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公开(公告)号：CN118895247A
公开(公告)日：2024-11-05
申请号：CN202410572714.3
申请日：2024-05-10
申请人： 四川大学华西医院 , 济南市儿童医院(山东大学附属儿童医院)
摘要： 本发明涉及生物医疗领域，具体涉及卡波西样血管内皮瘤细胞及动物模型的构建方法及应用。通过新鲜的猪主动脉得到DAM溶液。在无菌条件下，用手术剪将血管瘤样本切碎，利用血管特异性DAM包被组织碎片，采用内皮细胞培养基培养。14天后利用胰酶消化分解孵育出的细胞，获得原代KHE细胞。使用流式细胞仪从原代培养物中无菌分选CD31+细胞(CD31+KHE cell)，在37℃含5％CO2的湿化环境中，对CD31+KHE cell进行培养。将原代CD31+KHE cell悬浮于血管特异性DAM中，然后注射到6周龄雄性裸鼠的右大腿区域皮下，每只细胞数量为1×107。在注射后的第10天，对这些动物实施安乐死，并采集其皮下移植瘤，随后固定在10％中性缓冲福尔马林中，用于后续免疫荧光。
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公开(公告)号：CN118064372B
公开(公告)日：2024-07-05
申请号：CN202410500224.2
申请日：2024-04-24
申请人： 四川大学华西医院
IPC分类号： C12N5/09
摘要： 本发明属于细胞生物学技术领域，具体涉及卡波西样血管内皮瘤消化液及其用途、消化方法、原代细胞培养方法和原代细胞。本发明的消化液是包括如下浓度的组分的水溶液：LiberaseTM 0.03‑0.05mg/mL、Dispase 3‑5U/mL、Ca2+ 0.7‑0.9μM、Mg2+ 0.5‑0.7μM、6%‑10% v/v Hepes缓冲液、70%‑80% v/v DMEM培养基、1%‑4% v/v 100×青霉素‑链霉素溶液。该消化液能够更好地保持细胞的状态，使得后续细胞培养中细胞生长更快，传代更加稳定。本发明的技术方案有利于卡波西样血管内皮瘤细胞在实验研究中的广泛应用，具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN115651912A
公开(公告)日：2023-01-31
申请号：CN202211333450.3
申请日：2022-10-28
申请人： 四川大学华西医院
摘要： 本发明属于生物医学领域，公开了一种婴儿血管瘤CD31+HemECs3D微肿瘤模型的构建方法及应用，包括：在无菌条件，用手术剪将血管瘤样本切碎，采用胶原酶A消化剪碎的组织；使用流式细胞仪从原代培养物中无菌分选CD31+细胞，在37℃含5％CO2的湿化环境中，对CD31+HemECs进行培养；将新鲜的猪主动脉浸泡在含有100U/ml青霉素和100g/ml链霉素的磷酸盐缓冲盐水(PBS)中，置于冰上后立即转入实验室，进行猪主动脉去细胞化及血管特异性DAM特征；分析脱细胞猪主动脉细胞外基质水凝胶的特性；制备微图案阵列打印3D培养皿，形成CD31+HemEC微肿瘤；评估模型对IH一线治疗药物普萘洛尔的适用性。本发明为IH的机制探索和药物筛选提供更加稳定和高效的实验模型，有利于维持肿瘤的异质性，模拟体内瘤体组织。
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公开(公告)号：CN112022798B
公开(公告)日：2022-04-29
申请号：CN202010799614.6
申请日：2020-08-11
申请人： 四川大学华西医院
IPC分类号： A61K9/06 , A61K47/06 , A61K31/436 , A61P35/00 , A61P9/00
摘要： 本发明属于肿瘤治疗技术领域，公开了一种速效他克莫司软膏、制备方法及应用，所述速效他克莫司软膏通过将凡士林配伍他克莫司粉剂(他克莫司胶囊粉剂)，配制成1.0％的浓度制备而成；所述速效他克莫司软膏的制备方法中，使用的原料包括：他克莫司胶囊0.5mg*50粒规格、医用凡士林、换药包一个、高精度医用电子称一台、50ml注射器1支、20ml空针2支。本发明提供的速效他克莫司软膏，通过将凡士林配伍他克莫司粉剂(他克莫司胶囊粉剂)，配制成1.0％的浓度，临床起效快，作用时间长久，且治疗周期短。本发明将药膏存于针管中，方便使用，按需取用，浪费较少；注射器只出不进的特性可以最大限度的保护余下的药物不被污染。
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公开(公告)号：CN113952337A
公开(公告)日：2022-01-21
申请号：CN202111135464.X
申请日：2021-09-27
申请人： 四川大学华西医院
IPC分类号： A61K31/4709 , A61K45/00 , A61P35/00 , A61P9/14
摘要： 本发明涉及医学生物领域，公开了PFKFB3抑制剂在制备治疗婴幼儿血管瘤的药物中的应用，所述PFKFB3抑制剂通过抑制糖酵解通路关键酶PFKFB3的活性而抑制HemEC的增殖与迁移，从而促进血管瘤内皮细胞(Hemangioma‑derived endothelial cell,HemEC)的凋亡。本发明为婴幼儿血管瘤的治疗提供了新的方向，有助于进一步揭示婴幼儿血管瘤的发生发展机理，为靶向干预婴幼儿血管瘤的发展提供了新的潜在靶点。
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公开(公告)号：CN116034947A
公开(公告)日：2023-05-02
申请号：CN202310068762.4
申请日：2023-02-06
申请人： 四川大学华西医院
IPC分类号： A01K67/027
摘要： 本发明提供了一种构建血管瘤动物模型的方法，属于动物模型领域。所述方法是将血管瘤内皮细胞与血管瘤周细胞注入动物皮下组织，5‑30天后得到血管瘤动物模型。本发明基于血管瘤内皮细胞与血管瘤周细胞，成功构建了血管瘤动物模型，该动物模型构建时间短，病理特征与血管瘤病理特征一致，能够模拟出体内血管瘤从增殖到消退演化的特征，为血管瘤体外机制研究及新靶向药物的筛选提供了重要的动物模型载体平台。
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公开(公告)号：CN114236126A
公开(公告)日：2022-03-25
申请号：CN202111569855.2
申请日：2021-12-21
申请人： 四川大学华西医院
IPC分类号： G01N33/574 , G01N33/573 , G01N33/531 , G01N21/64
摘要： 本发明属于生物技术领域，公开了一种糖酵解通路关键酶在婴幼儿血管瘤中的应用，所述糖酵解通路关键酶在IH增殖期组织与血管瘤内皮细胞中高表达，抑制关键酶磷酸果糖激酶‑2/果糖‑2,6‑二磷酸酶3的活性可抑制HemEC的增殖与迁移，促进凋亡。鉴定方法包括：免疫组化分析IH增殖期组织与消退期组织中糖酵解关键酶的表达，分析在HemEC与脐静脉内皮细胞的表达情况，并检测抑制剂干预PFKFB3表达后的HemEC的增殖、迁移及凋亡能力。本发明确定糖酵解通路关键酶在IH中的表达情况及其作用，揭示IH发生发展的病理机制，为以糖酵解为靶点的IH治疗提供实验依据。
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公开(公告)号：CN113274348A
公开(公告)日：2021-08-20
申请号：CN202110653100.4
申请日：2021-06-11
申请人： 四川大学华西医院
IPC分类号： A61K9/06 , A61K31/165 , A61K47/06 , A61P9/14
摘要： 本发明属于医药技术领域，公开了一种用于治疗婴幼儿血管瘤的阿替洛尔凝胶、制备方法及应用，所述用于治疗婴幼儿血管瘤的阿替洛尔凝胶为5％的阿替洛尔凝胶。所述阿替洛尔凝胶由阿替洛尔与固体凝胶组成。所述阿替洛尔在每克阿替洛尔凝胶中的含量为50mg。阿替洛尔凝胶制备方法包括：将50mg阿替洛尔与固定凝胶混合即可得到。本发明的阿替洛尔凝胶可以用于治疗婴幼儿血管瘤，治疗效果好，不良反应少，适应症更广泛；半衰期更长，药物使用频率更少，医从性更好，价格也更低廉。本发明的阿替洛尔凝胶通过外用治疗血管瘤，能够避免口服药物导致的胃肠道不适(腹泻)、情绪变化等不良反应的风险。
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公开(公告)号：CN118064372A
公开(公告)日：2024-05-24
申请号：CN202410500224.2
申请日：2024-04-24
申请人： 四川大学华西医院
IPC分类号： C12N5/09
摘要： 本发明属于细胞生物学技术领域，具体涉及卡波西样血管内皮瘤消化液及其用途、消化方法、原代细胞培养方法和原代细胞。本发明的消化液是包括如下浓度的组分的水溶液：LiberaseTM 0.03‑0.05mg/mL、Dispase 3‑5U/mL、Ca2+0.7‑0.9μM、Mg2+0.5‑0.7μM、6%‑10%v/v Hepes缓冲液、70%‑80%v/v DMEM培养基、1%‑4%v/v 100×青霉素‑链霉素溶液。该消化液能够更好地保持细胞的状态，使得后续细胞培养中细胞生长更快，传代更加稳定。本发明的技术方案有利于卡波西样血管内皮瘤细胞在实验研究中的广泛应用，具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN112022798A
公开(公告)日：2020-12-04
申请号：CN202010799614.6
申请日：2020-08-11
申请人： 四川大学华西医院
IPC分类号： A61K9/06 , A61K47/06 , A61K31/436 , A61P35/00 , A61P9/00
摘要： 本发明属于肿瘤治疗技术领域，公开了一种速效他克莫司软膏、制备方法及应用，所述速效他克莫司软膏通过将凡士林配伍他克莫司粉剂(他克莫司胶囊粉剂)，配制成1.0％的浓度制备而成；所述速效他克莫司软膏的制备方法中，使用的原料包括：他克莫司胶囊0.5mg*50粒规格、医用凡士林、换药包一个、高精度医用电子称一台、50ml注射器1支、20ml空针2支。本发明提供的速效他克莫司软膏，通过将凡士林配伍他克莫司粉剂(他克莫司胶囊粉剂)，配制成1.0％的浓度，临床起效快，作用时间长久，且治疗周期短。本发明将药膏存于针管中，方便使用，按需取用，浪费较少；注射器只出不进的特性可以最大限度的保护余下的药物不被污染。
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