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公开(公告)号：CN107177604A
公开(公告)日：2017-09-19
申请号：CN201710555305.2
申请日：2017-07-06
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/00
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一个影响烟草色素含量的NtWRKY69基因及其应用的专利申请。该基因包括918bp碱基，其碱基序列如SEQ ID NO.1所示；其中第80 ‑600位核苷酸是其特异性核心片段。本申请中，通过对烟草NtWRKY69基因的克隆、对应蛋白的分析，发明人发现该基因在烟草色素合成途径调控上具有重要的用途，与植物叶片中色素类物质含量高度相关。进一步通过病毒介导的基因沉默技术，发明人发现在将NtWRKY69基因沉默后，新的转基因植株中的色素类物质含量明显降低。利用这一特性，可为烟草的基因工程育种或其他植物新品种培育提供新的策略和路径。
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公开(公告)号：CN107058373A
公开(公告)日：2017-08-18
申请号：CN201710223178.6
申请日：2017-04-07
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC: C12N15/82
CPC classification number: C12N15/8207
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一个携带有烟草核酮糖‑1,5‑二磷酸羧化酶的小亚基基因的重组瞬时表达载体。本发明利用烟草NtRBSC1基因构建了一个瞬时表达载体NtRBSC1‑pFF19‑GFP，该载体转化烟草细胞后，可使荧光标记基因GFP与NtRBSC1的融合蛋白能够在烟草原生质体，进而通过激光共聚焦显微镜检测融合蛋白的位置而对NtRBSC1蛋白进行亚细胞定位，并对叶绿体的位置进行显示。总体而言，这种方式是一种简便而又准确的在活细胞中进行定位的方法，可为研究烟草细胞叶绿体及相关基因提供确切参考依据，便于烟草NtRBSC1基因的进一步研究及其功能的深入开发。
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公开(公告)号：CN103805576B
公开(公告)日：2017-04-19
申请号：CN201410062817.1
申请日：2014-02-24
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
Abstract: 本发明公开了一种烟草鲨烯环氧酶蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。烟草鲨烯环氧酶基因NtSE是烟草甾醇合成途径的关键调控基因。在幼嫩组织中特异高表达，将构建好的病毒介导的基因沉默载体TRV‑NtSE接种本氏烟草，并得到高沉默效率的植株，检测本氏烟草中植物甾醇的含量，发现基因沉默植株中甾醇含量显著下降，下降了21.37%，表明沉默该基因可以显著的降低植物的甾醇含量。烟草鲨烯环氧酶基因NtSE是烟草甾醇合成途径的关键调控基因，可用于调节烟草的甾醇含量，有助于低甾醇优质烟草的基因工程育种。
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公开(公告)号：CN106248836A
公开(公告)日：2016-12-21
申请号：CN201610877197.6
申请日：2016-09-30
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
CPC classification number: G01N30/02 , G01N30/14 , G01N30/72 , G01N2030/146
Abstract: 本发明提供了一种基于挥发性代谢物的烟草代谢组学中新鲜烟叶样品质量的判别方法，其特征在于：采用气相色谱串联质谱对新鲜烟叶样品中十五醛和维生素E含量进行相对定量分析，计算其比值，对代谢组学研究中的新鲜烟叶样品质量进行判别，本发明具有准确可靠，简单可行的优点，可为烟草代谢特征分析及相关烟草代谢组学研究提供借鉴。
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公开(公告)号：CN103919263B
公开(公告)日：2016-08-17
申请号：CN201410140978.8
申请日：2014-04-10
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
Abstract: 一种利用共晶点、共熔点判断烟叶样品冷冻干燥预冷温度的方法，其特征在于：是以冻干机为平台，通过差式扫描热量法（DSC）对不同时期的新鲜烟叶样品共晶点和共熔点进行测定，确定新鲜烟叶样品冷冻干燥合适的一次干燥温度和二次干燥温度。本发明的突出优点在于：围绕新鲜烟叶的真空冷冻干燥工艺，确定出节能高效的冷冻温度，为大批新鲜烟叶样品的冷冻干燥提供合适的工艺，从而达到节能高效的目的。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105352925A
公开(公告)日：2016-02-24
申请号：CN201510699659.5
申请日：2015-10-26
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC: G01N21/64
CPC classification number: G01N21/643 , G01N2021/6432
Abstract: 一种基于纳米蔟的铜离子检测方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：1）将标准铜离子溶液和金纳米簇进行混合，建立检测纳米簇的荧光信号淬灭和铜离子量之间的标准曲线；2）将样品溶液和金纳米簇进行混合，将检测纳米簇的荧光信号淬灭强度带入标准曲线，得到样品中铜离子的含量。所述金纳米簇的浓度为0.5 mM，PH值为7；金纳米簇是由GSH包裹修饰的。实验证明，该检测方法的灵敏度高，其他离子对铜离子检测干扰小，本发明可实现对铜离子的选择性检测，从而达到快速检测铜离子浓度的目的，在铜离子的检测中具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN103954710B
公开(公告)日：2016-01-20
申请号：CN201410221024.X
申请日：2014-05-23
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC: G01N30/06
Abstract: 一种LC-MS/MS检测烟草及烟草制品中特有亚硝胺的样品前处理方法，步骤如下：1）配制乙酸铵缓冲溶液；2）烟草及烟草制品的干燥、粉碎；3）粉碎好的样品加入乙酸铵缓冲溶液，超声提取；4）提取完的样品室温高速离心，得第一上清液；5）在第一上清液中加入乙酸乙酯进行萃取净化后，离心得第二上清液；6）取第二上清液经氮气吹干、去离子水复溶，制得待测样品；7）通过LC-MS/MS对待测样品中含有的烟草特有亚硝胺进行检测。本发明的优点在于：样品前处理方法简单易行，利用乙酸铵缓冲溶液将烟草特有亚硝胺溶出，并通过乙酸乙酯液液萃取进行净化，除去了蛋白质和干扰物质，得到除杂后的精制样液，使得样品检测具有较高精确度，且提取效率高，操作简便、省时，试剂消耗量小。
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公开(公告)号：CN104297380B
公开(公告)日：2015-12-30
申请号：CN201410613329.5
申请日：2014-11-05
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC: G01N30/02
Abstract: 本发明提供一种LC-MS/MS检测新鲜烟叶中IPP、GPP、FPP和GGPP的方法，包括以下步骤：1）配制提取溶剂；2）新鲜烟叶液氮速冻，冷冻干燥并打碎；3）粉碎好的样品加入提取溶剂，低温超声提取；4）冷冻离心，取上清液并过滤；5）LC-MS/MS对待测样品中IPP、GPP、FPP和GGPP进行检测。其优点在于：样品前处理方法简单，只需超声并过滤，与现有的方法相比，该方法灵敏度高，精密度好，加标回收率高，样品经过滤可直接进样分析，而现有文献中所述方法前处理繁琐费时，需要焦磷酸酶和碱性磷酸酶对样品进行生化反应处理。因此，本发明能有效地提高分析效率，适合复杂基质中超低含量目标物的分析。
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公开(公告)号：CN104152475A
公开(公告)日：2014-11-19
申请号：CN201410405714.0
申请日：2014-08-18
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
Abstract: 本发明公开了一种烟草ε-番茄红素环化酶基因，其碱基序列如SEQIDNO：1所示。本发明通过同源克隆的方式，从栽培烟草红花大金元体内克隆获得Ntε-LCY基因序列，并且进行了表达模式及亚细胞定位分析。利用烟草脆裂病毒（Tobaccorattlevirus，TRV）诱导基因沉默注射本氏烟草，结果表明ε-LCY的部分沉默可以提高烟叶中类胡萝卜素含量，并且增强烟株抵御光抑制的能力。该研究结果能够为利用基因工程技术培育优良品种提供理论依据和基因资源。
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公开(公告)号：CN103919263A
公开(公告)日：2014-07-16
申请号：CN201410140978.8
申请日：2014-04-10
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
Abstract: 一种利用共晶点、共熔点判断烟叶样品冷冻干燥预冷温度的方法，其特征在于：是以冻干机为平台，通过差式扫描热量法（DSC）对不同时期的新鲜烟叶样品共晶点和共熔点进行测定，确定新鲜烟叶样品冷冻干燥合适的一次干燥温度和二次干燥温度。本发明的突出优点在于：围绕新鲜烟叶的真空冷冻干燥工艺，确定出节能高效的冷冻温度，为大批新鲜烟叶样品的冷冻干燥提供合适的工艺，从而达到节能高效的目的。
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