本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及了一种酶活性提升的黄素单加氧酶突变体及其制备与应用。通过全基因合成获得来自粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)的野生型黄素单加氧酶基因，利用关键位点氨基酸残基定点突变技术对野生型黄素单加氧酶基因进行改造，得到黄素单加氧酶突变体Q89H及其编码基因spfmom，重新构建重组质粒，并实现了其在大肠杆菌中的高效表达，突变体的相对酶活为野生型的130％，催化蒜氨酸的产率到达22.86％，具有重要的工业价值。