卡波西样血管内皮瘤细胞及动物模型的构建方法及应用
摘要:
本发明涉及生物医疗领域,具体涉及卡波西样血管内皮瘤细胞及动物模型的构建方法及应用。通过新鲜的猪主动脉得到DAM溶液。在无菌条件下,用手术剪将血管瘤样本切碎,利用血管特异性DAM包被组织碎片,采用内皮细胞培养基培养。14天后利用胰酶消化分解孵育出的细胞,获得原代KHE细胞。使用流式细胞仪从原代培养物中无菌分选CD31+细胞(CD31+KHE cell),在37℃含5%CO2的湿化环境中,对CD31+KHE cell进行培养。将原代CD31+KHE cell悬浮于血管特异性DAM中,然后注射到6周龄雄性裸鼠的右大腿区域皮下,每只细胞数量为1×107。在注射后的第10天,对这些动物实施安乐死,并采集其皮下移植瘤,随后固定在10%中性缓冲福尔马林中,用于后续免疫荧光。
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