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发明公开
卡波西样血管内皮瘤细胞及动物模型的构建方法及应用审中-公开

公开(公告)号：CN118895247A

公开(公告)日：2024-11-05

申请号：CN202410572714.3

申请日：2024-05-10

申请人： 四川大学华西医院 , 济南市儿童医院(山东大学附属儿童医院)

发明人： 李亚楠 , 王川 , 孔萌 , 吉毅

IPC分类号： C12N5/09 , C12N5/071 , G01N1/30

摘要： 本发明涉及生物医疗领域，具体涉及卡波西样血管内皮瘤细胞及动物模型的构建方法及应用。通过新鲜的猪主动脉得到DAM溶液。在无菌条件下，用手术剪将血管瘤样本切碎，利用血管特异性DAM包被组织碎片，采用内皮细胞培养基培养。14天后利用胰酶消化分解孵育出的细胞，获得原代KHE细胞。使用流式细胞仪从原代培养物中无菌分选CD31+细胞(CD31+KHE cell)，在37℃含5％CO2的湿化环境中，对CD31+KHE cell进行培养。将原代CD31+KHE cell悬浮于血管特异性DAM中，然后注射到6周龄雄性裸鼠的右大腿区域皮下，每只细胞数量为1×107。在注射后的第10天，对这些动物实施安乐死，并采集其皮下移植瘤，随后固定在10％中性缓冲福尔马林中，用于后续免疫荧光。