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公开(公告)号：CN113862171B
公开(公告)日：2023-05-23
申请号：CN202110429416.5
申请日：2021-04-21
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开一株对甲醇具有较高耐受性的芽孢杆菌，属于微生物培养、分子生物学以及应用技术领域。本发明的菌株已于2021年4月6日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 2021326。该菌株可耐受20％甚至更高的甲醇，且菌株的传代稳定性好，传代50代后仍然保持着甲醇耐受特性，可用于甲基营养化菌株构建及以甲醇为底物合成高附加值产物等方面，具有广阔的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN116042502A
公开(公告)日：2023-05-02
申请号：CN202310168298.6
申请日：2023-02-27
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种胞外分泌贻贝蛋白的基因工程菌及其构建方法与应用，属于基因工程技术领域。本发明通过信号肽筛选，将信号肽与贻贝蛋白的基因进行连接并转入质粒pET‑Duet进行融合表达。进一步的，本发明将角质酶Tfu‑0883基因转入质粒pET‑Duet，与信号肽‑贻贝蛋白融合蛋白进行共表达，最终实现贻贝蛋白的胞外分泌。此外本发明通过添加表面活性剂的方式优化了发酵培养基，从而提高胞外分泌水平。纯化后的发酵液中的贻贝蛋白产量可达20‑40mg/L。本发明实现了在大肠杆菌中胞外分泌具有生物活性的可溶性贻贝蛋白，减弱了产物积累造成的细胞毒性作用，促进了贻贝蛋白的持续合成，并且避免了后续破碎细胞操作，优化了工艺。
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公开(公告)号：CN115873885A
公开(公告)日：2023-03-31
申请号：CN202211417026.7
申请日：2022-11-14
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种响应蓝光调控的基因表达系统构建及应用，属于合成生物学领域。本发明通过在解淀粉芽孢杆菌中使用蓝光激活启动子和蓝光抑制启动子对基因的表达进行调控；启动子pBLind在蓝光照射环境下，表达eGFP的水平相较于黑暗环境下提高了1.4倍。启动子pBLrep在蓝光照射环境下，其eGFP表达的水平相较于黑暗环境下降低了10倍，实现了在解淀粉芽孢杆菌中对基因表达的快速、定向、精确调控。
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公开(公告)号：CN115786377A
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN202210876273.7
申请日：2022-07-25
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N15/70 , C12N15/12 , C12N15/62 , C12P21/02 , C07K14/435
Abstract: 本发明公开了一种双顺反子翻译偶联表达载体，所述表达载体在pET‑28a(+)质粒上插入分子伴侣、新的核糖体结合位点和目的蛋白基因，构建成双顺反子翻译偶联表达载体。进一步地，本发明构建了基因工程菌，其为以E.coli BL21(DE3)为表达宿主，利用双顺反子翻译偶联表达载体，实现贻贝蛋白Mgfp‑3B与分子伴侣SUMO和/或TrxA的共表达，促进Mgfp‑3B正确折叠翻译从而以可溶性形式表达。本发明实现了在大肠杆菌中简便快捷地生产具有生物活性的可溶性贻贝蛋白，并且双顺反子表达载体避免了融合表达造成的酶切分子伴侣操作。此外本发明通过优化的发酵培养基与发酵工艺，使可溶性贻贝蛋白产量达到200‑300 mg/L，简化了下游纯化工艺。
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公开(公告)号：CN111808777B
公开(公告)日：2022-02-11
申请号：CN202010736899.9
申请日：2020-07-28
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种骆驼刺泛菌及其应用，所述的骆驼刺泛菌，其分类命名为Pantoea alhagi，菌株名为XK‑11，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏时间为2018年3月29日，保藏编号为CGMCC NO.15526。本发明中，胞外多糖来源于骆驼刺泛菌XK‑11的发酵，具有来源稳定、成本低廉、环境友好等优势。本发明中，胞外多糖可通过促进植物光合作用，增强植物脯氨酸含量，降低植物MDA含量等方式来增强促进植物生长，增强作物抗非生物胁迫的能力。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113862171A
公开(公告)日：2021-12-31
申请号：CN202110429416.5
申请日：2021-04-21
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开一株对甲醇具有较高耐受性的芽孢杆菌，属于微生物培养、分子生物学以及应用技术领域。本发明的菌株已于2021年4月6日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 2021326。该菌株可耐受20％甚至更高的甲醇，且菌株的传代稳定性好，传代50代后仍然保持着甲醇耐受特性，可用于甲基营养化菌株构建及以甲醇为底物合成高附加值产物等方面，具有广阔的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN113462628A
公开(公告)日：2021-10-01
申请号：CN202110752387.6
申请日：2021-07-02
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株产血红素的基因工程菌及其构建方法和应用，属于分子生物学以及微生物发酵技术领域。本发明通过构建多顺反子表达载体，表达血红素途径基因gltX、hemA、hemL、hemB、hemC、hemD、hemE、hemF、hemG和hemH基因，并利用CRISPR‑Cas9技术对主要副产物合成途径的关键基因进行敲除，提高了解淀粉芽孢杆菌血红素的合成能力，使该菌株利用低廉生物质资源—菊芋粗提液作为发酵原料生产血红素，大幅降低生产成本。
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公开(公告)号：CN110669681B
公开(公告)日：2021-07-09
申请号：CN201911080658.7
申请日：2019-11-07
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明筛选出一株银耳菌株(Tremella fuciformis)，菌株名为XY，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2019年4月25日，保藏编号为CGMCC No.17675。本发明还提供了上述银耳菌株在生产银耳多糖中应用，其主要过程为将由CGMCC No.17675制得的种子液接入到固态发酵培养基中进行发酵，得到发酵液。能够制备得分子量在1000‑1500kDa的高分子量多糖及100‑300kDa的低分子量多糖，总产量可达15‑25g/L，蛋白质含量小于0.3％，相比液态发酵法有显著的成本优势，在银耳多糖的工业化生产中具有较好的应用前景。
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公开(公告)号：CN112961815A
公开(公告)日：2021-06-15
申请号：CN202110219102.2
申请日：2021-02-26
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/70 , C12N15/56 , C12N15/60 , C12N15/54 , C12N15/57 , C12N15/53 , C12P17/12 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开一株高产四氢嘧啶的基因工程菌，所述基因工程菌为E.coli ETC15，所述基因工程菌的宿主细胞为E.coli MG1655，其包含：lysA、pykF两个基因缺陷型；trc启动子控制的四氢嘧啶合成基因簇ectABC基因；trc启动子控制的菊粉外切酶cscA基因；trc启动子控制的来源于小白链霉菌的ask(M68V)和trc启动子控制的来源于大肠杆菌的fruK、gapA、ppc。本发明的基因工程菌可以利用廉价非粮原料菊芋粗提液高效合成高附加值产品四氢嘧啶，在降低生产成本的同时有效提升四氢嘧啶的产量。
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公开(公告)号：CN110144318B
公开(公告)日：2021-03-26
申请号：CN201910323921.4
申请日：2019-04-22
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了无色素低分子量威兰胶生产菌株，以Sphingomonas sp.HT‑1(保藏号CCTCC NO：M2012062)为出发菌株，分别构建了色素缺陷型并解除包囊结构的鞘氨醇单胞菌基因工程菌WG‑1，色素和降解酶基因缺陷型的鞘氨醇单胞菌基因工程菌WG‑2，以及色素和降解酶基因缺陷型并解除包囊结构的鞘氨醇单胞菌基因工程菌WG‑3。本发明中鞘氨醇单胞菌WG‑2菌株威兰胶产量较出发菌株提高10％～30％，达到35～45g/L，且分子量无明显变化(Mn：10000～20000kDa)；本发明中鞘氨醇单胞菌WG‑1、WG‑3菌株发酵生产低分子量威兰胶(Mn：500～1000kDa)，且解除包囊结构的WG‑3产量较WG‑1菌株提高了20～30％，达到20～25g/L。本发明所构建菌株，能够获得不同分子量范围的威兰胶产品，且显著提升了威兰胶的发酵水平。
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