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公开(公告)号:CN118726280A
公开(公告)日:2024-10-01
申请号:CN202410722491.4
申请日:2024-06-05
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明涉及一种基于VP5氨基酸位点突变的鸡传染性法氏囊病病毒减毒活疫苗株及其构建方法。本发明的鸡传染性法氏囊病病毒VP5基因突变减毒活疫苗株(IBDV‑VP5/3m)是以IBDV‑Lx毒株为母本模型,通过反向遗传技术对VP5引起细胞凋亡的关键结构域进行突变,在保留IBDV完整抗原性的同时,降低IBDV毒力,从而针对性的快速开发IBDV低毒力毒株。该毒株不仅不会引起法氏囊的损伤,并且可以诱导优秀的体液免疫,对高剂量亲本毒株和新型变异株都有免疫保护作用。将在IBD的防控中提供重要支持。
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公开(公告)号:CN117630361A
公开(公告)日:2024-03-01
申请号:CN202311099213.X
申请日:2023-08-29
Applicant: 中国农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/68 , C07K14/14 , C12N15/46 , C12N15/866 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开了一种检测禽呼肠孤病毒抗体的间接ELISA方法及其专用试剂盒。解决的技术问题是提供一种用于间接ELISA检测禽呼肠孤病毒相关蛋白及试剂盒与检测方法。具体公开了氨基酸序列是SEQ ID No.2所述蛋白质在下述任一中的应用:A1)蛋白质在制备用于检测禽呼肠孤病毒产品中的应用;A2)蛋白质在制备用于诊断或辅助诊断禽呼肠孤病毒感染所引起的疾病的产品中的应用;A3)蛋白质在制备用于筛查或辅助筛查禽呼肠孤病毒感染所引起的疾病的产品中的应用。通并建立的了检测方法,并提供了试剂盒,使用上述试剂盒检测待测样本,能够准确鉴定出样本是否存在禽呼肠孤病毒抗体。
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公开(公告)号:CN116790579A
公开(公告)日:2023-09-22
申请号:CN202310546900.5
申请日:2023-05-16
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N15/11 , C12N15/40 , C12N15/866 , C07K14/08 , G01N33/68
Abstract: 本发明提出了鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白重组载体及其构建方法和应用,属于基因工程技术领域。从IBDV病毒中提取RNA,反转录为cDNA后,用带酶切位点的特异性引物扩增vp2基因,并通过双酶切连接到带有StrepⅡ标签的pFastbac载体上,制得重组pFastbac‑vp2质粒,转化至感受态细胞DH10Bac中,涂板,通过蓝白斑筛选获得重组Bacmind,培养,收集菌体提取,转染到SF9细胞中收集细胞上清和细胞,反复冻融,离心,收集上清病毒液PⅠ,将病毒传代培养至PⅡ后,用PⅡ二代毒接种至SF9细胞中悬浮培养真核表达VP2蛋白。本发明建立的法具有良好的特异性,能提高检测结果准确率。
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公开(公告)号:CN108776221A
公开(公告)日:2018-11-09
申请号:CN201810575209.9
申请日:2018-06-06
Applicant: 中国农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/68
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,特别涉及一种禽白血病病毒抗体和鸡白痢沙门氏菌抗体同时检测的试剂盒。该试剂盒的抗原组合包括p27蛋白、gp85蛋白和GroEL-Δ8-1蛋白。用禽白血病病毒衣壳蛋白p27、囊膜蛋白gp85的原核表达蛋白和鸡白痢沙门氏菌优势抗原GroEL的截短体GroEL-Δ8-1的原核表达蛋白作为包被抗原开发出能够同时检测禽白血病病毒和鸡白痢沙门氏菌抗体的ELISA试剂盒。与目前常用的单独检测禽白血病或鸡白痢的试剂盒相比,本发明的试剂盒取得了同时检测禽白血病和鸡白痢的效果,能极大减轻禽白血病和鸡白痢的检测净化工作。
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公开(公告)号:CN116027031A
公开(公告)日:2023-04-28
申请号:CN202211213788.5
申请日:2022-09-30
Applicant: 中国农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/531 , G01N33/543 , G01N33/58 , G01N33/68
Abstract: 本发明提供了MPXV‑A27L蛋白在制备免疫检测正痘病毒感染的试剂盒中的应用和制备的试剂盒,属于体外诊断技术领域。本发明为了丰富市场上检测正痘病毒感染的试剂盒,筛选出MPXV‑A27L蛋白作为反应原与感染正痘病毒的血样中抗体特异性结合,而与其他痘病毒结合力较低,具有检测正痘病毒感染或筛选正痘病毒中和抗体提供了有效反应原,同时本发明提供的正痘病毒间接ELISA抗体检测试剂盒具有特异性强、敏感度高、操作简便等优点,为早期诊断正痘病毒提供了基础。
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公开(公告)号:CN108709995B
公开(公告)日:2020-05-22
申请号:CN201810575755.2
申请日:2018-06-06
Applicant: 中国农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明涉及动物疫病检测技术领域,特别涉及一种同时检测禽白血病病毒抗体和鸡白痢沙门氏菌抗体的试剂盒。该试剂盒包括:p27蛋白、GroEL‑Δ8‑1蛋白、酶标记的第二抗体、BSA、包被液、封闭液、显色液和终止液。本发明用禽白血病病毒保守区p27的原核表达蛋白和鸡白痢沙门氏菌优势抗原GroEL的截短体GroEL‑Δ8‑1的原核表达蛋白为包被抗原开发出能够同时检测禽白血病病毒抗体和鸡白痢沙门氏菌抗体的间接ELISA试剂盒,本发明的试剂盒能够同时检测禽白血病和鸡白痢,只要检测为阳性的鸡即淘汰,达到同时净化的目的,极大地减轻临床检测净化的工作。
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公开(公告)号:CN109655619A
公开(公告)日:2019-04-19
申请号:CN201910062661.X
申请日:2019-01-23
Applicant: 中国农业大学
IPC: G01N33/577 , G01N33/558 , G01N33/535
Abstract: 本发明公开了一种检测鸡白细胞介素12含量的方法及其专用试剂盒。本发明利用chIL-12单克隆抗体建立了针对chIL-12在蛋白水平上的双夹心ELISA检测方法。通过实验证明:本发明的抗chIL-12单克隆抗体具有良好的特异性和亲和力,能够准确地反映出血清或细胞上清中chIL-12的含量,且本发明的检测方法快捷、高效又准确,解决了现有技术中采用荧光定量PCR检测方法带来的操作繁琐,耗时耗力,易受操作及其他外部条件影响等问题,不仅有助于评价chIL-12在机体内的动态变化水平,为疾病的预防和治理提供很好的参考,而且有助于了解鸡类传染性疾病的发生、发展、转归情况及机体保护性免疫反应的动态。
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公开(公告)号:CN107300619A
公开(公告)日:2017-10-27
申请号:CN201710480501.8
申请日:2017-06-22
Applicant: 中国农业大学
IPC: G01N33/577 , G01N33/532
CPC classification number: G01N33/577 , G01N33/532 , G01N2333/5406
Abstract: 本发明公开了一种检测禽白细胞介素4含量的方法及其专用试剂盒。本发明利用chIL-4单克隆抗体建立了针对chIL-4在蛋白水平上的双夹心ELISA检测方法。通过实验证明:本发明的抗chIL-4单克隆抗体具有良好的特异性和亲和力,能够准确地反映出血清或细胞上清中chIL-4的含量,且本发明的检测方法快捷、高效又准确,解决了现有技术中采用荧光定量PCR检测方法带来的操作繁琐,耗时耗力,易受操作及其他外部条件影响等问题,不仅有助于评价chIL-4在机体内的动态变化水平,为疾病的预防和治理提供很好的参考,而且有助于了解禽类传染性疾病的发生、发展、转归情况及机体保护性免疫反应的动态。
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公开(公告)号:CN106866797A
公开(公告)日:2017-06-20
申请号:CN201710183203.2
申请日:2017-03-24
Applicant: 中国农业大学
IPC: C07K14/15 , A61K39/21 , A61P31/14 , G01N33/569
CPC classification number: C07K14/005 , A61K39/00 , C12N2740/11022 , C12N2740/11034 , G01N33/56983 , G01N2469/20
Abstract: 本发明属于动物疾病检测技术领域,公开了J亚群禽白血病病毒特异性抗原表位、融合蛋白、特异性抗体及其应用。本发明所述J亚群禽白血病病毒特异性抗原表位其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。实验表明,该抗原表位对J亚群血清有反应同时对AB亚群血清无反应,能够特异性识别J亚群禽白血病病毒。本发明所述融合蛋白能够制成疫苗,刺激受体产生抗体,保护受体抵抗J亚群禽白血病病毒感染。本发明所述融合蛋白免疫动物可制备J亚群禽白血病病毒特异性抗体。本发明所述J亚群禽白血病病毒特异性抗体可以与J亚群禽白血病特异性抗原表位特异性识别,开发检测试剂盒,用于区分AB亚群和J亚群禽白血病。
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公开(公告)号:CN103995126B
公开(公告)日:2015-10-14
申请号:CN201410158723.4
申请日:2014-04-18
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明通过免疫沉淀技术筛选鸡白痢沙门氏菌优势抗原GroEL,利用原核表达载体表达GroEL重组蛋白,并利用该抗原蛋白建立了检测鸡白痢沙门氏菌抗体的ELISA试剂盒。本发明试剂盒在检测鸡白痢沙门氏菌抗体过程中能够减少鸡的应激,并提高检测特异性和敏感性。
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