一种微波辅助预处理玉米秸秆的方法

    公开(公告)号:CN104561130A

    公开(公告)日:2015-04-29

    申请号:CN201510020718.1

    申请日:2015-01-16

    申请人: 天津大学

    IPC分类号: C12P7/10 C12P19/02

    CPC分类号: Y02E50/16 C12P7/10

    摘要: 本发明将玉米秸秆与乙二胺溶液混合,在密闭条件下,依次经过微波处理和热处理,得到预处理的玉米秸秆。该方法应用微波辅助乙二胺溶液对玉米秸秆进行预处理,能够有效降解木质素,降低纤维素结晶度,提高玉米秸秆中纤维素和半纤维素的酶解效率。本发明操作简单,无需采用高压设备,对设备要求低,能耗低,适合工业化生产。

    一种标准化、高精度、通用的功能模块构建方法

    公开(公告)号:CN104419716A

    公开(公告)日:2015-03-18

    申请号:CN201310377238.1

    申请日:2013-08-27

    申请人: 天津大学

    IPC分类号: C12N15/66 C12N15/63 C12N1/19

    摘要: 本发明公开了一种标准化、高精度、通用的功能模块构建方法,包括如下步骤:(1)将源基因添加标准化位点形成基因元件,将基因元件连入质粒pLD-Blunt中形成带有基因元件的质粒,进行序列验证;(2)从带有基因元件的质粒中调取基因元件,连入模块工具质粒中的如下缺口:终止子1-启动子-AATG-缺口-TAAA-终止子2;构建出不同的功能模块的质粒;(3)从不同的功能模块的质粒中调取不同的功能模块,与经过酶切的酵母质粒载体共转化酿酒酵母,构建出标准化、高精度、通用的功能模块,存放于质粒中;本发明具有通用性、标准化、高精度、自由选择性。

    多片段DNA的酵母快速组装方法

    公开(公告)号:CN104419701A

    公开(公告)日:2015-03-18

    申请号:CN201310389392.0

    申请日:2013-08-29

    申请人: 天津大学

    摘要: 本发明公开了一种多片段DNA的酵母快速组装方法,包括以下步骤:(1)将多个含有同源臂的DNA分子与线性化的酵母穿梭载体共转化酵母;(2)将整个筛选培养板上的全部转化后的酵母菌落洗脱下来,离心,弃上清,得到转化后的酵母菌细胞;(3)提取步骤(2)获得的酵母菌细胞的质粒DNA,转化大肠杆菌感受态细胞;(4)筛选大肠杆菌克隆,得到大片段DNA。本发明的方法组装大片段DNA分子的速度快、简便可行、成功率高、成本低,效率高、易操作,可将多个小片段DNA分子组装成一个大片段DNA分子,有利于进行工业化规模扩大,用途广泛。

    一种针对合成基因定点突变修复的方法

    公开(公告)号:CN104109665A

    公开(公告)日:2014-10-22

    申请号:CN201310141220.1

    申请日:2013-04-22

    申请人: 天津大学

    IPC分类号: C12N15/11 C12N15/10

    摘要: 本发明公开了一种针对合成基因定点突变修复的方法,包括以下步骤:(1)根据基因定点突变的碱基位置设计包含修复位点的正、反向引物;(2)以含有突变基因的质粒为模板,加入正、反向引物,在高保真DNA聚合酶的作用下进行环状延伸PCR;(3)采用DpnI酶将琼脂糖凝胶电泳检测正确的步骤(2)产物进行酶切,去除质粒模板得到具有修复位点的带有缺刻的开环质粒;转化大肠杆菌感受态细胞,挑选转化子测序验证。本发明的方法正向引物、反向引物设计简便,扩增效率高;引物与模板的结合效率高,目的条带易得;修复成功率高。不需胶回收、无需连接与筛选,是一种简便可行、成功率高、节约时间、降低成本的针对合成基因定点突变修复的方法。

    一种同步糖化共发酵生产乙醇的方法

    公开(公告)号:CN104073525A

    公开(公告)日:2014-10-01

    申请号:CN201410317183.X

    申请日:2014-07-04

    申请人: 天津大学

    IPC分类号: C12P7/10 C12P19/14 C12R1/865

    CPC分类号: Y02E50/16

    摘要: 本发明公开了一种同步糖化共发酵生产乙醇的方法,包括如下步骤:(1)将秸秆浸于氨水中进行预处理,得到固液混合物,分离,得到预处理后的固体,干燥;(2)将干燥固体、纤维素水解酶和水混合,调节pH,酶解,从酶解开始,补加干燥固体和纤维素水解酶;(3)向步骤(2)获得的混合液接种酿酒酵母,发酵,从发酵开始,补加干燥固体、纤维素水解酶和酿酒酵母,得到富含乙醇的发酵液体;所述酿酒酵母的保藏编号为CGMCC No.6634。本发明的方法可以在进行高固含量同步糖化共发酵时有效解决混合不均等问题。菌株的流加可以降低高固含量发酵时抑制物的浓度,改善菌株的活性,使乙醇产量提高。