一种以棉花幼胚为受体接种TRV病毒诱导基因沉默方法

    公开(公告)号:CN105647966A

    公开(公告)日:2016-06-08

    申请号:CN201610157678.X

    申请日:2016-03-17

    IPC分类号: C12N15/83

    摘要: 本发明涉及一种以棉花幼胚为受体接种TRV病毒诱导内源基因沉默的方法,步骤如下:(1)将目的基因插入TRV病毒载体中,制备重组载体,然后转化农杆菌,制得转化后的农杆菌;(2)取棉花种子,经脱绒、灭菌后,经萌发后去除萌发种子的内、外皮,幼胚放入含有赤霉素的MS液体培养基中,制得待侵染胚;(3)培养转化后的农杆菌,制得农杆菌侵染液,制得侵染液,将待侵染胚浸入侵染液中,暗培养,经共培养后,栽种到灭菌的营养土中,进行营养土培养,即可。本发明首次以棉花幼胚作为受体接种TRV病毒,不对幼胚进行破坏性处理,不产生任何损伤,克服了接种病毒时对棉苗造成机械损伤的缺点。