转基因米粉标准样品、其建立方法及应用

    公开(公告)号:CN102690885A

    公开(公告)日:2012-09-26

    申请号:CN201210172207.8

    申请日:2012-05-30

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 本发明公开一种转基因米粉BT63的标准样品制备、其建立方法及其在检测转基因水稻BT63中的应用,分别以转基因水稻BT63为原料,将原料研磨、过筛、加水,搅拌、制备成冻干粉;再分装,0℃~4℃贮存;通过上述方法获得转基因米粉BT63的标准样品,也可以应用于转基因水稻BT63的Real-Time PCR检测试剂盒。这对全面深入的研究解决转基因成分检测标准样品的制备技术和稳定性保证技术,积极开展我国转基因产品检测标准样品的研制,添补该测量领域的空白,具有很重要的现实意义。

    乳酸杆菌检测试剂盒及分种检测方法

    公开(公告)号:CN101570781B

    公开(公告)日:2012-08-22

    申请号:CN200910010802.X

    申请日:2009-03-20

    IPC分类号: C12Q1/68 G01N30/02 C12R1/225

    摘要: 一种用于检测乳酸杆菌属细菌及分种鉴定的乳酸杆菌检测试剂盒及分种检测方法,该试剂盒包括浓度为5U/μL的Taq DNA聚合酶和PCR反应液;其中PCR反应液中含10mM Tris·HCl、50mM KCl、25mM MgCl2、dNTP各2.5mM及乳酸杆菌属通用检测引物对0.2mM。应用本发明的检测试剂盒及检测方法,可同时检测乳酸杆菌属细菌,并进行8种乳酸杆菌的分种检测。本试剂盒特异性强,灵敏度高,可以检测到乳酸杆菌150CFU/mL。使用本试剂盒可以实现乳酸杆菌属细菌的高通量检测,并解决同时快速检测鉴定乳酸杆菌属8种乳酸杆菌的问题。

    转基因小麦B72-8-11b的检测方法

    公开(公告)号:CN102344964A

    公开(公告)日:2012-02-08

    申请号:CN201110321461.5

    申请日:2011-10-20

    申请人: 曹际娟 徐君怡

    发明人: 曹际娟 徐君怡

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 一种转基因小麦B72-8-11b的检测方法,是通过PCR的方法检测序列为SEQ IDNO:11的基因组件,该基因组件中包括序列为SEQ ID NO:14的边缘序列。采用本发明的方法可以快速、灵敏地实现对转基因小麦B72-8-11b的品系鉴定,该方法特异性强,灵敏度高,快速准确。

    狮源性DNA的PCR检测引物、试剂盒及检测方法

    公开(公告)号:CN101845509A

    公开(公告)日:2010-09-29

    申请号:CN201010203018.3

    申请日:2010-06-12

    申请人: 徐君怡 曹际娟

    发明人: 徐君怡 曹际娟

    IPC分类号: C12Q1/68 G01N21/64 C12N15/11

    摘要: 狮源性DNA的PCR检测引物、试剂盒及检测方法,本发明分别建立了实时荧光PCR检测和普通PCR检测对狮源性DNA的检测引物、试剂盒以及检测方法。引物序列为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2;基于此,本发明公开了包含上述引物的狮源性DNA的实时荧光PCR检测试剂盒及相应检测方法和普通PCR检测试剂盒及相应检测方法。本发明的引物特异性强,检测试剂盒及方法简便易用,结果准确,具有很高的特异性和灵敏度。

    饲料中沙门氏菌和志贺氏菌检测试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN101624624A

    公开(公告)日:2010-01-13

    申请号:CN200910010791.5

    申请日:2009-03-20

    申请人: 曹际娟

    发明人: 曹际娟

    摘要: 饲料中沙门氏菌和志贺氏菌检测试剂盒及其检测方法,该试剂盒中包括一种检测溶液,该检测溶液中含10mM Tris·Cl、50mM KCl、25mM MgCl 2 、dNTP各2.5mM、Taq DNA聚合酶5U/μL及沙门氏菌和志贺氏菌引物对各10μM;使用本发明的检测试剂盒及检测方法,可以高灵敏度地检测饲料中沙门氏菌和志贺氏菌,并且检侧耗时短,操作简捷,可以节省大量的劳力和财力,适合快速检测的要求。

    实时荧光PCR检测牛羊源性成分探针序列及试剂盒

    公开(公告)号:CN1490609A

    公开(公告)日:2004-04-21

    申请号:CN02134954.1

    申请日:2002-10-15

    申请人: 曹际娟 覃文

    发明人: 曹际娟 覃文

    IPC分类号: G01N21/64 G01N33/52 C12Q1/04

    摘要: 本发明提供用于检测牛、羊源性成分的实时荧光PCR探针序列和试剂盒,给出检测牛、羊线粒体DNA基因的探针序列(包括最大、最小及优选序列),按探针序列生产制成的试剂盒,用于牛、羊源性成分的定性和定量检测。本发明采用的实时荧光PCR技术采用完全闭管检测,无需PCR后处理,避免了交叉污染和假阳性。该技术巧妙地运用了PCR技术的DNA高效扩增、核酸杂交的特异性和荧光检测技术的快速和敏感性,使得本方法具有操作简单、省时省力、结果可靠和准确灵敏等优点。

    长期保存牡蛎样品中脂溶性贝类毒素的检测方法

    公开(公告)号:CN107024547A

    公开(公告)日:2017-08-08

    申请号:CN201610077534.3

    申请日:2016-02-01

    IPC分类号: G01N30/02 G01N30/86

    摘要: 本发明公开长期保存牡蛎样品中脂溶性贝类毒素的检测方法,该方法包括如下步骤:(1)待测样品预处理;(2)提取样品游离脂肪酸;(3)游离脂肪酸三氟化硼甲酯化后气相色谱检测;(4)结果校正。本发明采用校正的三氟化硼甲酯化方法对留存牡蛎样品中脂溶性贝类毒素进行校正性检测的方法,提供了一种可以通过检测留存贝类样品中贝类毒素含量来获得原产样品中毒素准确含量的方法。通过有效校正,使即时的检测值准确反应留存样品原始真实的贝类毒素含量,可获得准确的数据信息以支持回溯性研究。

    用于耐四环素大肠杆菌检测的组合物

    公开(公告)号:CN104212902B

    公开(公告)日:2017-05-10

    申请号:CN201410453400.8

    申请日:2014-09-05

    IPC分类号: C12Q1/68 C12Q1/10 C12N15/11

    摘要: 本发明提供一种用于耐四环素大肠杆菌检测的组合物,包括引物对SEQ ID NO.1/2和引物对SEQ ID NO.3/4。并在此基础上进一步建立mPCR‑DHPLC/电泳检测试剂盒及方法,用以检测食品中携带四环素耐药基因tetA和/或tetB的大肠杆菌四环素耐药株。所建立的方法在一次检测中即可同时高特异性、高灵敏度地完成对样品中的耐四环素大肠杆菌tetA和tetB两种耐药基因的检测,进而确定待检样品是否被携带tetA和tetB耐药基因的四环素耐药性大肠杆菌所污染。此外,所述方法检测耗时短,操作简捷,并具有快速高通量等优点,可以节省大量的劳力和财力,适合快速检测的要求,满足了食品中微生物检测迅速准确的需求。

    转基因玉米BT176核酸标准样品及其制备方法

    公开(公告)号:CN105695595A

    公开(公告)日:2016-06-22

    申请号:CN201610163923.8

    申请日:2016-03-22

    IPC分类号: C12Q1/68 C12N15/63 C12N15/10

    CPC分类号: C12Q1/6895 C12Q2600/166

    摘要: 本发明属于生物技术领域,特别涉及一种转基因玉米BT176核酸标准样品及其制备方法。取成熟后的转基因玉米BT176品系作为原料,提取总DNA,进行特异性PCR扩增测序后,对质粒进行制备,所述转基因玉米BT176核酸标准样品包含转基因玉米BT176品系特异性基因和玉米内源zein基因。本发明方法制备出的核酸标准样品不再具有生物活性,在构建、扩增及分析鉴定的过程中,对实验室环境进行监控分析,不存在生物污染和传染的问题,解决分子生物学阳性对照来源问题,且样品稳定,无污染。本发明标准样品的制备完成,有助于全面深入的研究解决转基因成分检测分子DNA标准样品的制备技术和稳定性保证技术,积极开展我国转基因产品检测标准样品的研制,添补该测量领域的空白,具有重要的现实意义。

    四种菌的三重实时荧光PCR检测引物、探针、检测试剂盒和检测方法

    公开(公告)号:CN103060447B

    公开(公告)日:2016-02-17

    申请号:CN201210581310.8

    申请日:2012-12-27

    CPC分类号: Y02A50/451 Y02A50/59

    摘要: 本发明公开了一种猪霍乱沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌、伤寒沙门氏菌及鸡伤寒沙门氏菌三重实时荧光PCR检测引物、探针、检测试剂盒和检测方法。本发明利用三重实时荧光PCR方法,将猪霍乱沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌共有序列用于检测猪霍乱沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌,伤寒沙门氏菌的特异序列用于检测伤寒沙门氏菌,鸡伤寒沙门氏菌的特异序列用于检测鸡伤寒沙门氏菌,通过一次实时荧光PCR扩增来判断样品中是否受到猪霍乱沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌、伤寒沙门氏菌及鸡伤寒沙门氏菌的污染,再通过单一荧光PCR扩增区分猪霍乱沙门氏菌和丙型副伤寒沙门氏菌,检测快速,可在31h完成从制备样品到出具检测结果的过程,结果可靠,且灵敏度高、特异性强。