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    一种固定化酶催化生产左旋多巴的方法与应用
    2.
    发明公开
    一种固定化酶催化生产左旋多巴的方法与应用 无效

    公开(公告)号：CN110055290A

    公开(公告)日：2019-07-26

    申请号：CN201810907482.7

    申请日：2018-08-10

    申请人： 浙江工业大学 ,  浙江绿创生物科技有限公司

    发明人： 储消和 ,  吴黎诚 ,  生英涛 ,  陈万河 ,  程跃 ,  徐顺清 ,  沈建 ,  方明山 ,  余炜 ,  柳鹏福 ,  孙俊杰

    IPC分类号： C12P13/22 ,  C12N11/08

    摘要： 本发明涉及一种固定化酶催化生产左旋多巴的方法，其特征在于：(1)挑单菌落接种到含LB培养基的试管中，加氨苄青霉素(100mg/L)30-37℃，220rpm，培养12-16h，得到一级种子；(2)将所述一级种子接种到含发酵培养基的摇瓶中培养10-12h；(3)离心收菌，得到菌体，压榨破胞，加壳聚糖溶液絮凝，高速离心，获得上清酶液，加入固定化载体EP200，25℃搅拌混合12-24h，三足式离心收集固定化酶，用50mM的磷酸钾缓冲液(pH8.0)，多次洗涤，过滤，获得固定化酶；(4)固定化酶20g，加入底物溶液，搅匀，25℃，密封震荡反应；所述底物溶液包括14-16g/L的丙酮酸钠、10-12g/L的邻苯二酚、40-45g/L的氯化铵、2-5g/L的亚硫酸钠、1-3g/L的EDTA，调pH7.5-8.5。

    一种6-硫鸟嘌呤生产废水的处理方法
    3.
    发明授权
    一种6-硫鸟嘌呤生产废水的处理方法 有权

    公开(公告)号：CN108218077B

    公开(公告)日：2020-10-30

    申请号：CN201711497937.4

    申请日：2017-12-29

    申请人： 浙江工业大学 ,  浙江绿创生物科技有限公司

    发明人： 方明山 ,  余炜 ,  储消和 ,  陈万河 ,  程跃 ,  生英涛 ,  徐顺清 ,  沈建 ,  吴黎诚

    IPC分类号： C02F9/10 ,  C02F101/10 ,  C02F103/36

    摘要： 本发明属于工业废水的处理技术领域，具体涉及一种从6‑硫鸟嘌呤生产废水中去除硫离子并回收吡啶的方法：(1)对废水中吡啶和硫离子含量进行测定，在废水中加入双氧水氧化脱硫，双氧水的用量为硫离子摩尔数的2～8倍，进行反应，反应温度为10～60℃，反应结束后，再加固体氢氧化钠调pH至7～10，再进行蒸馏获得脱硫后的馏分；(2)根据脱硫后馏分的量，加入1～4倍体积的氢氧化钠溶液搅拌1‑1.5h，静置分层，上层料液再次精馏，收集115℃后的馏分，获得吡啶产品，本发明设计合理，工艺简单，工作环境毒害性小，硫化氢去除率高，吡啶回收率高，回收吡啶含量99％以上，水分不超过0.2％，达到了6‑硫鸟嘌呤生产原料吡啶的品质要求，也达到了工业标准。

    一种丙酮酸和左旋多巴联产工艺与应用
    4.
    发明授权
    一种丙酮酸和左旋多巴联产工艺与应用 有权

    公开(公告)号：CN110055292B

    公开(公告)日：2020-06-19

    申请号：CN201810907765.1

    申请日：2018-08-10

    申请人： 浙江工业大学 ,  浙江绿创生物科技有限公司

    发明人： 储消和 ,  林挺 ,  吴黎诚 ,  生英涛 ,  陈万河 ,  程跃 ,  徐顺清 ,  沈建 ,  方明山 ,  余炜 ,  柳鹏福 ,  孙俊杰

    IPC分类号： C12P13/22 ,  C12P7/40 ,  C12R1/88

    摘要： 本发明涉及一种丙酮酸和左旋多巴联产工艺与应用。采取如下的技术方案：(1)利用光滑球拟酵母发酵获得丙酮酸料液，料液经过陶瓷膜除菌，超滤膜除蛋白、核酸、色素等大分子；(2)根据丙酮酸的摩尔量向丙酮酸浓缩液加入一定量的邻苯二酚、醋酸铵、EDTA、亚硫酸钠等化合物，调pH7.0‑9.0，配制成酶催化底物溶液；(3)利用酪氨酸酚裂解酶基因工程菌发酵获得酪氨酸酚裂解酶菌液，离心收菌体，高压均质机破胞，离心，收集酶液；(4)酶液加入一定量的底物溶液，搅匀，25℃，密封震荡反应；所述底物溶液为丙酮酸浓缩液配制,通过流加底物溶液控制邻苯二酚的浓度0‑10g/L，产物达到120g/L以上，停止流加底物溶液，当反应液中邻苯二酚含量低于0.2g/L，停止反应。

    一种提高酪氨酸酚裂解酶催化生产左旋多巴效率的方法
    6.
    发明公开
    一种提高酪氨酸酚裂解酶催化生产左旋多巴效率的方法 审中-实审

    公开(公告)号：CN110055291A

    公开(公告)日：2019-07-26

    申请号：CN201810907732.7

    申请日：2018-08-10

    申请人： 浙江工业大学 ,  浙江绿创生物科技有限公司

    发明人： 储消和 ,  吴黎诚 ,  生英涛 ,  陈万河 ,  程跃 ,  徐顺清 ,  沈建 ,  方明山 ,  余炜 ,  柳鹏福 ,  孙俊杰

    IPC分类号： C12P13/22 ,  C12N9/88

    摘要： 本发明涉及一种提高酪氨酸酚裂解酶催化生产左旋多巴效率的方法，其特征在于：(1)挑单菌落接种到含LB培养基的试管中，加卡那霉素(50mg/L)30-37℃，220rpm，培养12-16h，得到一级种子；(2)将所述一级种子接种到含发酵培养基的摇瓶中培养10-12h；(3)离心收菌，得到菌体，超声破胞，高速离心，获得上清酶液；(4)酶液加入底物溶液，搅匀，25℃，密封震荡反应；所述底物溶液包括14-16g/L的丙酮酸钠、10-12g/L的邻苯二酚、50-60g/L的醋酸铵、2-5g/L的亚硫酸钠、1-3g/L的EDTA，调pH7.5-8.5，反应产物浓度达到20g/L以上，加入10-30g/L的左旋多巴晶体，诱导产品提前析晶。本发明大大提高了转化率和产物浓度，提高了产品品质，工艺简单，成本低廉，产率高，具有工业化生产的应用价值。

    一种提高左旋多巴产品品质和产率的方法
    7.
    发明公开
    一种提高左旋多巴产品品质和产率的方法 无效

    公开(公告)号：CN109161568A

    公开(公告)日：2019-01-08

    申请号：CN201810907414.0

    申请日：2018-08-10

    申请人： 浙江工业大学 ,  浙江绿创生物科技有限公司

    发明人： 储消和 ,  林挺 ,  吴黎诚 ,  生英涛 ,  陈万河 ,  程跃 ,  徐顺清 ,  沈建 ,  方明山 ,  余炜 ,  柳鹏福 ,  孙俊杰

    IPC分类号： C12P13/22

    摘要： 本发明涉及一种提高左旋多巴产品品质和产率的方法，包括：(1)发酵获取酪氨酸酚裂解酶；(2)配制底物溶液：(3)配制补料液：自来水煮沸后，通氮气并降温至10-25℃，先加入抗氧化剂加入2-5g/L的亚硫酸钠和0.5-2g/L的抗坏血酸，再加入100-160g/L的丙酮酸钠、100-160g/L的邻苯二酚、10-20g/L的醋酸铵、1-3g/L的EDTA，调pH7.5-8.5。(4)底物溶液始终保持通氮气，酶加入底物溶液后反应容器密封隔氧，通小量氮气保持正压，搅匀，16-25℃，密封震荡反应；流加补料溶液(补料容器密封，并始终通入小量氮气保持正压)，补料液流加完毕，邻苯二酚浓度低于0.05g/L，停止反应。本发明提高了产品品质，提高了邻苯二酚的转化率和产品收率，具有工业化生产的应用价值。

    一种用制备色谱分离纯化尼莫克汀的方法
    8.
    发明公开
    一种用制备色谱分离纯化尼莫克汀的方法 无效

    公开(公告)号：CN108117562A

    公开(公告)日：2018-06-05

    申请号：CN201711497956.7

    申请日：2017-12-29

    申请人： 浙江工业大学 ,  浙江绿创生物科技有限公司

    发明人： 生英涛 ,  方明山 ,  储消和 ,  余炜 ,  王鸿 ,  吴黎诚 ,  徐顺清 ,  沈建 ,  陈万河 ,  程跃

    IPC分类号： C07D493/22

    摘要： 本发明涉及一种制备色谱分离纯化尼莫克汀的方法，步骤如下(1)过滤：将尼莫克汀发酵液板框过滤，得到湿菌渣；(2)萃取：将湿菌渣中加入有机溶剂，过滤得到尼莫克汀提取液；(3)真空浓缩：将提取液浓缩至固含量35％-45％，加入非水溶性有机溶剂溶解；(4)静止分层：在室温环境静置，收集非水溶性有机溶剂层；(5)脱色：加入活性炭、无水硫酸钠进行脱色处理；(6)抽滤、真空浓缩：利用真空泵进行抽滤，将抽滤后的提取液放在真空度下进一步浓缩至固含量为30-40％；(7)溶解：将浓缩后的提取液于有机溶剂按比例混合，搅拌溶解；(8)制备色谱分离。本发明分离纯化尼莫克汀的方法操作简单，有机溶剂用量少，无环境污染，所得到的尼莫克汀纯度高。