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公开(公告)号:CN110468143B
公开(公告)日:2021-06-15
申请号:CN201910866484.0
申请日:2019-09-12
申请人: 中国农业科学院饲料研究所
摘要: 本发明提供抗菌肽NZX的制备方法及应用。本发明通过优化抗菌肽NZX基因序列,首次实现了抗菌肽NZX在毕赤酵母中的高效表达,产量突破克级水平,克服了大规模生产中产量过低或化学合成成本过高的问题,并建立完善的纯化体系,可实现规模化生产。此外,抗菌实验结果表明,本发明的抗菌肽NZX对革兰氏阳性菌,具有显著抑菌活性,同时具有低细胞毒性、低溶血性的特点,可应用于抗菌药物开发,饲料添加剂开发等领域,具有广阔的应用价值和市场前景。
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公开(公告)号:CN111298100A
公开(公告)日:2020-06-19
申请号:CN202010225505.3
申请日:2020-03-26
申请人: 中国农业科学院饲料研究所
摘要: 本发明提供抗菌肽NZ2114在制备无乳链球菌抗菌药物中的应用。本发明首次发现抗菌肽NZ2114对无乳链球菌及其生物膜具有抑制作用。实验表明,NZ2114对无乳链球菌具有高效、快速杀菌作用。同时,NZ2114对生物膜具有高效的抑制和消除作用,低浓度的NZ2114即可抑制无乳链球菌的初级生物膜,消除无乳链球菌的成熟生物膜。另外,抗菌肽NZ2114对无乳链球菌生物膜内细菌及其持留细菌也具有高效抑制活性,且抑制作用显著高于万古霉素。此外,对耐万古霉素的生物膜内持留菌具有显著杀灭作用。因此NZ2114具有开发成为治疗由无乳链球菌引起的奶牛乳房炎新型制剂的潜力。
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公开(公告)号:CN111018960A
公开(公告)日:2020-04-17
申请号:CN201911224704.6
申请日:2019-12-04
申请人: 中国农业科学院饲料研究所
IPC分类号: C07K14/435 , C12N15/12 , C12N15/81 , C12N1/19 , C12P21/02 , A61K38/17 , A61P31/04 , C12R1/84
摘要: 本发明提供一种抗菌肽ID13(序列如SEQ ID No.1所示)及其制备方法和应用。利用基因工程技术,实现ID3在毕赤酵母中的重组表达。本发明的抗菌肽ID13对金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、猪链球菌等革兰氏阳性菌具有很好的杀菌活性并对小鼠红细胞的溶血活性以及对鼠源巨噬细胞的细胞毒性很低。
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公开(公告)号:CN108815141A
公开(公告)日:2018-11-16
申请号:CN201810971804.4
申请日:2018-08-24
申请人: 中国农业科学院饲料研究所
摘要: 本发明提供一种抗菌肽膜剂及其制备方法与应用。所述膜剂由活性物质、乙二胺四乙酸、成膜材料、促渗剂、保湿剂和溶剂组成。本发明提供的抗菌肽膜剂,能够使其中主要活性成分抗菌肽NZ2114保持较高活性,使用时能快速成膜,具有透气性好、阻菌性好、组织渗透性好等特点,对患处不仅起到直接的保护作用,又可渗入伤口杀灭深层细菌以防止伤口进一步感染;该涂膜剂中含有保湿成分,其随时间推移持续下降的透气性有利于创伤初期高渗出组织液的排出,以及后期可以避免低渗出液的排出所造成的创面过度干燥,起到较好的保湿作用,对创伤、烧伤或感染创有很好的促进愈合作用。可用于外伤医疗用品。
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公开(公告)号:CN107523551A
公开(公告)日:2017-12-29
申请号:CN201610438557.2
申请日:2016-06-20
申请人: 中国农业科学院饲料研究所
IPC分类号: C12N5/20 , C07K16/12 , C12N15/13 , C07K14/245
摘要: 本发明涉及一种抗大肠杆菌细胞株及重组单链抗体及其制备方法。合成大肠杆菌OmpA蛋白抗原表位,免疫小鼠制备单克隆抗体产生该单克隆抗体的细胞株C208。提取C208细胞株RNA,反转录为cDNA,利用PCR分别扩增其抗体重链可变区(VH)及轻链可变区(VL)DNA,用(Gly4-Ser)3linker连接VH和VL,转入毕赤酵母体内,利用甲醇进行诱导表达。ELISA方法检测结果证明,所获得的抗大肠杆菌的基因工程单链抗体能与大肠杆菌特异结合。
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公开(公告)号:CN106146629A
公开(公告)日:2016-11-23
申请号:CN201510187387.0
申请日:2015-04-21
申请人: 中国农业科学院饲料研究所
摘要: 本发明提供了一组具有胰蛋白酶抗性的抗菌肽及其制备办法。利用蛋白质定向改造技术,针对NZ2114序列中存在的六处胰蛋白酶活性位点进行有选择突变。设计氨基酸序列为SEQ ID NO:1-SEQ ID NO:33的胰蛋白酶抗性突变体并实现其在毕赤酵母中的重组表达。本发明首次实现NZ2114抗胰蛋白酶衍生物的设计,经测定部分突变体(尤其是双突变体和全部三突变体)胰蛋白酶降解率显著改善,为16.67%-25%。胰蛋白酶抗性抗菌肽对金黄色葡萄球菌ATCC25923,ATCC43300和ATCC6538具有显著抑菌活性,MIC介于0.25-16μg/ml。本发明所述方法获得的胰蛋白酶抗性抗菌肽可应用于抗菌药物、食品添加剂、化妆品、饲料添加剂等领域,具有广阔的应用价值和市场前景。
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公开(公告)号:CN102409082B
公开(公告)日:2015-05-20
申请号:CN201010286899.X
申请日:2010-09-20
申请人: 中国农业科学院饲料研究所
摘要: 本发明公开了一种转基因作物检测中必要的标准质粒分子及其构建方法。一种转基因大豆检测用标准质粒分子及其构建方法,所述标准质粒分子包含大豆内源基因Lectin特异性片段、35S启动子和NOS终止子特异性片段、转基因大豆品系A2704-12中外源基因PAT特异性片段、转基因大豆GTS40-3-2品系中外源基因EPSPS特异性片段。通过分析这五个基因的特异性序列,设计了特异性PCR引物扩增获得了五个目的基因片段。通过融合PCR方法将这五个基因融合成一个长片段,克隆到质粒载体pMDTM19-T Simple上得到重组质粒分子pTLE5。本发明中构建的标准质粒分子完全可以代替阳性标准品,该标准质粒分子完全适用于对转基因大豆品系GTS40-3-2和转基因大豆品系A2704-12的筛选、结构基因特异性的定性和定量PCR分析和检测。如有新的转基因材料出现,可在原标准分子的基础上加入新的外源基因片段,满足日益增多的转基因作物材料的检测需要。
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公开(公告)号:CN103773686A
公开(公告)日:2014-05-07
申请号:CN201210404632.5
申请日:2012-10-23
申请人: 中国农业科学院饲料研究所
摘要: 本发明涉及一种饲用酵母自溶物的制备方法,属于农业生物技术领域。原始出发菌株产朊假丝酵母(Candida?utilis?CGMCC2.1180)1株经马铃薯葡萄糖琼脂斜面活化,接种在酵母浸出粉胨葡萄糖液体培养基中,30℃,200-250rpm,培养12-16h,作为种子液;在液体扩大酵母浸出粉胨葡萄糖液体培养基中,以10%的接种量接种种子液,30℃,800rpm,培养12h,离心收集菌体,加入无菌水,无菌水与菌体混合比例为5∶1,然后加入辛酸,终浓度为2‰,50℃,6h,100rpm,酵母自溶率达61.5%。本发明的酵母自溶物的制备方法具有安全、高效、低成本的特点。
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公开(公告)号:CN103652320A
公开(公告)日:2014-03-26
申请号:CN201210342459.0
申请日:2012-09-17
申请人: 中国农业科学院饲料研究所
摘要: 本发明涉及一种饲用防腹泻酵母的高密度发酵及其保护冻干的活菌制剂的制备方法,属于农业生物技术领域。原始出发菌株布拉酵母(Saccharomyces boulardii,ATCC MYA-796)1株经过活化,接种到酵母浸出粉胨葡萄糖液体培养基中,30℃,200-250rpm,培养12-16h,作为种子液;在液体扩大酵母浸出粉胨葡萄糖液体培养基中,以10%的接种量接种种子液,30℃,800rpm,培养12h,然后流加25%葡萄糖6h,流加量为20ml/h/L发酵液;离心收集菌体加入保护剂(8%甘油,7.5%脱脂奶粉,7.5%海藻糖和0.9%氯化钠),保护剂与菌体混合比例为2∶1,混匀后静置平衡1h;-80℃预冷12h,然后置于真空冷冻干燥机中冻干菌体,称取冻干菌粉进行活菌计数,其活菌计数达1.4×1010CFU/g。
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公开(公告)号:CN117069865A
公开(公告)日:2023-11-17
申请号:CN202311319699.3
申请日:2023-10-12
申请人: 中国农业科学院饲料研究所
摘要: 本发明公开了一种基于T细胞抗原表位猫过敏原蛋白嵌合肽cFel d 1的原核表达及其卵黄抗体的制备。本发明提供了一种嵌合肽cFel d 1,其包括猫过敏原Fel d 1抗原氨基酸残基的第25‑41位氨基酸残基所示区段、第46‑59位氨基酸残基所示区段、第85‑98位氨基酸残基所示区段、第132‑140位氨基酸残基所示区段和第145‑153位氨基酸残基所示区段。本发明的实验证明了,该嵌合肽cFel d 1免疫动物后所获得的抗体效价较高,可与猫过敏原完整Fel d 1蛋白特异性结合,并优于以完整Fel d 1蛋白制备的多克隆抗体(效价高8倍)。
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