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公开(公告)号：CN108753732B
公开(公告)日：2021-01-26
申请号：CN201810692094.1
申请日：2018-06-28
摘要： 本发明属于生物制备技术领域，特别涉及一种RXRα蛋白稳定低表达的RXRα基因敲除细胞系及其制备方法。所述细胞系为RXRα基因敲除细胞系，敲除的碱基数为非3的整数倍，细胞内RXRα蛋白表达明显下降且基因型稳定可传代，从而大大提升了RXRα蛋白低表达细胞系的稳定性，利于细胞系的稳定传代与持续培养。本发明提供了一种所述细胞系的制备方法，根据RXRα基因序列信息，设计CRISPR敲除gRNA序列，构建gRNA表达载体，体外细胞水平检测gRNA剪切活性。随后采用核转的方法，利用cas9及gRNA表达载体共转染人神经母细胞瘤的永生化细胞即SK‑N‑SH细胞，经G418药物筛选得到稳定细胞克隆，PCR及基因测序鉴定其为RXRα基因非3整数倍基因敲除的细胞克隆，得到RXRα蛋白稳定低表达的RXRα基因敲除细胞系。
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公开(公告)号：CN108753732A
公开(公告)日：2018-11-06
申请号：CN201810692094.1
申请日：2018-06-28
CPC分类号： C07K14/705 , C12N5/0693 , C12N15/907 , C12N2510/04
摘要： 本发明属于生物制备技术领域，特别涉及一种RXRα蛋白稳定低表达的RXRα基因敲除细胞系及其制备方法。所述细胞系为RXRα基因敲除细胞系，敲除的碱基数为非3的整数倍，细胞内RXRα蛋白表达明显下降且基因型稳定可传代，从而大大提升了RXRα蛋白低表达细胞系的稳定性，利于细胞系的稳定传代与持续培养。本发明提供了一种所述细胞系的制备方法，根据RXRα基因序列信息，设计CRISPR敲除gRNA序列，构建gRNA表达载体，体外细胞水平检测gRNA剪切活性。随后采用核转的方法，利用cas9及gRNA表达载体共转染人神经母细胞瘤的永生化细胞即SK‑N‑SH细胞，经G418药物筛选得到稳定细胞克隆，PCR及基因测序鉴定其为RXRα基因非3整数倍基因敲除的细胞克隆，得到RXRα蛋白稳定低表达的RXRα基因敲除细胞系。
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公开(公告)号：CN112697909A
公开(公告)日：2021-04-23
申请号：CN202011459710.2
申请日：2020-12-11
摘要： 本发明适用环境与食品检测技术领域，提供二噁英类化合物的检测方法，包括：在待测饮用水样品中加入提取内标，用二氯甲烷萃取；将所得浓缩萃取液加入到酸性硅胶层析柱，得第一浓缩洗脱液；将第一浓缩洗脱液加入到中性氧化铝层析柱，进而将所得第二浓缩洗脱液加入到活性炭层析柱，进而将所得第三浓缩洗脱液用二氯甲烷溶解，加入壬烷及PCDD/Fs回收率内标标准溶液，用同位素稀释技术结合高分辨气相色谱/高分辨双聚焦磁式质谱联用仪进行分析检测，确定二噁英类化合物的含量。本发明净化处理过程简单、所用溶剂和材料配制种类少、消耗溶剂量少、有毒有害试剂暴露低、耗时短及灵敏度高，满足对生活饮用水中二噁英类化合物的限量标准要求。
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公开(公告)号：CN108795983A
公开(公告)日：2018-11-13
申请号：CN201810692098.X
申请日：2018-06-28
CPC分类号： C12N15/85 , C07K14/70567 , C12N5/0693 , C12N2510/02 , C12N2510/04 , C12N2800/107
摘要： 本发明属于生物制备技术领域，特别涉及一种RXRα蛋白稳定高表达的RXRα基因稳定转染细胞系及其制备方法。所述细胞系为RXRα基因随机整合至SK‑N‑SH细胞染色体的细胞克隆，细胞系基因型稳定，可随细胞增殖稳定遗传，子代细胞内稳定高表达RXRα蛋白，大大提升了RXRα蛋白高表达的稳定性，以保证RXRα基因功能性和受试材料的可靠性。本发明提供了一种所述细胞系的制备方法，设计制备真核表达载体，经细胞核转染技术以真核表达载体转染SK‑N‑SH细胞，经G418药物筛选得到RXRα基因稳定转染成功的细胞克隆，PCR、基因测序鉴定其是否为RXRα基因稳定转染阳性的细胞克隆，采用Westernblot技术鉴定阳性克隆细胞内RXRα蛋白表达水平，从而得到基因型可稳定传代的RXRα蛋白稳定高表达细胞系。
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公开(公告)号：CN209689976U
公开(公告)日：2019-11-26
申请号：CN201920458099.8
申请日：2019-04-08
IPC分类号： G01N1/10 , C02F9/02 , C02F101/30 , C02F101/36
摘要： 本实用新型公开了一种用于有机物检测的富集装置，包括蠕动泵，用于传输液体；过滤器，其设置在所述蠕动泵一侧，用于过滤液体杂质；第一管体，其连接所述蠕动泵和所述过滤器；富集组件，其设置在所述过滤器一侧；第二管体，其连接所述富集组件和所述过滤器；富集水样经过蠕动泵导入到过滤器时，水分子穿过过滤膜，水中的颗粒等杂质被过滤膜留下来，汇集富集组件中，由富集组件中的填料可以实现水体中有机化合物的富集，填料的组成是PUF聚酯材料和XAD-2树脂，把水中的有机物吸附富集在PUF聚酯材料和XAD-2树脂，进而便于用户再把PUF聚酯材料和XAD-2树脂上的有机物提取出来，进行后续的分析。
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公开(公告)号：CN215197006U
公开(公告)日：2021-12-17
申请号：CN202120676685.7
申请日：2021-04-01
摘要： 本实用新型涉及一种可调流速滴定实验装置，包括实验架、滴液漏斗和玻璃管，所述实验架包括两个固定侧板、上层放置架和下层放置架，所述上层放置架上设有固定孔，用于固定滴液漏斗，所述下层放置架上也设有固定孔，用于固定玻璃管，所述滴液漏斗和玻璃管的位置上下相对应。可调流速滴定实验装置优势在于滴液漏斗和玻璃管是分离的，本申请人把玻璃管制作成为相应的层析柱，实验结束后，滴液漏斗可以反复使用，玻璃管价格低廉，无需清洗重复使用，可直接废弃，从而减少人力、物力投入，降低时间成本，利于实验开展，降低反复使用玻璃器皿造成的实验污染的可能性，尤其适合应用于如二噁英类化合物检测等多步骤的实验。
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