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公开(公告)号：CN116064897A
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202211021297.0
申请日：2022-08-24
申请人： 云南省烟草农业科学研究院
IPC分类号： C12Q1/6895 , C12N15/11
摘要： 本发明属于烟草育种领域，涉及用于抗斑萎病烟草13号染色体背景筛选的引物组及其应用。提供用于抗斑萎病烟草育种背景筛选的PCR引物组合，包括第一PCR引物组和/或第二PCR引物组；所述第一PCR引物组由核苷酸序列如SEQ ID NO:1‑3所示的三条引物组成；所述第二PCR引物组由核苷酸序列如SEQ ID NO:4‑6所示的三条引物组成；所述抗斑萎病烟草为供体亲本Polalta烟草和受体亲本K326烟草的杂交及回交后代。本发明的引物组可用于早世代筛选具有K326烟草背景的抗斑萎病烟草，极大地缩短K326抗斑萎病定向改良的育种周期，提高育种效率。
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公开(公告)号：CN110499390B
公开(公告)日：2023-03-10
申请号：CN201910934803.7
申请日：2019-09-29
申请人： 云南省烟草农业科学研究院
IPC分类号： C12Q1/6895 , C12N15/11
摘要： 用于烟草抗斑萎病RTSW基因辅助选择的分子标记引物、辅助选择的方法及其应用，所述引物由引物1和引物2的两条单链DNA组成。本发明所开发的分子标记检测的基因位点位置明确，鉴定方便。本发明还提供了一种利用所述分子标记检测烟草抗斑萎病RTSW基因的分子标记方法，以及所述分子标记在烟草分子定位、克隆和烟草抗斑萎病RTSW基因辅助选择中的应用。引物辅助选择通过检测抗斑萎病基因位点来预测烟草对斑萎病的抗性，可以在烟草的实生苗阶段进行淘汰选择，不仅节省生产成本而且大大提高抗烟草斑萎病基因RTSW品种的筛选效率，极大地缩短抗病烟草品种的育种周期，提高育种效率。
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公开(公告)号：CN114150081A
公开(公告)日：2022-03-08
申请号：CN202111460402.6
申请日：2021-12-02
申请人： 云南省烟草农业科学研究院
IPC分类号： C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11 , A01H1/04
摘要： 本发明涉及线粒体分子标记引物及用于早期鉴定烟草品种种子来源的应用，该分子标记的引物组为：如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所记述。该线粒体分子标记引物用于标记烟草保持系/不育系。(1)本发明提供的烟草细胞质雄性不育系sua‑CMS和gla‑CMS特异性分子标记，可以应用于sua型和gla型烟草细胞质雄性不育系的鉴定和分子标记辅助育种。(2)本发明提供的烟草细胞质雄性不育系sua‑CMS和gla‑CMS特异性分子标记，是一种共显性标记，其准确性比显性标记更高。(3)本发明提供的烟草细胞质雄性不育系sua‑CMS和gla‑CMS特异性分子标记应用方法，程序简单，结果稳定可靠，易于规模化应用。
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公开(公告)号：CN114032329A
公开(公告)日：2022-02-11
申请号：CN202111459848.7
申请日：2021-12-02
申请人： 云南省烟草农业科学研究院
IPC分类号： C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
摘要： 本发明涉及分子标记引物及用于早期鉴定烟草品种种子来源的应用，分子标记引物为trnH1/psbA1；trnH2/psbA2；trnH3/psbA3；trnH4/psbA4；所述的分子标记引物在用于早期鉴定烟草品种种子来源的应用。本发明有益效果为，使用这4对引物的任意一对均能实现对目前现有烟草常规种子和不育系种子的区分和鉴定，即完成对其的分子标记，从而实现了对烟草种子的严格管控。使用本发明的方法可以凭借肉眼进行区分，从而实现对不育系烟草种的鉴定。
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公开(公告)号：CN109234310B
公开(公告)日：2021-08-20
申请号：CN201811347308.8
申请日：2018-11-13
申请人： 云南省烟草农业科学研究院
摘要： 快速获得无转基因基因编辑植株的重组载体及使用方法，所述重组载体是在原始载体中插入含有PAP1和NtFT表达元件，该表达元件命名为PF Cas sete，其核苷酸序列如SEQ ID No.1；所述原始载体为含有sgRNA基因、Cas9基因和筛选标签基因的用于植物基因编辑的CRISPR/Cas9的载体；NtFT表达元件产生促进植物早花的蛋白，PAP1表达元件产生促进植物花青素生物合成的蛋白。本发明可以极大地缩短得到基因编辑突变后代的时间，并通过植株颜色对后代植株进行筛选，既保留了目的基因突变的后代，又确保了该突变后代中不含有转基因片段，同时可以显著提高基因编辑效率。本发明方法简单，快速、廉价和高效。
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公开(公告)号：CN111393516A
公开(公告)日：2020-07-10
申请号：CN202010284824.1
申请日：2020-04-13
申请人： 云南省烟草农业科学研究院
IPC分类号： C07K14/415 , C12N15/29 , C12N15/82 , A01H6/82
摘要： 一种烟草eIFiso4E-T突变体及在培育抗病毒病烟草中的应用。所述烟草eIFiso4E-T突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:2或者SEQ ID NO:3所示，与SEQ ID NO:1所示的野生型烟草eIFiso4E-T的氨基酸序列相比，所述烟草eIFiso4E-T突变体的氨基酸序列第76位由A突变为T或者第98位由G突变为D。将eIFiso4E-T突变体与抗马铃薯Y病毒的va位点或eifiso4e-tKO基因聚合，可获得烟草对PVY的持久抗性。本发明所述的eIFiso4E-T突变体对于培育持久抗PVY烟草具有重要意义。
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公开(公告)号：CN111118031A
公开(公告)日：2020-05-08
申请号：CN202010097920.5
申请日：2020-02-17
申请人： 云南省烟草农业科学研究院
发明人： 李文正 , 隋学艺 , 胡梦阳 , 王丙武 , 宋中邦 , 高玉龙 , 李梅云 , 赵璐 , 袁诚 , 张洪博 , 师君丽 , 李永平 , 孔光辉 , 曾建敏 , 邹聪明 , 刘勇 , 黄昌军 , 吴兴富
摘要： 本发明公开了烟草生物碱合成负向调控基因NtARF6及其克隆方法与应用，烟碱合成负向调控基因NtARF6核苷酸序列如SEQ ID：NO:1所示，编码的氨基酸序列如SEQ ID：NO:2所示。本发明还公开了烟碱合成负向调控基因NtARF6的克隆方法，具体步骤包括：A、确定NtARF6基因序列；B、提取烟草RNA，反转录得到第一链cDNA；C、根据NtARF6基因序列设计合成特异性引物，以cDNA作为模板，进行PCR扩增；D、回收和纯化PCR产物；E、构建了含NtARF6基因的过表达载体。将过表达载体通过农杆菌介导的转化在烟草中过表达，制备转基因植株。获得的转基因植株尼古丁含量平均下降36.2％；降烟碱含量平均下降50.5％；假木贼碱含量平均下降44.9％；新烟碱含量平均下降60.2％。说明烟草NtARF6基因在培育低烟草生物碱含量的烟草品种方面具有较大的应用前景。
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公开(公告)号：CN110499388A
公开(公告)日：2019-11-26
申请号：CN201910933715.5
申请日：2019-09-29
申请人： 云南省烟草农业科学研究院
IPC分类号： C12Q1/6895 , C12N15/11
摘要： 鉴别烟草抗斑萎病位点RTSW等位基因类型的共显性标记引物组、鉴别方法及其应用，所述引物组由引物1、引物2、引物3和引物4的四条单链DNA组成。本发明的共显性标记引物能够特异性的对烟草基因组DNA进行标记鉴定，检测烟草材料基因组DNA中RTSW的等位基因类型，不仅可以鉴定是否含有抗斑萎病位点RTSW，而且可以鉴别烟草抗斑萎病位点RTSW等位基因类型，可靠且使用方便，与以往的抗斑萎病标记相比，具有与目标基因RTSW紧密连锁、准确性高、成本低廉、检测效率高等优点，可大大提高抗烟草斑萎病基因RTSW品种的筛选效率，极大地缩短抗病烟草品种的育种周期，提高育种效率。
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公开(公告)号：CN106613136B
公开(公告)日：2019-11-12
申请号：CN201611005486.3
申请日：2016-11-16
申请人： 云南省烟草农业科学研究院
摘要： 本发明涉及一种抗番茄斑萎病毒烟草植株的筛选方法，属于植物保护技术领域。该方法包括本氏烟育苗、抗性鉴定烟苗准备、接种缓冲液的配制、本氏烟烟苗接种和抗病性鉴定五大步骤。本发明的原理是在进行烟草抗病性鉴定前，将田间采集的番茄斑萎病毒毒源在本氏烟上活化，采集本氏烟上的发病组织作为毒源进行抗病性鉴定。本发明可显著提高番茄斑萎病毒接种效率，实现大规模数量的烟草品种抗病性鉴定，有效提高抗病性鉴定效率，特别适合从数量庞大的种质资源中筛选抗病靶标品种；并且减少了不同操作人员间的人为误差，烟苗抗病性鉴定结果能够准确反映烟苗在田间的抗病能力。
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公开(公告)号：CN109517836A
公开(公告)日：2019-03-26
申请号：CN201710850508.4
申请日：2017-09-20
申请人： 云南省烟草农业科学研究院
摘要： 本发明实施例公开了短N导入片段在烟草中的应用及其筛选和估算方法，所述短N导入片段与Coker176类型烟草的N导入片段相比减少了N基因右端至少0.93Mb、优选至少1.56Mb的累赘基因组分，包含该短N导入片段的烟草植株高抗TMV，且无明显产量和质量劣势，并且在产量、落黄和烘烤等性状得到了最大程度的改善。本发明提供的估算包含短N导入片段的烟草植株中缺失的累赘基因组分数量的方法，能够快速准确地从多个短N导入片段的植株中筛选出N导入片段最短的植株，挑选一个N导入片段最短的植株进入育种程序，可显著减少育种工作量、提高育种效率。
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