公开(公告)号：CN119120530A

公开(公告)日：2024-12-13

申请号：CN202411099620.5

申请日：2024-08-12

Applicant: 江南大学

Inventor： 罗玮 ,  崔优明

IPC: C12N15/70 ,  C07K14/51 ,  C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C07K1/14 ,  C07K1/22 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种重组人骨形态发生蛋白在原核体系中的可溶性表达及纯化方法，将重组人骨形态发生蛋白(rhBMP)的基因序列拼接在His‑Linker‑GB1基因序列的3’末端，插入在原核表达体系表达载体中，并转入到原核感受态细胞中，以可溶的形式在胞内高表达，最后表达后的His‑Linker‑GB1‑BMP融合蛋白无需进行包涵体复性，通过一步金属螯合层析(吸附‑洗脱模式)即可获得高纯度融合蛋白，由于GB1标签分子量小，几乎不会对rhBMP的空间结构、生物活性产生影响，避免了传统大肠杆菌体系表达rhBMP形成包涵体、以无结构、无活性的包涵体形式表达，避免下游进行rhBMP蛋白复性的工序，操作简便，适合规模化放大，具有周期短、纯度高、工艺稳定等特点。