一种支原体突变株及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN118460446B

    公开(公告)日:2024-11-15

    申请号:CN202410931671.3

    申请日:2024-07-12

    Abstract: 本发明提供了一种支原体突变株及其制备方法与应用,所述支原体突变株中同时含有两个LoxP和一个FRT位点,FRT位点位于两个LoxP位点之间;或者同时含有一个LoxP和两个FRT位点,LoxP位点位于两个FRT位点之间;所述LoxP和FRT位点位于非开放式阅读框中。还包括制备支原体突变株所用的载体,制备单基因缺失株所用的载体以及构建单或多基因缺失株的方法。更进一步的,本发明还提供了用来制备无外源基因表达的基因缺失型支原体的方法。通过本发明的技术方案,可以高效的利用FRT或者LoxP位点制备各种感兴趣的基因缺失株。并可进一步的制备无外源蛋白表达的基因缺失型支原体。与现有技术相比本发明实验成本低,实验效率高,实验周期短,不需要先建立支原体缺失株文库。

    一种动物原代干细胞除菌培养液的制备方法

    公开(公告)号:CN112080461B

    公开(公告)日:2022-03-22

    申请号:CN202010959879.8

    申请日:2020-09-14

    Abstract: 本发明属于分离培养原代干细胞技术领域,公开了一种动物原代干细胞除菌培养液的制备方法,无菌条件下,取孕中期绵羊胎儿,剪切相应组织于培养液II中静置;采用组织机械分离方法分离,用培养液I于37℃5%CO2饱和湿度条件下培养绵羊胎儿组织原代细胞48h~96h;细胞克隆出现后用D‑PBS洗3遍,挑取状态较好的细胞克隆用培养液III培养,培养至3~4代冻存备用。本发明所配置的培养液能100%确保在96h内分离培养动物原代干细胞时无细菌性污染发生。同时本发明所采用的培养液能够保证分离的动物原代细胞保持干细胞特性。本发明能够确保在从动物组织中分离培养原代的干细胞的过程不发生细菌或真菌性污染。

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