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公开(公告)号：CN116199758A
公开(公告)日：2023-06-02
申请号：CN202310192142.1
申请日：2023-03-02
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07K14/415 , C12N15/29 , C12N15/84 , C12N1/21 , C12N15/11 , A01H5/08 , A01H5/02 , A01H5/00 , A01H6/20 , A01H6/74
Abstract: 本发明公开了梨转录因子PbrMYB24及其促进石细胞中木质素和纤维素合成应用。分离自‘砀山酥梨’的转录因子PbrMYB24基因，其核苷酸序列为SEQ IDNo.1所示。通过在梨果实中瞬时过量表达，证实了PbrMYB24可以促进果实石细胞和木质素和纤维素的积累过程；过表达PbrMYB24的转基因梨果肉愈伤组织和拟南芥花序茎中，木质素含量和纤维素含量显著增加，同时间苯三酚盐酸染色，翻红固绿染色和卡尔科弗卢尔荧光染色信号显著增强。由此证明PbrMYB24基因参与调控梨果实石细胞中木质素和纤维素的形成。
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公开(公告)号：CN114891793A
公开(公告)日：2022-08-12
申请号：CN202210660916.4
申请日：2022-06-13
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种梨CRISPRa基因转录激活系统及其应用，属于植物基因工程技术领域。包括靶基因的选择；sgRNA的设计；CRISPRa基因转录激活载体的构建；梨愈伤组织的遗传转化；愈伤组织中梨CRISPRa基因转录激活倍数的统计与分析；靶基因转录激活的愈伤组织表型鉴定与分析。本发明构建了一种高效的梨CRISPRa基因转录激活系统，并实现了梨花青苷代谢通路靶基因PybZIPa的单基因激活以及PyMYB114和PybHLH3双基因激活，PyDFR、PyANS和PyUFGT的多基因同时激活，得到了与预期相符的基因功能获得型的表型和花青苷合成结构基因的表达模式，对梨花青苷代谢通路相关靶基因进行了功能鉴定，为梨中基因功能研究和分子遗传育种提供了更高效简便的途径。
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公开(公告)号：CN112876550A
公开(公告)日：2021-06-01
申请号：CN202110159812.0
申请日：2021-02-05
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了梨PbrSTONE基因及其应用。一种分离自‘砀山酥梨’具有调控梨果实石细胞发育的PbrSTONE基因，其核苷酸序列为SEQ ID No.1所示，其编码的氨基酸序列为序列表SEQ ID No.2所示。通过在梨果实中瞬时过量表达以及基因沉默技术，证实了PbrSTONE可以改变果实石细胞和木质素的积累过程；过表达PbrSTONE的转基因拟南芥花序茎中，木质素含量及其G型单体显著增加，同时木质化束间纤维细胞层数增多，导管细胞的次生细胞壁显著加厚。由此证明PbrSTONE基因参与调控梨果实石细胞木质素的形成。
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公开(公告)号：CN109810990A
公开(公告)日：2019-05-28
申请号：CN201910008908.X
申请日：2019-01-04
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/54 , C12N9/10 , C12N15/74 , C12N1/21 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/74 , C12N15/113 , C12Q1/6895
Abstract: 本发明公开了梨转录因子PyGSTf12及其重组表达载体和应用。一种分别分离自‘红早酥’及其绿色芽变的梨PyGSTf12和它的启动子序列差异，以此作为鉴定红绿果皮的分子标记的应用，其核苷酸序列分别如SEQ ID No.31所示和SEQ ID No.32。通过双荧光素酶报道系统，农杆菌介导瞬时遗传转化方法证明了PyGSTf12受转录因子PyHY5和PyMYB114共转化促进草莓和梨果实花青苷的积累，进而结合PyGSTf12启动子促进花青苷的转运的功能。PyGSTf12基因的发现，为促进梨果皮花青苷合成的分子育种提供新的基因资源，为实施绿色农业提供新的遗传资源，该遗传资源的开发利用有利于降低农业成本和实现环境友好。
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公开(公告)号：CN114107366B
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202111341800.6
申请日：2021-11-12
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种梨果肉愈伤组织木质素合成的高效诱导体系及应用。该高效诱导体系，由继代培养基和处理培养基组成；所述的继代培养基通过以下方法配制：1L水中加入4.74g MS固体培养基和30g蔗糖并加热溶解，调pH至5.8～6.0，然后加入8g琼脂粉和4.5uM 2,4‑D；所述的处理培养基通过以下方法配制：1L水中加入4.74g MS固体培养基和30g蔗糖并加热溶解，调pH至5.8～6.0，然后加入8g琼脂粉和EBR(表油菜素内酯)，其中EBR浓度为0～10uM。该体系具有实用、高效的优点，为梨石细胞相关基因在同源系统中基因功能验证提供更高效、便捷的途径。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107267522B
公开(公告)日：2020-04-21
申请号：CN201710485838.8
申请日：2017-06-23
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/08 , A01H6/82
Abstract: 本发明公开了梨转录因子PyMYB114及其重组表达载体和应用。一种分离自‘八月红’梨具有促进植物器官脱落功能的转录因子PyMYB114基因，其核苷酸序列为SEQ ID No.1所示，其编码的氨基酸序列为序列表SEQ ID No.2所示。通过农杆菌介导遗传瞬时转化方法把PyMYB114与它的辅助因子PybHLH3共同转化到烟草叶片，草莓和梨果实，都能促进花青苷的生物合成。这些结果表明本发明克隆的PyMYB114基因具有促进花青苷生物合成的功能。PyMYB114基因的发现，为促进红皮梨花青苷生物合成的分子育种提供新的基因资源，为实施绿色农业提供新的遗传资源。
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公开(公告)号：CN107686840B
公开(公告)日：2019-11-05
申请号：CN201710768517.9
申请日：2017-08-31
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了梨转录因子PyERF3及其重组表达载体和应用。一种分离自‘红茄’梨具有促进梨果皮花青苷生物合成功能的转录因子PyERF3基因，其核苷酸序列为SEQ ID No.1所示，其编码的氨基酸序列为序列表SEQ ID No.2所示。通过农杆菌介导遗传转化方法将转录因子瞬时转化烟草，草莓和梨果实，经生物学功能验证，表明本发明克隆的PyERF3基因与其它的转录因子PyMYB114和PybHLH3形成转录调控复合体促进梨果皮花青苷的生物合成的功能。PyERF3基因的发现，为促进梨果皮花青苷合成的分子育种提供新的基因资源，为实施绿色农业提供新的遗传资源，该遗传资源的开发利用有利于降低农业成本和实现环境友好。
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公开(公告)号：CN114438093B
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202210002707.0
申请日：2022-01-04
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/84 , A01H5/08 , A01H6/20
Abstract: 本发明公开了梨PbrNSC基因及其应用。一个分离自‘砀山酥梨’具有调控梨果实石细胞次生细胞壁发育的PbrNSC基因，其核苷酸序列为SEQ ID No.1所示。通过在梨果实中瞬时过量表达以及基因沉默技术，证实了PbrNSC可以改变果实石细胞次生细胞壁中纤维素和木质素的积累过程；过表达PbrNSC的转基因拟南芥花序茎中，纤维素、木质素及G型木质素单体含量显著增加，导管和束间细胞的次生细胞壁显著加厚。由此证明PbrNSC基因参与调控梨果实石细胞次生细胞壁的形成。
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公开(公告)号：CN116042650A
公开(公告)日：2023-05-02
申请号：CN202211434610.3
申请日：2022-11-16
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了梨PbrCPK28基因及其应用。一种分离自‘砀山酥梨’具有调控梨果实糖积累的PbrCPK28基因，其核苷酸序列为SEQ ID No.1所示，其编码的氨基酸序列为序列表SEQ ID No.2所示。通过在梨果实中瞬时过量表达，证实了PbrCPK28可以改变果实糖含量的高低。对PbrCPK28、PbrTST4和PbrVHA‑A1基因的深入研究，以及CPK‑TST‑VHA‑A1调控路径的构建，揭示了梨果实糖分积累的分子基础。PbrCPK28基因及其糖分调控机制解析，不仅为梨果实糖品质的改良提供了遗传资源，也为提高其他果树的果实糖分含量提供有价值的参考。
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