一种串联羊源大肠杆菌毒力基因融合蛋白的制备和应用

    公开(公告)号:CN116554346A

    公开(公告)日:2023-08-08

    申请号:CN202310327957.6

    申请日:2023-03-28

    摘要: 本发明属于基因工程领域,提供了一种串联羊源大肠杆菌毒力基因融合蛋白的制备和应用,采用预测工具根据分析出的亲水性、疏水性、可塑性、表面活性等指标,成功预测了五种毒力基因的抗原表位,并通过基因工程技术对预测的这五种抗原基因融合并进行串联表达,制备了融合蛋白抗原;同时,将串联羊源大肠杆菌五种毒力基因的融合蛋白制作成亚单位疫苗,取得了良好的免疫保护效果。本发明成功构建了重组羊源大肠杆菌毒力基因原核表达质粒pET28a‑S12345,实现了羊源大肠杆菌在大肠杆菌原核系统上的串联表达,表达产物能够获得较好的免疫保护效果。

    促进tshs、yncE基因胞外表达的质粒及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN113736811B

    公开(公告)日:2023-07-18

    申请号:CN202110911262.3

    申请日:2021-08-10

    摘要: 本发明公开了一种促进tshs、yncE基因胞外表达的质粒及其构建方法和应用,该质粒DNA序列中包括温度敏感血凝素tsh基因、胞膜脂蛋白bor基因和囊泡蛋白yncE基因,其中,tsh基因由温度敏感血凝素转运蛋白tshβ基因和温度敏感血凝素效应蛋白tshs基因组成。该质粒的构建包括目的基因的克隆、yncE基因连接pETDuet‑1质粒、tsh基因和bor基因连接pETDuet‑1质粒及yncE2基因连接pETDuet‑1/tsh/bor质粒等步骤。本发明将上述质粒转化入表达菌株细胞,使目的蛋白共表达,用于制备基因工程菌疫苗的引物特异性强、灵敏度高。本发明的方法能够促进tshs、yncE基因胞外表达高效表达有活性蛋白,所制得疫苗防治效果突出。