发明公开
- 专利标题: 卡波西样血管内皮瘤细胞及动物模型的构建方法及应用
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申请号: CN202410572714.3申请日: 2024-05-10
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公开(公告)号: CN118895247A公开(公告)日: 2024-11-05
- 发明人: 李亚楠 , 王川 , 孔萌 , 吉毅
- 申请人: 四川大学华西医院 , 济南市儿童医院(山东大学附属儿童医院)
- 申请人地址: 四川省成都市武侯区国学巷37号;
- 专利权人: 四川大学华西医院,济南市儿童医院(山东大学附属儿童医院)
- 当前专利权人: 四川大学华西医院,济南市儿童医院(山东大学附属儿童医院)
- 当前专利权人地址: 四川省成都市武侯区国学巷37号;
- 代理机构: 重庆市信立达专利代理事务所
- 代理商 金兰
- 主分类号: C12N5/09
- IPC分类号: C12N5/09 ; C12N5/071 ; G01N1/30
摘要:
本发明涉及生物医疗领域,具体涉及卡波西样血管内皮瘤细胞及动物模型的构建方法及应用。通过新鲜的猪主动脉得到DAM溶液。在无菌条件下,用手术剪将血管瘤样本切碎,利用血管特异性DAM包被组织碎片,采用内皮细胞培养基培养。14天后利用胰酶消化分解孵育出的细胞,获得原代KHE细胞。使用流式细胞仪从原代培养物中无菌分选CD31+细胞(CD31+KHE cell),在37℃含5%CO2的湿化环境中,对CD31+KHE cell进行培养。将原代CD31+KHE cell悬浮于血管特异性DAM中,然后注射到6周龄雄性裸鼠的右大腿区域皮下,每只细胞数量为1×107。在注射后的第10天,对这些动物实施安乐死,并采集其皮下移植瘤,随后固定在10%中性缓冲福尔马林中,用于后续免疫荧光。