一种提高烟叶提取物中还原酶酶活的提取方法

    公开(公告)号:CN109321540A

    公开(公告)日:2019-02-12

    申请号:CN201811345995.X

    申请日:2018-11-13

    IPC分类号: C12N9/06 C12N9/02

    摘要: 本申请属于烟草代谢物技术领域,具体涉及一种提高烟叶提取物中还原酶酶活的提取方法专利申请事宜。该方法针对新鲜烟叶中还原酶的提取,具体包括:制备提取液(采用裂解液RIPA、缓冲液NEB或PBS)、烟叶预处理、溶液法提取等步骤。初步测定结果表明,经过相关提取工艺参数优化后,提取液中GSR酶活得到了较好提高,可达2.3×10-3U/μg全蛋白,而NR酶活可达6.2×10-3U/μg全蛋白,达到了减少杂质蛋白干扰、提升GSR酶和NR酶含量的目的。同时由于相关提取方法简单快速、耗时较短(仅1.5 h左右),因此使得本申请具有较好的科研价值,可为GSR和NR活性分析及其它相关蛋白分析和研究奠定技术基础。

    用于鉴定烤烟秦烟96的引物组合及试剂盒、应用及鉴定方法

    公开(公告)号:CN107345252A

    公开(公告)日:2017-11-14

    申请号:CN201710557210.4

    申请日:2017-07-10

    IPC分类号: C12Q1/68 C12N15/11

    摘要: 本发明公开了一种用于鉴定烤烟秦烟96的引物组合及试剂盒、应用及鉴定方法,属于生物分子鉴别技术领域。本发明利用烟草420K高密度SNP芯片对近年来我国烟草主栽品种进行全基因组SNP分型,根据品种间多态性SNP位点筛选获得了一套适用于鉴定烤烟秦烟96的特异性SNP标记共12个,其物理位置基于栽培烟草品种红花大金元的全基因组序列比对确定,包含SNP位点的序列如SEQ ID NO:1~12所示。针对烤烟秦烟96的SNP位点侧翼序列,根据检测方法的不同设计相应引物,可用于烤烟秦烟96的品种鉴定。本发明基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术建立了一套烤烟秦烟96鉴定方法,检测周期短、通量高,结果准确。

    一种烟草根系土壤代谢物的GC-MS检测方法和应用

    公开(公告)号:CN117405797A

    公开(公告)日:2024-01-16

    申请号:CN202311514128.5

    申请日:2023-11-14

    IPC分类号: G01N30/02 G01N30/06 G01N30/86

    摘要: 本发明提供一种烟草根系土壤代谢物的GC‑MS检测方法和应用,涉及土壤代谢物检测技术领域。本发明提供的烟草根系土壤代谢物的GC‑MS检测方法包括以下步骤:1)将烟草根系土壤在提取剂中进行代谢物提取,离心后取上清液进行干燥得到干燥样品,所述提取剂为乙腈水溶液、异丙醇和乙腈的混合水溶液或正己烷和异丙醇组成的混合溶液;2)将干燥样品进行衍生化反应,得到待检测样品;3)对待检测样品进行GC‑MS检测,所述检测时使用的色谱柱为DB‑5MS色谱柱。通过选用包含乙腈或正己烷和异丙醇的提取剂进行超声提取,并采用DB‑5MS色谱柱进行色谱分析,提高初生代谢物的提取效率和分离效率,进而提高初生代谢物的检测准确性。