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公开(公告)号：CN118853598A
公开(公告)日：2024-10-29
申请号：CN202411025247.9
申请日：2024-07-29
申请人： 天津大学
摘要： 本发明涉及生物技术领域，尤其涉及消除噬藻体A‑4L对大肠杆菌毒性的方法。本发明借助于基因工程手段，找到并通过点突变的方式消除了噬藻体A‑4L对大肠杆菌存在毒性的基因片段，突变后的基因片段转化大肠杆菌后可在大肠杆菌中稳定存在，并且所述突变可借助突变tRNA手段实现复原，为对噬藻体基因组的组装、基因组单基因功能研究、基因网络相互作用提供了指导和便利。
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公开(公告)号：CN104419701B
公开(公告)日：2019-01-11
申请号：CN201310389392.0
申请日：2013-08-29
申请人： 天津大学
摘要： 本发明公开了一种多片段DNA的酵母快速组装方法，包括以下步骤：（1）将多个含有同源臂的DNA分子与线性化的酵母穿梭载体共转化酵母；（2）将整个筛选培养板上的全部转化后的酵母菌落洗脱下来，离心，弃上清，得到转化后的酵母菌细胞；（3）提取步骤（2）获得的酵母菌细胞的质粒DNA，转化大肠杆菌感受态细胞；（4）筛选大肠杆菌克隆，得到大片段DNA。本发明的方法组装大片段DNA分子的速度快、简便可行、成功率高、成本低，效率高、易操作，可将多个小片段DNA分子组装成一个大片段DNA分子，有利于进行工业化规模扩大，用途广泛。
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公开(公告)号：CN118895292A
公开(公告)日：2024-11-05
申请号：CN202411074513.7
申请日：2024-08-06
申请人： 天津大学合成生物前沿研究院
IPC分类号： C12N15/81 , C12N15/113 , C12N9/22 , C12N15/31 , C12R1/865
摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及控制基因翻译表达的方法。本发明在酿酒酵母中使用CRISPR‑Cas9系统在基因的特定位置引入终止密码子UAA、UAG或UGA，以此阻断基因的翻译过程；随后通过Anticodon edited‑tRNA(ACE‑tRNA，反密码子经编辑的tRNA)成功识别基因中插入的终止密码子，重启基因的翻译过程。通过上述方案，我们可以利用CRISPR‑Cas9系统与ACE‑tRNA实现酿酒酵母中基因的控制表达。
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公开(公告)号：CN116716294A
公开(公告)日：2023-09-08
申请号：CN202211444439.4
申请日：2022-11-18
申请人： 天津大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/81 , C12N15/65 , C12N1/19 , C12R1/865
摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及酵母识别TAG的变体tRNA的构建及应用。本发明在酿酒酵母中成功构建了可以识别TAG终止密码子的变体tRNA，含有变体tRNA的菌株可以成功识别代谢途径中内插的TAG终止密码子，从而使得改造后的代谢途径可以人为的控制表达，起到防止人工改造的代谢途径泄露的目的。
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公开(公告)号：CN105779319B
公开(公告)日：2019-04-16
申请号：CN201610171076.X
申请日：2016-03-23
申请人： 天津大学
摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，公开了一种重组酵母菌株及其构建方法和应用。所述重组酵母菌株包含经酵母同源重组整合到基因组上的2个特定基因片段。本发明通过选择特定的组成型启动子组合，搭配红发夫酵母来源的八氢番茄红素合成酶和番茄红素环化酶双功能酶基因CrtYB、GGPP合酶CrtE、八氢番茄红素去饱和酶CrtI，以及特定的酵母内源基因等，经模块化设计整合至酵母菌株基因组上并同源重组敲除ypl062w基因，获得一株全新的无需诱导剂的重组菌株并保证了β‑胡萝卜素的高产。
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公开(公告)号：CN108913613A
公开(公告)日：2018-11-30
申请号：CN201810764818.9
申请日：2018-07-12
申请人： 天津大学
摘要： 本发明涉及合成生物学领域，特别涉及全基因组加倍及其应用、全基因组加倍的菌株及其在提高微生物次级代谢产物的产量中的应用。本申请人基于LoxPsym位点特异性重组的合成型基因组重排系统(SCRaMbLE)在单倍体合成型酿酒酵母中进行基因组重排发现全基因组加倍对脱氧紫色杆菌素前体产量的增加有影响。并且通过定量PCR及构建基因组中相关基因加倍的菌株验证了全基因组加倍与脱氧紫色杆菌素前体生产相关。因此本发明提供了全基因组加倍及其应用、全基因组加倍的菌株及其在提高微生物次级代谢产物的产量中的应用。
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公开(公告)号：CN105779319A
公开(公告)日：2016-07-20
申请号：CN201610171076.X
申请日：2016-03-23
申请人： 天津大学
CPC分类号： C12N9/1085 , C07K14/39 , C12N9/0006 , C12N9/001 , C12N9/90 , C12P23/00 , C12Y101/01034 , C12Y103/05005 , C12Y205/0101 , C12Y205/01029 , C12Y205/01032 , C12Y505/01
摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，公开了一种重组酵母菌株及其构建方法和应用。所述重组酵母菌株包含经酵母同源重组整合到基因组上的2个特定基因片段。本发明通过选择特定的组成型启动子组合，搭配红发夫酵母来源的八氢番茄红素合成酶和番茄红素环化酶双功能酶基因CrtYB、GGPP合酶CrtE、八氢番茄红素去饱和酶CrtI，以及特定的酵母内源基因等，经模块化设计整合至酵母菌株基因组上并同源重组敲除ypl062w基因，获得一株全新的无需诱导剂的重组菌株并保证了β?胡萝卜素的高产。
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公开(公告)号：CN118726345A
公开(公告)日：2024-10-01
申请号：CN202410646305.3
申请日：2024-05-23
申请人： 天津大学合成生物前沿研究院
摘要： 本发明涉及生物技术领域，具体涉及tRNA变体及其应用。本发明在酿酒酵母中成功构建了可以识别TGA终止密码子的变体tRNA，含有变体tRNA的菌株可以成功识别代谢途径中内插的TGA终止密码子，从而使得改造后的代谢途径可以人为的控制表达，起到防止人工改造的代谢途径泄露的目的。
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公开(公告)号：CN118064561A
公开(公告)日：2024-05-24
申请号：CN202410407400.8
申请日：2024-04-03
申请人： 天津大学合成生物前沿研究院
IPC分类号： C12Q1/686
摘要： 本发明涉及合成生物学领域，特别涉及合成基因的组合物、试剂盒及方法。本发明提供的基于自动化辅助条件下的寡核苷酸池到长片段组装的方法，选择寡核苷酸池作为组装起点，避免了传统化学合成法通量小，成本高的缺点，同时能够实现大规模批量化操作，与自动化组装相适配。在自动化构建中减少了大量的人工成本，可以连续不断地工作，减少人为误差，加快合成过程。自动化设备能够精确控制反应条件，从而提高合成的准确性，实现大规模高效保真合成。该方法不仅能够提高合成效率，降低成本，还能够提升合成产品的质量和一致性，从而满足当下合成生物学和高通量基因合成等领域的高要求。
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