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公开(公告)号：CN118531046A
公开(公告)日：2024-08-23
申请号：CN202410604361.0
申请日：2024-05-15
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC分类号： C12N15/82 , C12N15/29 , C07K14/415 , A01H5/00 , A01H6/82
摘要： 本发明公开NtBCP基因在烟草西柏烷二萜类化合物合成和烟草种质资源改良中的应用，属于烟草基因工程技术领域。本发明通过实验证明，NtBCP基因在烟草腺毛柄细胞中特异表达，且与烟草中西柏烷二萜类化合物的代谢高度相关，所述NtBCP基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。进一步通过过表达技术，本发明发现将NtBCP基因在栽培烟草中过表达后，与正常对照植株相比，所得转基因烟草中西柏烷二萜类化合物明显增加。利用这一特性，可为烟草的基因工程育种或其他作物新品种培育提供新的策略和路径。
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公开(公告)号：CN116751787A
公开(公告)日：2023-09-15
申请号：CN202310482239.6
申请日：2023-04-29
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC分类号： C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/113 , C12N15/84 , A01H5/00 , A01H6/82
摘要： 本发明公开烟草烟碱代谢相关转录因子NtbHLH66及其编码基因、RNAi干扰载体和应用。本发明的烟草烟碱代谢相关转录因子编码基因NtbHLH66基因，其核苷酸序列为：(1)SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列；(2)SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列经取代和/或缺失和/或添加一个或多个核苷酸且表达相同功能蛋白的核苷酸序列。通过对烟草NtbHLH66基因的表达进行干扰，发现将NtbHLH66基因沉默后，与对照株系相比，NtbHLH66基因干扰株系苗期叶片中烟碱含量明显降低。本发明为降低烟草中烟碱含量提供新的策略和路径，在低烟碱烟草品种育种领域具有广阔的应用前景和巨大的经济效益潜力。
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公开(公告)号：CN116410285A
公开(公告)日：2023-07-11
申请号：CN202310477217.0
申请日：2023-04-28
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 本发明公开了一个烟草烟碱代谢相关转录因子基因NtbHLH68及其编码蛋白与应用。所述烟草转录因子NtbHLH68包含的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；其编码蛋白质包含的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。本申请通过对烟草NtbHLH68的RNAi干扰沉默，发现将NtbHLH68基因沉默后，和对照植株比，苗期干扰株系叶片中烟碱含量明显降低。利用这一特性，可为烟草低烟碱品种培育提供新的策略和路径。因此，烟草转录因子NtbHLH68具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN115327016A
公开(公告)日：2022-11-11
申请号：CN202211019720.3
申请日：2022-08-24
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 本申请属于植物生理学技术领域，具体涉及一种烟草原生质体中蛋白质组的提取和检测方法。该方法以烟草原生质体为提取对象，具体包括：制备烟草原生质体、细胞裂解、获得全蛋白、检测等步骤。本申请中，基于烟草蛋白质组研究需要，发明人对烟草蛋白质组提取方法和检测方法进行了优化，并结合相关非生物因素胁迫处理，对烟草蛋白质成分变化情况进行了初步研究。结果表明，本申请所提供的提取方法和检测方法，灵敏度较高，可有效支撑代谢蛋白质组研究应用，从而可为相关分子调节通路研究、基因功能研究奠定良好的技术基础，表现出较好的实用价值。
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公开(公告)号：CN112760405B
公开(公告)日：2022-07-26
申请号：CN202110158037.7
申请日：2021-02-04
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC分类号： C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12N15/29 , C12N15/11
摘要： 本发明涉及适用于盐胁迫条件下雪茄烟基因表达分析的内参基因及其应用。本发明通过geNorm、NormFinder和BestKeeper三个分析软件对RPL8、RPL14A、RPS16、UBC27、UBC28、UBC35、AC10、EIF2、PSAP和CPI十个候选内参基因在雪茄烟盐胁迫条件下的表达稳定性进行了分析。结果表明UBC28基因在雪茄烟不同条件盐处理组织中稳定表达，即UBC28基因能够作为qRT‑PCR的内参基因。本发明进一步提供了UBC28基因的qRT‑PCR引物，为雪茄烟盐胁迫条件下基因表达的精确定量分析奠定了基础。
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公开(公告)号：CN111019955B
公开(公告)日：2022-06-10
申请号：CN201911317415.0
申请日：2019-12-19
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 本发明属于烟草基因工程领域，具体涉及一个烟草新蛋白ZR‑1基因及其应用专利申请。该基因碱基序列如SEQ ID NO.1所示,烟草蛋白ZR‑1由139个氨基酸残基组成。该蛋白与植物叶片中谷氨酸含量相关，降低该蛋白表达后，叶片中谷氨酸含量明显降低。本发明通过对特定烟草蛋白ZR‑1的初步研究，发现其与烟草谷氨酸含量高度相关，在将该基因沉默后，烟草中谷氨酸含量发生了明显降低。基于这一特性，可为烟草新品种培育一定的应用基础和参考借鉴。
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公开(公告)号：CN110903371B
公开(公告)日：2022-06-07
申请号：CN201911317223.X
申请日：2019-12-19
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 本发明属于烟草基因工程领域，具体涉及烟草纤维二糖相关蛋白NtCRP1基因及其应用专利申请。该基因碱基序列如SEQ ID NO.1所示。烟草纤维二糖相关蛋白NtCRP1由185个氨基酸残基组成。该蛋白与植物叶片纤维二糖含量相关，降低该基因的表达后，叶片中纤维二糖含量显著升高。本发明通过对烟草纤维二糖相关蛋白NtCRP1的初步研究，发现其与烟草纤维二糖含量高度相关，在将该基因沉默后，烟草叶片中纤维二糖含量明显升高，基于这一特性，可为烟草新品种的培育提供应用基础和参考借鉴。
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公开(公告)号：CN107177604B
公开(公告)日：2020-11-03
申请号：CN201710555305.2
申请日：2017-07-06
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC分类号： C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/82
摘要： 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一个影响烟草色素含量的NtWRKY69基因及其应用的专利申请。该基因包括918bp碱基，其碱基序列如SEQ ID NO.1所示；其中第80‑600位核苷酸是其特异性核心片段。本申请中，通过对烟草NtWRKY69基因的克隆、对应蛋白的分析，发明人发现该基因在烟草色素合成途径调控上具有重要的用途，与植物叶片中色素类物质含量高度相关。进一步通过病毒介导的基因沉默技术，发明人发现在将NtWRKY69基因沉默后，新的转基因植株中的色素类物质含量明显降低。利用这一特性，可为烟草的基因工程育种或其他植物新品种培育提供新的策略和路径。
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公开(公告)号：CN109517828A
公开(公告)日：2019-03-26
申请号：CN201811391062.4
申请日：2018-11-21
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 本发明属于烟草基因工程技术领域，具体涉及一个烟草慢阴离子通道蛋白NtSLAH5及其应用专利申请。该基因CDS序列包括1821bp碱基，其碱基序列如SEQ ID NO.1所示；其中第1112位-1448位核苷酸为特异性核酸片段。烟草慢阴离子通道蛋白NtSLAH5是烟草氯离子代谢的关键蛋白，通过病毒诱导的基因沉默（VIGS）的技术，抑制NtSLAH5基因表达后，转基因沉默植株中氯离子含量明显降低。基于此，可为培育低氯含量烟草新品种奠定良好基础，同时也为烟叶质量的稳定和卷烟质量改善提供了根本性的技术支撑。
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公开(公告)号：CN109321540A
公开(公告)日：2019-02-12
申请号：CN201811345995.X
申请日：2018-11-13
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 本申请属于烟草代谢物技术领域，具体涉及一种提高烟叶提取物中还原酶酶活的提取方法专利申请事宜。该方法针对新鲜烟叶中还原酶的提取，具体包括：制备提取液（采用裂解液RIPA、缓冲液NEB或PBS）、烟叶预处理、溶液法提取等步骤。初步测定结果表明，经过相关提取工艺参数优化后，提取液中GSR酶活得到了较好提高，可达2.3×10-3U/μg全蛋白，而NR酶活可达6.2×10-3U/μg全蛋白，达到了减少杂质蛋白干扰、提升GSR酶和NR酶含量的目的。同时由于相关提取方法简单快速、耗时较短（仅1.5 h左右），因此使得本申请具有较好的科研价值，可为GSR和NR活性分析及其它相关蛋白分析和研究奠定技术基础。
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