至感受态细胞DH10Bac中，涂板，通过蓝白斑筛选获得重组Bacmind，培养，收集菌体提取，转染到SF9细胞中收集细胞上清和细胞，反复冻融，离心，收集上清病毒液PⅠ，将病毒传代培养至PⅡ后，用PⅡ二代毒接种至SF9细胞中悬浮培养真核表达VP2蛋白。本发明建立的法具有良好的特异性，能提高检测结果准确率。