公开(公告)号：CN101260146B

公开(公告)日：2010-11-03

申请号：CN200810104851.5

申请日：2008-04-24

申请人： 中国农业大学

发明人： 韩振海 ,  王晶莹 ,  许雪峰 ,  李天忠 ,  王忆

IPC分类号： C07K1/26

摘要： 本发明公开了一种苹果属植物蛋白质双向电泳方法。该方法包括以下步骤：1)将植物材料在液氮中研碎，加入-20℃预冷的含有10g/100mL的三氯乙酸和0.07ml/100mL的β-巯基乙醇的丙酮溶液继续研磨成匀浆，-20℃放置1h，然后12000rpm离心15min，保留沉淀；2)向沉淀中加入4倍沉淀体积的含有0.07ml/100mL的β-巯基乙醇的丙酮溶液，混匀-20℃放置1h，然后12000rpm离心15min，保留沉淀；3)重复步骤2)6次，得到总蛋白；4)对步骤3)的总蛋白进行等电聚焦电泳，蛋白质上样量为300ug/170mm胶条，然后进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，电泳结束后进行银染。

公开(公告)号：CN101260146A

公开(公告)日：2008-09-10

申请号：CN200810104851.5

申请日：2008-04-24

申请人： 中国农业大学

发明人： 韩振海 ,  王晶莹 ,  许雪峰 ,  李天忠 ,  王忆

IPC分类号： C07K1/26

摘要： 本发明公开了一种苹果属植物蛋白质双向电泳方法。该方法包括以下步骤：1)将植物材料在液氮中研碎，加入－20℃预冷的含有10g/100ml的三氯乙酸和0。07ml/100ml的β－巯基乙醇的丙酮溶液继续研磨成匀浆，－20℃放置1h，然后12000rpm离心15min，保留沉淀；2)向沉淀中加入4倍沉淀体积的含有0.07ml/100ml的β－巯基乙醇的丙酮溶液，混匀－20℃放置11，然后12000rpm离心15min，保留沉淀；3)重复步骤2)6次，得到总蛋白；4)对步骤3)的总蛋白进行等电聚焦电泳，蛋白质上样量为300ug/170mm胶条，然后进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，电泳结束后进行银染。