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公开(公告)号：CN115684056B
公开(公告)日：2024-09-20
申请号：CN202211421352.5
申请日：2022-11-14
申请人： 青岛科技大学
摘要： 本发明属于酶活力测定方法领域，针对现有的蛋白酶活力测定技术存在的灵敏度低，酶浓度曲线不过原点的问题，本发明提供一种蛋白酶活力的测定方法：配制酪蛋白溶液，取用酪蛋白溶液上清液为溶剂配制的不同浓度的色氨酸或牛血清白蛋白标准溶液，在碱性条件下加入新鲜配制的MBTH试剂，加入酸性铁试剂，进行显色反应，测定吸光度值，根据每组色氨酸或牛血清白蛋白浓度与测得的吸光度值之间的关系并绘制标准对应关系曲线；取用酪蛋白溶液，加入蛋白酶，进行酶解反应，并测定吸光度值，计算蛋白酶酶活力。与现有技术的紫外法和Lowrry法相比该方法更灵敏、更准确，显色产物更加稳定。
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公开(公告)号：CN111337529B
公开(公告)日：2023-06-16
申请号：CN202010169451.3
申请日：2020-03-12
申请人： 青岛科技大学
摘要： 本发明提供一种降低粘度、使水峰偏移的多糖样品制备和测试方法，包括以下步骤：(1)向干燥的多糖样品加入氘代试剂，混匀直至完全溶解；(2)将制备的多糖核磁样品置于核磁共振仪中，获得核磁共振图谱。本发明能够快速有效的检测出羟丙基甘露聚糖独立的糖单元异头碳质子峰、羟丙基甲基质子峰，进而计算出羟丙基甘露聚糖的取代度，同时本发明能够显著降低多种多糖样品的粘度，使水峰偏移到不干扰其它峰的程度，并且氘代盐酸的浓度与水峰的化学位移值呈线性关系，因此可以通过调节氘代盐酸浓度来定位水峰位置。本发明可实现常温下进行核磁共振检测，克服了现有技术中需要通过升高测定温度并进行反复的重水置换来改变HOD峰对其它峰的影响的缺陷。
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公开(公告)号：CN115747299A
公开(公告)日：2023-03-07
申请号：CN202211421354.4
申请日：2022-11-14
申请人： 青岛科技大学
IPC分类号： C12Q1/34
摘要： 本发明属于酶活力测定技术领域，针对现有的甘露聚糖酶活力测定技术存在的灵敏度低、不符合化学计量性、底物溶解性差、底物溶液粘度高、标准曲线截距偏离原点的问题，本发明提供一种甘露聚糖酶活力的测定方法，以甘露聚糖或羟丙基甘露聚糖为底物配制底物溶液，取用底物溶液为溶剂配制的不同浓度的甘露糖标准溶液，在碱性条件下加入新鲜配制的MBTH试剂，再加入酸性铁试剂，进行显色反应，测定吸光度值，根据每组甘露糖浓度与测得的吸光度值之间的关系绘制标准对应关系曲线；取用底物溶液，加入甘露聚糖酶，进行酶解反应，并测定吸光度值，计算甘露聚糖酶活力。与现有技术的MBTH法相比该方法更灵敏、更准确，显色产物更加稳定。
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公开(公告)号：CN109211957A
公开(公告)日：2019-01-15
申请号：CN201810987193.2
申请日：2018-08-28
申请人： 青岛科技大学
IPC分类号： G01N24/08
摘要： 本发明公开一种测定羟丙基壳聚糖N-取代度、总取代度和乙酰化度的方法，具体包括以下步骤：样品制备：a.干燥羟丙基壳聚糖样品；b.向干燥好的羟丙基壳聚糖样品中加入氘代试剂，直至将其完全溶解；样品测试：通过核磁共振仪获得羟丙基壳聚糖的核磁共振图谱；数据处理：从得到的核磁共振谱图中，首先进行波谱归属，然后进行各质子峰的面积积分与计算；得到羟丙基壳聚糖N-取代度、总取代度和乙酰化度的计算公式。本申请能检测出两个独立的H9-N质子峰和H9-O质子峰，通过H9-N质子峰可探知羟丙基壳聚糖分子中发生氨基的羟丙基化的糖单元的比例。相对于现有技术中的取代度的测定方法，本发明归属更为明确、细致，测定更为准确、多指标高效、简便、快速。
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公开(公告)号：CN115896234A
公开(公告)日：2023-04-04
申请号：CN202211421525.3
申请日：2022-11-14
申请人： 青岛科技大学
摘要： 本发明属于酶活力测定方法领域，针对现有的果胶酶活力测定技术存在的操作繁琐、灵敏度低以及现有的MBTH法用于测定果胶酶活力时存在显色产物溶液中有大量沉淀以及显色产物本底值过高的问题，本发明提供一种果胶酶活力的测定方法：对果胶进行透析冻干处理，以处理后的果胶为底物，用缓冲液配制底物溶液；分别以底物溶液为溶剂配制一系列浓度梯度的半乳糖醛酸标准溶液，在碱性条件下加入MBTH试剂，再加入硫酸铁铵试剂进行显色反应，测定吸光度值，绘制标准对应关系曲线；通过测定果胶在单位时间内通过果胶酶酶解产生的还原端基浓度的初速度来计算果胶酶的酶活力。本发明方法准确、可靠、重复性好、灵敏度高，可广泛用于果胶酶的高通量分析。
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公开(公告)号：CN115684056A
公开(公告)日：2023-02-03
申请号：CN202211421352.5
申请日：2022-11-14
申请人： 青岛科技大学
摘要： 本发明属于酶活力测定方法领域，针对现有的蛋白酶活力测定技术存在的灵敏度低，酶浓度曲线不过原点的问题，本发明提供一种蛋白酶活力的测定方法：配制酪蛋白溶液，取用酪蛋白溶液上清液为溶剂配制的不同浓度的色氨酸或牛血清白蛋白标准溶液，在碱性条件下加入新鲜配制的MBTH试剂，加入酸性铁试剂，进行显色反应，测定吸光度值，根据每组色氨酸或牛血清白蛋白浓度与测得的吸光度值之间的关系并绘制标准对应关系曲线；取用酪蛋白溶液，加入蛋白酶，进行酶解反应，并测定吸光度值，计算蛋白酶酶活力。与现有技术的紫外法和Lowrry法相比该方法更灵敏、更准确，显色产物更加稳定。
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公开(公告)号：CN109211957B
公开(公告)日：2021-05-18
申请号：CN201810987193.2
申请日：2018-08-28
申请人： 青岛科技大学
IPC分类号： G01N24/08
摘要： 本发明公开一种测定羟丙基壳聚糖N‑取代度、总取代度和乙酰化度的方法，具体包括以下步骤：样品制备：a.干燥羟丙基壳聚糖样品；b.向干燥好的羟丙基壳聚糖样品中加入氘代试剂，直至将其完全溶解；样品测试：通过核磁共振仪获得羟丙基壳聚糖的核磁共振图谱；数据处理：从得到的核磁共振谱图中，首先进行波谱归属，然后进行各质子峰的面积积分与计算；得到羟丙基壳聚糖N‑取代度、总取代度和乙酰化度的计算公式。本申请能检测出两个独立的H9‑N质子峰和H9‑O质子峰，通过H9‑N质子峰可探知羟丙基壳聚糖分子中发生氨基的羟丙基化的糖单元的比例。相对于现有技术中的取代度的测定方法，本发明归属更为明确、细致，测定更为准确、多指标高效、简便、快速。
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公开(公告)号：CN111337529A
公开(公告)日：2020-06-26
申请号：CN202010169451.3
申请日：2020-03-12
申请人： 青岛科技大学
摘要： 本发明提供一种降低粘度、使水峰偏移的多糖样品制备和测试方法，包括以下步骤：(1)向干燥的多糖样品加入氘代试剂，混匀直至完全溶解；(2)将制备的多糖核磁样品置于核磁共振仪中，获得核磁共振图谱。本发明能够快速有效的检测出羟丙基甘露聚糖独立的糖单元异头碳质子峰、羟丙基甲基质子峰，进而计算出羟丙基甘露聚糖的取代度，同时本发明能够显著降低多种多糖样品的粘度，使水峰偏移到不干扰其它峰的程度，并且氘代盐酸的浓度与水峰的化学位移值呈线性关系，因此可以通过调节氘代盐酸浓度来定位水峰位置。本发明可实现常温下进行核磁共振检测，克服了现有技术中需要通过升高测定温度并进行反复的重水置换来改变HOD峰对其它峰的影响的缺陷。
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